吳巧梅 潘旭東 張淑珍

（上海市金山區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 201500）

流行性腹瀉病毒（PEDV）能導(dǎo)致豬流行性腹瀉?。≒ED），主要感染豬的胃腸道，導(dǎo)致一些臨床癥狀，如腹瀉、嘔吐、脫水，但1 周齡內(nèi)哺乳仔豬感染后具有較高的死亡率。最早在20世紀(jì)70年代，PEDV 在歐洲被發(fā)現(xiàn)并隨后傳播到世界其他地方。在亞洲，PEDV 存在于許多豬肉生產(chǎn)國(guó)，包括韓國(guó)、中國(guó)、日本、越南和菲律賓。高致病性PED 在2010年和 2013年分別在亞洲和美洲爆發(fā)，導(dǎo)致新生仔豬死亡率高達(dá)100%，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在臨床傳播過(guò)程中，PEDV 其基因組不停的變異進(jìn)化、致病力不斷加強(qiáng)，疫苗保護(hù)效率較低，給PEDV 防控增加了難度。

1 流行病學(xué)

PEDV 屬于冠狀病毒科中的α-冠狀病毒屬，是單股正鏈有囊膜的RNA 病毒。1971年英國(guó)首次出現(xiàn)并暴發(fā) PED，隨后PED 在歐洲開(kāi)始流行，并在2014年后，PED 逐漸再次于歐洲流行。2013年美洲暴發(fā)并開(kāi)始流行PED。我國(guó)自1983年零星暴發(fā)PED，但自 2010年起，國(guó)內(nèi)出現(xiàn)了高致病性PEDV 新毒株，其與美國(guó)的流行毒株同源性高達(dá)99.4%，表明我國(guó)豬場(chǎng)PED 形勢(shì)仍很嚴(yán)峻。

2 傳播方式

經(jīng)研究表明，PEDV 主要經(jīng)過(guò)糞便和口傳播，發(fā)病豬和帶病豬是主要傳染源，病豬的排泄物、嘔吐物及其他受污染的物品都可引起健康豬發(fā)病，而運(yùn)豬用的車輛及飼料等也可引起發(fā)病。成年豬感染PEDV 后雖不發(fā)病，但其攜帶的病毒也有可能導(dǎo)致仔豬發(fā)病死亡。在感染母豬的乳汁中也可檢測(cè)到病毒，但含量極低，不能排除PEDV 垂直傳播的可能。該病主要發(fā)生在寒冷的冬季，極少數(shù)在夏季也可引起發(fā)病，呈季節(jié)流行性和地方流行性。

3 發(fā)病癥狀

PEDV 豬流行性腹瀉病可引起豬嘔吐、水樣腹瀉、脫水等癥狀，可以感染各年齡段的豬，但對(duì)1 周齡內(nèi)仔豬危害最大，致死率高達(dá)100%。發(fā)病初期，病豬體溫升高1～2℃，仔豬出現(xiàn)精神萎靡、食欲減退等癥狀，并伴隨黃色或白色黏稠糞便，后期仔豬排水樣糞便，1 周齡內(nèi)仔豬腹瀉3～4d，最終仔豬因脫水而死亡。其他年齡段的豬感染該病后癥狀輕微，出現(xiàn)腹瀉和嘔吐現(xiàn)象，持續(xù)5～7d，在發(fā)病數(shù)天后即可恢復(fù)正常，通常不會(huì)引起死亡，但對(duì)豬的生長(zhǎng)發(fā)育和生產(chǎn)性有一定影響。

4 病理變化

病死豬經(jīng)剖檢后發(fā)現(xiàn)PEDV 主要感染豬的消化系統(tǒng)。剖檢發(fā)現(xiàn)病死豬胃內(nèi)有黃白色乳凝塊，胃上有充血和出血現(xiàn)象；腸管內(nèi)有黃色液體，較正常腸管體積增大，腸壁透明，小腸黏膜充血，腸系膜也有充血現(xiàn)象，位于腸系膜上的淋巴結(jié)有水腫現(xiàn)象，其他器官無(wú)肉眼可見(jiàn)病變。經(jīng)過(guò)組織學(xué)觀察可見(jiàn)發(fā)病豬的小腸絨毛變短增粗，絨毛上皮細(xì)胞發(fā)生脫落，說(shuō)明病毒在小腸上進(jìn)行大量復(fù)制，病變主要集中的病死豬的小腸部位。

5 診斷與防治

目前針對(duì)PEDV 的診斷主要依靠實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)，主要方法有病毒分離培養(yǎng)，病毒純化，RT-PCR 檢測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），血清中和試驗(yàn)，熒光定量 PCR，環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP），原位雜交技術(shù)等方法，但為了快速診斷PED，一般采用 RT-PCR 和 ELISA 試驗(yàn)，具有速度快，準(zhǔn)確率高的優(yōu)勢(shì)。

隨著我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的不斷發(fā)展，PED 對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的影響也日趨增大。為了預(yù)防、控制PED 的流行，美洲和歐洲豬場(chǎng)主要通過(guò)返飼和撲殺來(lái)凈化豬場(chǎng)，但返飼會(huì)增加仔豬感染其他病毒的幾率，造成更大的經(jīng)濟(jì)損失，撲殺造成的經(jīng)濟(jì)損失更為嚴(yán)重，最有效的方式是嚴(yán)格控制病毒進(jìn)入豬場(chǎng)，最好采用全進(jìn)全出方式，在飼養(yǎng)期間合理安排消毒免疫工作，加強(qiáng)飼料營(yíng)養(yǎng)，根據(jù)實(shí)際情況安排科學(xué)的免疫程序等，對(duì)有可能感染的人員、車輛、飼料等進(jìn)行全方位消毒滅源。對(duì)母豬免疫接種使仔豬獲得先天性免疫也是有效的防治方法。目前，規(guī)模化豬場(chǎng)主要依靠疫苗來(lái)預(yù)防PED 爆發(fā)，市場(chǎng)上主要包含傳統(tǒng)疫苗和基因工程疫苗。

5.1 傳統(tǒng)疫苗

我國(guó)早期使用的是病豬小腸內(nèi)容物制備而成的組織滅活苗，但由于內(nèi)容物內(nèi)有效病毒的含量不定導(dǎo)致效果不佳。1994年，由馬思奇等利用PEDV 的野毒株制備細(xì)胞滅活苗取得良好效果。隨后，研究人員制成二聯(lián)滅活苗，同樣有良好的免疫效果，但最近幾年針對(duì)高致病性PEDV 的滅活苗免疫效果不佳。同時(shí)使用的還有由Kweno 等人利用連續(xù)傳代方法制備的弱毒疫苗對(duì)PEDV 也有良好的免疫效果，并且安全性較高。近幾年，國(guó)內(nèi)哈爾濱獸醫(yī)研究所開(kāi)發(fā)的二聯(lián)弱毒苗和三聯(lián)弱毒苗也已投入市場(chǎng)使用，顯示也有一定的免疫效果。但弱毒疫苗有可能演變?yōu)橐岸局?，出現(xiàn)毒力返強(qiáng)現(xiàn)象，也存在一定缺陷。

5.2 基因工程疫苗

針對(duì)傳統(tǒng)疫苗免疫效果差、制備時(shí)間長(zhǎng)、運(yùn)輸困難、安全性低等缺點(diǎn)，基因工程苗具有誘導(dǎo)位點(diǎn)專一、安全性高、運(yùn)輸方便等優(yōu)勢(shì)，目前針對(duì)PEDV 的基因工程苗主要包括重組活載體疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗等。韋顯凱等人在2008年將PEDV S 基因中部分片段克隆至腺病毒表達(dá)載體，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明此表達(dá)載體可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生抗體；2012年，焦茂興等人將PEDV S 段全基因克隆至腺病毒載體免疫后產(chǎn)生的血清能和PEDV 病毒發(fā)生血清學(xué)反應(yīng)，同時(shí)還有相關(guān)基因活載體疫苗如乳酸菌疫苗、減毒沙門(mén)氏菌重組疫苗等對(duì)PEDV 也有一定的防治效果。亞單位疫苗包括原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)，針對(duì)PEDV 制備的亞單位疫苗對(duì)該病毒有良好的免疫原性。核算疫苗針對(duì)病毒免疫性更強(qiáng)，肌注此疫苗后小鼠可產(chǎn)生相應(yīng)抗體。

總之，豬流行性腹瀉有愈發(fā)嚴(yán)重的趨勢(shì)，對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)此病的預(yù)防控制工作，保證仔豬成活率，切實(shí)提高養(yǎng)殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。