張玉林,胡正飛,劉 超,張飛燕,馬玉華,張曉迪,王 蕓,呂龍寶,2*

(1.中國科學院昆明動物研究所，昆明 650223; 2. 中國科學院昆明靈長類研究中心，昆明 650223)

獼猴(Macacamulatta)是一種很重要的實驗動物，其進化史與人類親緣關系最接近，遺傳物質(zhì)有 75% ～98.5%與人類遺傳物質(zhì)有同源性，被科學家們廣泛應用于生命科學的各個領域，還被科學家們作為人的“替身”建立各種人類疾病的動物模型，如帕金森、老年癡呆、糖尿病、酒精肝、脂肪肝等，同時也被應用于疫苗生產(chǎn)和檢定[1]。然而，獼猴的體質(zhì)健康狀況嚴重影響到實驗數(shù)據(jù)的重復性，為了確?？蒲袛?shù)據(jù)的重復性與可信度，需挑選體質(zhì)狀況較好的獼猴作為實驗動物，并且在試驗過程中，不斷對實驗獼猴的健康狀況進行監(jiān)控。目前，動物健康狀況評價方面的研究報道較多，尤其是有蹄類動物[2-3]。常見的評價動物健康狀況的指標有營養(yǎng)狀況指標、免疫學指標、內(nèi)分泌指標以及寄生蟲感染程度指標等[3-4]。在奶牛的飼養(yǎng)管理上常應用形態(tài)特征評價法中的體況評分法進行評價[5]。據(jù)劉文華等對林麝生物學特性觀察及體況等級評定標準中，將體重，體長，外觀等指標作為評價體系中的一部分[6]。廖婷婷等對“圈養(yǎng)成年雌性大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)體況評分標準與營養(yǎng)需要參考范圍的制定”的研究中，將體重、糞便、外形等的評分都作為主要的評價指標[3]。玉山江等對“驢體況評分及營養(yǎng)需要的研究進展”的研究中，將采食量作為評價指標的一部分[7]。

然而由于獼猴的經(jīng)濟價值、使用價值、以及在研究過程中的使用頻率和使用年限上都遠遠高于奶牛、驢等有蹄類動物。有文獻報道，獼猴屬動物可以活到30歲左右，雌性獼猴3.5～22歲都具有生殖能力，雄性獼猴在6～25歲都具有生殖能力[8]。據(jù)一線生產(chǎn)實踐統(tǒng)計，獼猴的平均使用年限在20～25年之間。獼猴人工飼養(yǎng)管理技術，疾病預防等方面的報道文獻較多，但關于獼猴體況評價的評定標準，國內(nèi)外未見系統(tǒng)報道。因此，建立獼猴的體況評價體系是十分必要。本文通過對獼猴飼養(yǎng)過程中的日常臨床觀察，日常行為學觀察，并結(jié)合多年的獼猴養(yǎng)殖生產(chǎn)實踐經(jīng)驗，對獼猴的精神狀態(tài)、營養(yǎng)狀況、采食狀況、肢體健康狀況、短期體重增減情況、年齡以及動物肥胖度等方面進行評分，初步建立獼猴體況評價體系，旨在為選擇健康的獼猴作為實驗動物提供參考，也為獼猴的飼養(yǎng)管理、疾病防治、提供科學依據(jù)。

1 評價方法

結(jié)合11年對獼猴的飼養(yǎng)繁殖管理經(jīng)驗，筆者每日對動物進行巡視，查房、治療等，觀察動物的精神狀況、營養(yǎng)狀況、肢體健康狀況，并記錄動物采食量、測量動物體重、體長，結(jié)合獼猴的年齡評價情況、肥胖度評價情況等七個方面進行綜合評價，并對這七個個方面進行權重劃分，根據(jù)所得分值將動物體質(zhì)健康狀況分為“Fine”、“Good”、“Normal”、“Bad”四個等級。評價方法及觀察內(nèi)容[9]如下：

1.1 精神狀態(tài)評價方法

精神狀態(tài)的評價是通過觀察獼猴的眼神，活動，被毛狀況、對外界刺激的反應能力等四個方面來判定。

1.1.1 眼神

正常獼猴眼睛明亮有神，與人對視時目光鋒利或和藹。異常動物眼睛會有意或無意的隨意掃視，有意避讓與人對視、或目光呆滯、或目光沉重，似酒醉感、或雙目無力，眼眶凹陷下去，形成“黑眼圈”、或雙目失明。

1.1.2 活動性

正常獼猴聽覺靈敏、警惕性強、運動敏捷，常在籠舍內(nèi)來回走動，有人員經(jīng)過或路過時，它會猛撲過來，抓住籠具不停的“搖、閃”籠具，試圖攻擊人，或與人保持一定距離，抓住籠具不停的上下、或左右搖晃腦袋，“噠”著嘴盯著人員看。異常動物無精打采、行為活動無力、垂頭抱腹、躺臥不起、或精神狂躁、撕咬不停、常有自殘現(xiàn)象發(fā)生等。精神狀態(tài)異常的獼猴，從其行為表現(xiàn)形式來分，又可以分為昏迷，主要表現(xiàn)為臥于籠舍內(nèi)，呼吸異常；嗜睡，主要表現(xiàn)為臥于籠舍內(nèi)，呼吸正常；萎靡不振或沉郁，主要表現(xiàn)為垂頭抱腹，站立不穩(wěn)或不自主的顫抖，左右搖晃，甚至倒在籠舍內(nèi)；亢進或亢奮，主要表現(xiàn)為不自主的用身體去撞擊籠舍撕咬自己的肢體，如手或腳或尾巴、或不間斷的在籠舍內(nèi)轉(zhuǎn)圈，打滾等。

1.1.3 被毛狀況

正常獼猴體態(tài)均勻，體表光滑、被毛清潔、有光澤，常有自我理毛或相互理毛的習慣，無脫毛或少量脫毛(脫毛應該與外傷、咬架形成的脫毛區(qū)分開)。異常獼猴毛發(fā)蓬亂無光澤、或嚴重脫毛、或尾部毛發(fā)被大量糞便包裹。

1.1.4 對外界的刺激

正常獼猴在吆喝的情況下會迅速躲閃，或離開，或試圖攻擊人。異常動物在吆喝的情況下會驚恐萬分，不安，或尖叫，表現(xiàn)出疼痛的癥狀。

1.2 營養(yǎng)狀況評價方法

營養(yǎng)狀況的評價是根據(jù)動物肌肉豐滿程度、皮下脂肪蓄積量和被毛的狀態(tài)和光澤度來判斷。一般可將營養(yǎng)狀況分為良好、過剩(肥胖)、中等、不良和極差(消瘦)5種。營養(yǎng)狀況良好的動物，表現(xiàn)為被毛平順光亮，皮膚有彈性，肌肉豐滿，皮脂豐厚，輪廓豐圓，骨不顯露(骨骼棱角不突出)，總的來看是勻稱，壯實；營養(yǎng)不良的動物，表現(xiàn)為被毛蓬松、稀疏，皮膚無彈性，無皮下脂肪，肋骨清晰可見，輪廓多角多棱或有皮下有脂肪但松弛無彈性現(xiàn)象；營養(yǎng)狀況過剩的動物，背部，腹部均有大量脂肪沉積，被毛平順光亮，皮膚有彈性；營養(yǎng)狀況中等的動物，介于營養(yǎng)狀況良好和營養(yǎng)不良之間；營養(yǎng)狀況極差的動物，又稱“消瘦”，可以用“皮包骨頭”、“骨瘦如柴”來形容[10]。

1.3 采食狀況評價方法

近年來，隨著獼猴飼養(yǎng)技術的日益成熟，全價顆粒飼料或全價膨化飼料獼猴已應用于獼猴的生產(chǎn)，只要動物采食狀況良好，所有營養(yǎng)成分都能達到均衡；在規(guī)范獼猴飼飼料投喂方面，各研究機構都會用標準操作規(guī)程(standard operating procedure, SOP)來規(guī)范投喂時間和飼料投喂量。

飼料投喂后，獼猴會在很短的時間內(nèi)進行采食，儲存于頰囊中，這是獼猴的一個重要的采食習慣。因此獼猴采食時間和頰囊內(nèi)是否飽脹也可以作為我們判斷獼猴采食狀況的重要依據(jù)。在評價體系中，動物的采食狀況評價主要是通過判斷近期動物采食量和采食行為來完成的。通常采食狀況可以分為采食狀況良好、中等、差、極差四個方面。

采食狀況良好的動物，主要表現(xiàn)為采食量在飼喂總量的70%以上(人類提倡七成飽)，采食時間一般都會在飼料投喂后30分鐘以內(nèi)完成；采食狀況中等的動物，主要表現(xiàn)為采食量介于飼喂總量的40%～70%之間的情況，或飼料投喂半小時后慢慢才會進行采食的狀態(tài)；采食狀況差的動物，主要表現(xiàn)為采食量低于飼料投喂總量的40%、或僅僅采食部分水果、蔬菜等青儲飼料、或僅采食用于調(diào)養(yǎng)或維持動物體質(zhì)方面的食物，如米粉、奶粉等；采食狀況極差的動物，主要表現(xiàn)為食欲廢絕，完全不進食的癥狀，僅能靠靜脈注射營養(yǎng)液來維持身體正常功能。

1.4 肢體健康狀況評價

肢體殘疾會導致很多不良的影響，比如肢體負重能力下降，跳躍能力降低、肌肉萎縮、動物在群體內(nèi)等級下降等。尤其是癱瘓，常導致動物大小便失禁，呼吸困難，甚至會威脅動物生命[11]。因此肢體健康狀況也可以作為評價體系中的重要指標之一。肢體健康狀況可以分為正常、單肢殘疾、兩前肢殘疾、兩后肢殘疾、多肢殘疾5種[12]。

1.5 短期動物體重減少情況進行評估

有文獻報道，實驗動物體重的減少可以作為人道終點或動物疼痛的重要判斷依據(jù)之一[13]。因此，獼猴體重減少量也可以作為“獼猴體況評價體系”的重要指標之一。

評價方法：動物體重一周秤量一次，用上周體重與本周體重進行比較，計算體重下降量。如果連續(xù)三個周期內(nèi)，動物體重均下降很大幅度，那說明動物可能患有某種疾病。

1.6 對動物年齡進行評價

對動物年齡進行評價，主要考慮的是每個年齡段內(nèi)動物對疾病抵抗能力的強弱。結(jié)合11年的飼養(yǎng)管理經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，在實驗獼猴的飼養(yǎng)管理過程中，動物的年齡越大或年齡越小，疾病的抵抗能力就越差。

本體系將年齡分為<1歲的動物、 1～3歲的動物、4～8歲的動物、 9～15歲的動物、16～20歲的動物、20～25歲的動物、>25歲的動物7個層次。

1.7 對動物肥胖度進行評價

通過對近幾年中國科學院昆明動物研究所死亡的動物進行解剖來看，死亡的肥胖動物中，患脂肪肝，脂肪心的概率遠遠高于正常動物。死亡的肥胖動物中，大部分動物在生前進行腹部觸診，均有不同程度的疼痛，解剖來看，大部分腹部皮下脂肪，大網(wǎng)膜脂肪均有不同程度的壞死、肝臟脂肪變形，呈土黃色，且質(zhì)脆，易碎，形態(tài)模糊、心臟表面都會有一層黃色的脂肪包裹。也有研究表明，越肥胖的動物，相關疾病危險性就越大[13]。

肥胖度通常有兩種評價方法，一是BCS評價方法，二是BMI評價方法。

1.7.1 BCS評價方法

BCS(body condition score)中文譯為“體況評分”，在此主要用作動物肥胖程度的評價。筆者通過對中國科學院昆明動物研究所數(shù)百只獼猴進行反復對比評價發(fā)現(xiàn)，美國對狗和貓的體型判斷標準方法中的從1到9的評分體系更容易操作，更方便。評價方法如表1所示。

有文獻研究報道，從1到9的評分體系中， 1～3為極度消瘦體況，4為偏瘦體況，5為理想體況，6～9偏胖體況。健康動物的體形最好保持在4～5左右[13]。還有文獻報道，許多疾病如糖尿病、心臟病、關節(jié)炎等在肥胖動物身上發(fā)生的概率要遠遠高于正常動物[14]，而過瘦的動物，患有腸道寄生蟲和消化系統(tǒng)疾病的幾率會很大[15]。

1.7.2 BMI評價方法

BMI(body mass index)中文譯為“體質(zhì)指數(shù)”，是目前人類用來評定肥胖程度的一種常用的方法[16]。其計算方法為體重公斤數(shù)除以冠骶長(冠骶長測量：動物以自然俯臥姿勢，面部朝向地面，身體保持舒展，用直尺或皮尺測量動物頭頂?shù)轿哺拈L度)米數(shù)平方得出的數(shù)字。

筆者通過對中國科學院昆明動物研究所數(shù)百只獼猴的體重、冠骶長進行測量，計算出BMI值，然后與通過與BCS評價體系評價出來的結(jié)果進行比對發(fā)現(xiàn)：BMI值在25～35之間的動物，可以評價為標準體況獼猴。其對比結(jié)果如表2所示。

表1 動物肥胖度體況評分表Table 1 Animal obesity degree score of BCS

表2 體質(zhì)指數(shù)與體況評分體系對比表Table 2 Comparison table of BMI and BCS

筆者用這兩種方法對動物肥胖度評價后發(fā)現(xiàn)，BCS評價方法比BMI評價方法更適用于獼猴，更直觀，也不需要一一將動物保定和測量。

2 評分方法

從獼猴整體品質(zhì)評價方面來劃分，可以將實驗獼猴劃分為普通級獼猴和無特定病原體(SPF)級獼猴[17]。本文旨在對個體體質(zhì)健康狀況進行評價，為挑選健康獼猴作為實驗動物提供依據(jù)。各項指標評分方法：

2.1 動物精神狀態(tài)評分方法

動物精神狀態(tài)評分，主要是通過對其眼神的評分、活動性的評分、被毛狀況的評分、以及對外界刺激反應的評分的總和。動物精神狀態(tài)評分詳見表3。

2.2 營養(yǎng)狀況評分方法

在營養(yǎng)狀況評價體系中，營養(yǎng)狀況良好是最好狀態(tài)，其次分別為中等、過剩、營養(yǎng)不良、最差的是消瘦。(表4)

2.3 采食狀況評分方法

采食狀況評價體系中，主要查看動物對全價飼料采食量的記錄。(表5)

2.4 肢體健康狀況評分方法

詳見表6。

2.5 短期動物體重減少情況評分方法

詳見表7。

2.6 動物年齡評分方法

詳見表8。

2.7 動物肥胖度評分方法

2.7.1 用BCS評價方法評分體系

詳見表9。

表3 動物精神狀況評價表Table 3 Evaluation of animal mental condition

表4 營養(yǎng)狀況評價表Table 4 Nutrition status evaluation

表5 采食狀況評價表Table 5 Feeding condition evaluation

表6 肢體健康狀況評價表Table 6 Physical health evaluation

表7 動物體重變化情況評價表Table 7 Animal body weight change evaluation

表8 動物年齡評價表Table 8 Animal age evaluation

2.7.2 計算BMI值評價肥胖度的評分方法

詳見表10。

3 權重比例劃分

筆者根據(jù)在日常飼養(yǎng)管理過程中，結(jié)合實際臨床經(jīng)驗，以及各評價指標對動物健康狀況的影響等方面，對各個評價指標進行權重劃分。(表11)

4 評價結(jié)果的計算

4.1 各單項得分的計算

單項得分=單項所得評分*單項評分系數(shù)

單項評分系數(shù)=((100*單項所占權重)/單項滿分值))

表9 動物肥胖度體況評分評價表Table 9 Animal obesity evaluation of BCS

表10 動物肥胖度體質(zhì)指數(shù)評價表Table 10 Animal obesity evaluation of BMI

表11 評價指標權重劃分表Table 11 Evaluation items weights

精神狀態(tài)得分=精神狀態(tài)評分*單項評分系數(shù)((100*20%)/15)

營養(yǎng)狀況評價得分=營養(yǎng)狀況評分*單項評分系數(shù)((100*20%)/5)

采食狀況評價得分=采食狀況評分*單項評分系數(shù)((100*20%)/4)

肢體健康狀況評價得分=肢體健康狀況評分*單項評分系數(shù)((100*15%)/5)

體重變化評價得分=體重變化評分*單項評分系數(shù)((100*15%)/5)

年齡評價得分=年齡評分*單項評分系數(shù)((100*5%)/5)

肥胖度評價得分=肥胖度評分*單項評分系數(shù)((100*5%)/5)

4.2 綜合評分的計算

綜合評價得分：綜合得分=精神狀況評價得分+營養(yǎng)狀況評價得分+采食狀況評價得分+肢體健康狀況評價得分+體重變化評價得分+年齡評價得分+肥胖度評價得分。

4.3 動物體況等級的劃分

總得分在85分至100分，評價為Fine；總得分在70分至84分，評價為Good；總得分在55分至69分，評價為Normal；總得分在54分以下，評價為Bad。

5 實例說明評價系統(tǒng)

假如有一只獼猴，02年出生的、雄性獼猴，精神狀況可以評到12分、營養(yǎng)狀況評到4分、采食狀況可以評到4分、肢體健康狀況評到5分、體重變化情況評到5分、年齡方面評價，16歲，可以評到3分、肥胖度方面由于消瘦，可以評到3分。(表12)

表12 獼猴體況評價示例Table 12 Rhesus macaque condition evaluation example

6 討論

獼猴體況評價體系，主要是針對正常飼養(yǎng)的獼猴，對一些特殊模型的動物不一定適用。比如肥胖病模型，肥胖度越大，肥胖度分值就越高；抑郁癥模型，精神沉郁可能會評到很高的分數(shù)等。由于國內(nèi)外沒有對獼猴體況評價系統(tǒng)等方面的報道，本文旨在探討和摸索建立方法，對獼猴健康影響因素覆蓋面有限。在對年齡進行評價中，本文旨在考慮年齡跟人工飼養(yǎng)獼猴的難易程度的關系，并不考慮新陳代謝等的旺盛程度。在飼養(yǎng)過程中，筆者發(fā)現(xiàn)，小于3歲的獼猴較為難養(yǎng)，尤其是小于1歲的嬰猴，死亡率高，患病概率較大；大于20歲的動物，死亡率也很高，患代謝方面、心腦血管方面的疾病的概率要高于其他動物。