■張成喜 孫國(guó)強(qiáng)

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島266109）

過瘤胃蛋氨酸（Rumen-protected Methionine，RPMet）又被稱為瘤胃保護(hù)性蛋氨酸，就是將蛋氨酸經(jīng)過物理或化學(xué)方法修飾處理保護(hù)起來，盡可能減少蛋氨酸在瘤胃中的降解率，保證其在瘤胃后消化道中有效釋放被機(jī)體所利用[1]。肉桂醛（Cinnamic alde-hyde，CA）又被稱為桂醛、桂皮醛、3-苯基-2-丙烯醛等，作為一種新型的植物提取物，具有殺菌防腐、降糖調(diào)脂和促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)等功效[2-3]。血液生化指標(biāo)是動(dòng)物體生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，通過檢測(cè)血清生化指標(biāo)可以間接了解RPMet和CA對(duì)奶牛營(yíng)養(yǎng)狀況和健康狀況的影響。孫華等[4]研究過瘤胃蛋氨酸對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響時(shí)指出，飼糧中添加RPMet可以明顯增加血漿中總蛋白、白蛋白、球蛋白的含量，明顯降低血漿中尿素氮的含量。方秋紅等[5]研究了肉桂油對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及血液生化指標(biāo)的影響，結(jié)果表明，飼糧中補(bǔ)飼50 mg/kg的肉桂油可以顯著提高仔豬血液中總蛋白和白蛋白的含量，并有降低血液尿素氮含量的趨勢(shì)。目前，RPMet和CA聯(lián)合使用對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)影響的研究鮮有報(bào)道，最適添加量組合也尚不清楚。本試驗(yàn)擬在前期試驗(yàn)最適添加量的基礎(chǔ)上，將RPMet[(25±5)g]和CA[(18±3)g]分別設(shè)置3個(gè)水平，共9個(gè)不同水平組合，探究RPMet和CA的最適添加量組合，探究RPMet和CA聯(lián)合使用對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響，同時(shí)也為RPMet和CA在奶牛生產(chǎn)上的聯(lián)合使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，選用青島奧特奶牛良種場(chǎng)年齡、體重、胎次、產(chǎn)奶量、乳成分和泌乳期[（90±15)d]相近的荷斯坦奶牛40頭，分為4組，每組10頭。RPMet和CA的添加量見表1。每頭奶牛每天預(yù)留0.5 kg精料作為載體與RPMet和CA混合，剩余的精料與粗飼料混勻后制成全混合日糧（TMR），RPMet和CA與精料混勻后隨TMR料一起飼喂。整個(gè)試驗(yàn)期為75 d，其中預(yù)試期15 d，正試期60 d。試驗(yàn)所用的過瘤胃蛋氨酸（過瘤胃率為85%）和肉桂醛均由青島潤(rùn)博特生物科技有限公司提供，其中RPMet為白色顆粒狀物質(zhì)，其組成為DL-蛋氨酸、二氧化硅等，DL-蛋氨酸≥60%、水分≤12%；CA為白色粉末狀物質(zhì)，其組成為肉桂醛、二氧化硅和淀粉等，肉桂醛≥5%、水分≤12%。

1.2 飼養(yǎng)管理

每日采用利拉伐擠奶機(jī)擠奶2次（4:00、16:00），每日飼喂TMR料2次（4:30、16:30），并且確保奶牛每日有20 h以上時(shí)間可以接觸到TMR料。試驗(yàn)牛采食后可以在運(yùn)動(dòng)場(chǎng)自由飲水和運(yùn)動(dòng)，按照常規(guī)對(duì)其進(jìn)行驅(qū)蟲、光照和管理。TMR料組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表1 各組飼糧RPMet和CA添加量[g/(d·頭)]

表2 TMR料組成和營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 試樣采集及處理

分別在預(yù)試期第1 d，正試期第30 d，正試期第60 d，早上飼喂前頸靜脈采血20 ml/頭，在2 000×g下離心15 min，取上層血清，-20℃冷凍保存。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 血液生化指標(biāo)

將處理好的血清樣品送青島金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司，檢測(cè)血清中血糖、總蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶等指標(biāo)的含量。

1.4.2 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2016軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理。使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's多重比較檢驗(yàn)組間差異顯著性，以P＜0.05和P＜0.01分別表示差異顯著和極顯著，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果

添加不同水平組合RPMet和CA對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響見表3。在血糖含量方面，以HL組最低，其極顯著低于C組、LH組、MH組（P＜0.01），顯著低于LM組、HH組（P＜0.05）；在總蛋白含量方面，以HL組最高，其極顯著高于C組、LH組（P＜0.01），顯著高于MH組、HH組（P＜0.05）；在白蛋白方面，也以HL組最高，其極顯著高于C組（P＜0.01），顯著高于LH組、MH組；在尿素氮含量方面，以HL組最低，其極顯著低于C組，顯著低于LM組、LH組、MH組、HH組；在胰島素含量方面也以HL組最低，其顯著低于C組（P＜0.05）；在生長(zhǎng)激素含量方面，以HL組最高，其極顯著高于C組（P＜0.01）。飼糧中添加RPMet和CA對(duì)奶牛血清中球蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和肌酐酸含量無顯著影響（P＞0.05）。

表3 過瘤胃蛋氨酸和肉桂醛對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響

表3（續(xù)） 過瘤胃蛋氨酸和肉桂醛對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響

3 討論

血液生化指標(biāo)是動(dòng)物體生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，其含量和變化規(guī)律是動(dòng)物機(jī)體重要的生物學(xué)特征，通過檢測(cè)血清生化指標(biāo)可以間接了解奶牛的營(yíng)養(yǎng)狀況和健康狀況。血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和尿素氮（BUN）是反應(yīng)機(jī)體蛋白質(zhì)代謝狀況的重要指標(biāo)[7]。其中血清TP是指在肝臟內(nèi)合成的血清ALB和球蛋白（GLOB）含量之和，TP作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的載體具有維持血漿滲透壓的作用，同時(shí)也是機(jī)體蛋白質(zhì)的重要來源，用于修補(bǔ)機(jī)體組織和提供能量；機(jī)體攝入的未被利用的蛋白質(zhì)，經(jīng)過氨基酸的脫氨基作用和肝臟的鳥氨酸循環(huán)最終生成尿素，由血液循環(huán)運(yùn)輸至腎臟然后排出體外，因此通過測(cè)定血清中BUN的含量可以間接了解奶牛的氮代謝狀況，進(jìn)而評(píng)估奶牛飼糧蛋白質(zhì)的利用情況[8]。在本試驗(yàn)條件下，飼糧中聯(lián)合添加RPMet和CA后，顯著提高了血清中TP和ALB的含量，顯著降低了血清中BUN的含量，這與劉艷豐[9]和方秋紅等[5]的研究結(jié)果一致，說明RPMet和CA能夠明顯增強(qiáng)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成代謝，提高了飼糧氮沉積[10-11]?？赡苁且?yàn)镽PMet和CA抑制了瘤胃微生物的脫氨基作用，提高了氨態(tài)氮的利用率，促進(jìn)了瘤胃微生物蛋白的合成，進(jìn)而提高了飼糧氮沉積。反芻動(dòng)物血糖（GLU）主要來源于體內(nèi)的糖異生作用，奶牛GLU的正常濃度為（3.10±0.47）mmol/l[12]。本試驗(yàn)中，飼喂RPMet和CA后顯著降低了試驗(yàn)牛血清中GLU和胰島素（INS）的含量，顯著提高了血清中生長(zhǎng)激素（GH）的含量，但是GLU濃度的變化均在正常范圍之內(nèi)。可能是因?yàn)轱曃筊PMet和CA后促進(jìn)了奶牛的泌乳活動(dòng)，奶牛對(duì)能量的需求增加，導(dǎo)致血糖含量降低；胰島素是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖含量的主要激素，其含量下降有利于維持奶牛機(jī)體的血糖平衡。GH是腺垂體分泌的具有種屬特性的蛋白質(zhì)激素，是調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育和三大代謝過程的一個(gè)重要的內(nèi)分泌因子；牛GH能夠調(diào)節(jié)機(jī)體物質(zhì)代謝，促進(jìn)GLU吸收以及碳水化合物和脂肪的分解，調(diào)節(jié)核酸與蛋白質(zhì)的合成，提高飼料的轉(zhuǎn)化率，還能提高奶牛的產(chǎn)奶量[13]。當(dāng)肝臟或心臟受到損傷時(shí)，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量將會(huì)升高，在本試驗(yàn)中各組間谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量差異不顯著，說明飼喂RPMet和CA不會(huì)對(duì)奶牛的肝臟和心臟造成損傷。

4 結(jié)論

綜合考慮奶牛的血液生化指標(biāo)，在本試驗(yàn)條件下，最佳添加量組合為過瘤胃蛋氨酸30 g/(d·頭)，肉桂醛15 g/（d·頭）。