周朝偉 胡續(xù)雯 雷 駱 劉曉慶 任勝杰 楊旻珉 曹高祥 陳國梁 鄧星星 李 巖 李路寬

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熱應(yīng)激對銀鯽生化指標(biāo)和mRNA表達(dá)的影響*

周朝偉#①胡續(xù)雯#雷 駱 劉曉慶 任勝杰 楊旻珉 曹高祥 陳國梁 鄧星星 李 巖 李路寬

(西南大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院水產(chǎn)系 重慶 402460)

本研究旨在探討熱應(yīng)激對銀鯽()生化指標(biāo)及肝臟mRNA表達(dá)的影響，選取平均體重為(72.8±10.1) g的銀鯽，分別在熱應(yīng)激前(25℃，對照組)、熱應(yīng)激后(32℃，0 h、2 h、6 h、10 h)和恢復(fù)適溫后6 h (25℃，恢復(fù)組)的條件下，測定機(jī)體血漿乳酸(LD)、血漿葡萄糖(Glu)、肝糖原(Gly)、己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和肝臟mRNA表達(dá)量變化。研究表明，實(shí)驗(yàn)組乳酸含量從熱應(yīng)激開始至恢復(fù)期，差異始終不顯著(>0.05)；實(shí)驗(yàn)組血漿葡萄糖水平在熱應(yīng)激后0 h、2 h、6 h，極顯著高于對照組(<0.01)；實(shí)驗(yàn)組肝糖原水平在熱應(yīng)激0 h時(shí)，極顯著高于對照組(<0.01)，其余時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(>0.05)；己糖激酶活力在熱應(yīng)激后2 h，顯著高于對照組(>0.05)；丙酮酸激酶活力在熱應(yīng)激后6 h，極顯著高于對照組(<0.01)；熱應(yīng)激后2 h，肝臟中mRNA表達(dá)量達(dá)到最高(<0.01)，恢復(fù)至適溫后，表達(dá)量與應(yīng)激前無差異(>0.05)。本研究為進(jìn)一步探究銀鯽的高溫應(yīng)激作用機(jī)制及調(diào)控機(jī)理提供參考數(shù)據(jù)，同時(shí)，也為銀鯽養(yǎng)殖和育種等生產(chǎn)實(shí)踐提供相應(yīng)參考依據(jù)。

銀鯽；熱應(yīng)激；生化指標(biāo)；

應(yīng)激是一種常見的動(dòng)物生理狀態(tài)，是動(dòng)物機(jī)體對外界環(huán)境或自身內(nèi)部產(chǎn)生異常刺激時(shí)做出的各種生理應(yīng)答反應(yīng)的總和(李紅軍等, 2006)。生活在水中的魚類，容易受到水環(huán)境變化的刺激，主要的環(huán)境因子包括水溫、溶解氧、鹽度、氨和重金屬離子等，其中，水溫是重要的因素之一。當(dāng)養(yǎng)殖環(huán)境的溫度高于或低于最適生長溫度時(shí)，會(huì)引起一系列的生理或病理變化，導(dǎo)致血液中各項(xiàng)生理生化指標(biāo)改變，此時(shí)，可通過測定生化指標(biāo)來反映機(jī)體代謝和健康狀況(寧軍號等, 2017)。溫海深等(2016)研究發(fā)現(xiàn)，急性高溫脅迫可以引起許氏平鲉()機(jī)體血清中的皮質(zhì)醇、葡萄糖和蛋白等指標(biāo)變化。邵彥翔等(2017)發(fā)現(xiàn)，水溫變化會(huì)引起云龍石斑魚(♀×♂)血清總膽固醇和葡萄糖等指標(biāo)變化。何福林等(2007)研究發(fā)現(xiàn)，水溫變化會(huì)使虹鱒()的紅細(xì)胞、血紅蛋白和血糖等指標(biāo)改變。黃正瀾懿等(2016)研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激會(huì)引起齊口裂腹魚()髓過氧化物酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶等的改變。熱激蛋白(Heat shock proteins, HSPs)是一類在進(jìn)化上高度保守的蛋白，廣泛存在于生物體中。研究表明，應(yīng)激誘導(dǎo)表達(dá)熱應(yīng)激蛋白與生物體的適應(yīng)能力有重要的相關(guān)性(劉秀榮, 2015; 生安志等, 2016)。熱休克蛋白70 (HSP70)，作為目前研究最廣泛的和最保守的一族熱休克蛋白(Basu, 2002)，能在應(yīng)激情況下迅速合成，并對應(yīng)激產(chǎn)生保護(hù)耐受作用(Morimoto, 1993)。近年來，魚類HSP70在各種應(yīng)激條件下的表達(dá)情況受到廣泛關(guān)注。

銀鯽()，俗稱鯽瓜子或紅鯽，鯽的近緣亞種。隸屬于鯉形目(Cypriniformes)、鯉科(Cyprinidae)(馬波等, 2013)，是一種重要的經(jīng)濟(jì)魚類，主要分布于歐、亞大陸的溫帶水域，其經(jīng)濟(jì)性狀、適應(yīng)能力都優(yōu)于鯽魚()。目前，銀鯽在我國養(yǎng)殖范圍廣，市場需求旺盛、價(jià)格穩(wěn)定、養(yǎng)殖效益明顯。在生產(chǎn)實(shí)踐中，魚類應(yīng)對環(huán)境脅迫如高溫、高密度、缺氧和細(xì)菌等的能力存在種間特異性。本研究分析了持續(xù)熱應(yīng)激對銀鯽血漿葡萄糖、血漿乳酸等生化指標(biāo)及mRNA表達(dá)的影響，旨在為探究銀鯽高溫應(yīng)激作用機(jī)制及調(diào)控機(jī)理提供參考數(shù)據(jù)，為進(jìn)一步探究魚類應(yīng)激研究提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購自重慶市榮昌區(qū)雙河魚技中心，挑選體格健康、大小均勻的銀鯽300尾，平均體重為(72.8± 10.1) g。用4%的食鹽水浸泡10 min后，隨機(jī)平均放入6個(gè)已消毒的室內(nèi)玻璃缸(130 cm×55 cm×55 cm)內(nèi)，暫養(yǎng)馴化1個(gè)月，水溫為(25±1)℃，飼料采用通威152飼料(粗蛋白32%)，每天投喂2次(09:00和17:00)。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及樣品采集

本研究設(shè)置(25±1)℃的常溫對照組、(32±1)℃的高溫?zé)釕?yīng)激實(shí)驗(yàn)組和(25±1)℃的高溫?zé)釕?yīng)激后恢復(fù)至常溫的實(shí)驗(yàn)組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾魚。實(shí)驗(yàn)期間，于25℃隨機(jī)選取4尾魚作為空白對照，3個(gè)實(shí)驗(yàn)缸采用加熱棒(加熱棒的最高溫度為32℃)，以3℃/h(經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn)表明，3個(gè)加熱棒每小時(shí)能提高3℃)的升溫速度使水溫升至32℃，在溫度達(dá)32℃后(溫度保持在32℃不變)的0 h、2 h、6 h、10 h，每個(gè)缸各采集4尾魚作為不同時(shí)間點(diǎn)的熱應(yīng)激組，3個(gè)實(shí)驗(yàn)缸中剩余樣本快速使用冰袋降溫至25℃，6 h后，從每個(gè)缸中隨機(jī)取4尾作為恢復(fù)組。采樣時(shí)，將魚投入濃度為40 mg/L的丁香酚水溶液快速深度麻醉，靜脈取血，置于有肝素抗凝劑的EP管中，4℃、3000 r/min離心10 min，制備血漿，收集上清液，保存于-80℃。采血后解剖，取約100 mg肝胰臟，凍存于液氮中。

1.3 生化指標(biāo)的測定方法

取-80℃保存的血漿，使用南京建成生物工程研究所試劑盒，比色法測定乳酸濃度、己糖激酶活力和丙酮酸激酶活力；葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定血漿葡萄糖濃度；蒽酮法測定肝糖原含量。

1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qRT-PCR)

1.4.1 RNA提取及反轉(zhuǎn)錄 Trizol法提取總RNA，用紫外分光光度計(jì)確定RNA濃度及OD值，通過瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA完整性。參照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書(TaKaRa, 大連)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。

1.4.2 引物設(shè)計(jì)與合成 銀鯽與鯽魚具有高同源性，依據(jù)GenBank公布的鯽魚(GenBank序列號為AB092839.2)和mRNA全序列(GenBank序列號為AB039726)，使用軟件Primer 5.0設(shè)計(jì)qRT-PCR引物：HSP70 F，5￠-TGATGGAGGGAAGCC-GAAAG-3￠；HSP70 R，5￠-GAAATAGGCAGGAACTG-TGAT-3￠；β-actin F，5￠-ATGCGGAAACTGGAAAGG- 3￠；β-actin R，5￠-TGAGGGCAGAGTGGTAGA-3￠。引物由華大基因科技股份有限公司合成。

1.4.3 qRT-PCR反應(yīng) 采用SYBR Green (TaKaRa,大連)染料法，參照熒光定量說明書(Bio-Rad)進(jìn)行。對PCR產(chǎn)物進(jìn)行熔解曲線分析，同時(shí)，PCR產(chǎn)物1%瓊脂糖凝膠電泳檢測引物特異性。以1個(gè)樣品的cDNA為模板，進(jìn)行10倍梯度稀釋，分別取每個(gè)數(shù)量級稀釋液2 μl作為模板進(jìn)行qRT-PCR。反應(yīng)體系為(25 μl)：Premix Ex(2×)，12.5 μl；上下游引物各為0.5 μl；無菌水9.5 μl；cDNA模板2 μl。反應(yīng)程序：95℃預(yù)變性30 s，95℃變性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，共45個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)重復(fù)，以為內(nèi)參基因，采用2?ΔΔCt法計(jì)算相對表達(dá)量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)中所涉及的數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean± SD)表示，采用SPSS 21.0軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。在經(jīng)過方差同質(zhì)性檢驗(yàn)后，使用單因方差分析(One-way ANOVA)對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，<0.05為差異顯著，<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 熱應(yīng)激對血漿乳酸的影響

熱應(yīng)激后0 h，血漿中乳酸含量升高并達(dá)最大值(圖1)，隨著時(shí)間的增加，乳酸含量在熱應(yīng)激后2 h、6 h、10 h逐漸降低，10 h時(shí)，乳酸含量顯著低于熱應(yīng)激后0 h (<0.05)，恢復(fù)適溫6 h后，恢復(fù)組血漿乳酸含量與對照組差異不顯著(>0.05)。

圖1 熱應(yīng)激對血漿乳酸含量的影響

不同小寫字母代表差異顯著(<0.05)，不同大寫字母代表差異極顯著(<0.01)，下同

Different lowercase letters mean significant difference (<0.05), different capital letters mean highly significant difference(<0.01), the same as below

2.2 熱應(yīng)激對血漿葡萄糖的影響

與對照組相比，熱應(yīng)激后0 h、2 h、6 h和10 h的血漿葡萄糖含量升高(圖2)，且在0 h、2 h和6 h極顯著高于熱應(yīng)激前(<0.01)，恢復(fù)至適溫6 h后，恢復(fù)組血漿葡萄糖含量與對照組差異不顯著(>0.05)。

2.3 熱應(yīng)激對肝糖原的影響

熱應(yīng)激后0 h，肝糖原含量極顯著高于對照組(<0.01)；熱應(yīng)激后2 h和10 h低于熱應(yīng)激后0 h，差異極顯著(<0.01)，但與對照組無顯著差異(>0.05)?；謴?fù)至適溫6 h后，肝糖原含量低于對照組，但差異不顯著(>0.05) (圖3)。

圖2 熱應(yīng)激對血漿葡萄糖含量的影響

圖3 熱應(yīng)激對肝糖原含量的影響

2.4 熱應(yīng)激對己糖激酶活力的影響

己糖激酶活力在熱應(yīng)激后2 h達(dá)到最大值(圖4)，顯著高于應(yīng)激前(<0.05)；熱應(yīng)激后6 h，仍顯著高于對照組(<0.05)?；謴?fù)后6 h，恢復(fù)組己糖激酶活力與對照組差異不顯著(>0.05)。

2.5 熱應(yīng)激對丙酮酸激酶活力的影響

熱應(yīng)激處理后，丙酮酸激酶活力呈下降趨勢 (圖5)。熱應(yīng)激后2 h，丙酮酸激酶活力低于對照組，但差異不顯著(>0.05)，而后逐漸升高，在熱應(yīng)激后6 h達(dá)到最大值，極顯著高于對照組(<0.01)；恢復(fù)適溫6 h時(shí)，恢復(fù)組丙酮酸激酶活力低于對照組，且差異極顯著(<0.01)。

圖4 熱應(yīng)激對己糖激酶活力的影響

圖5 熱應(yīng)激對丙酮酸激酶活力的影響

2.6 熱應(yīng)激對肝臟中HSP70 mRNA表達(dá)量的影響

銀鯽遭受熱應(yīng)激時(shí)，肝臟中mRNA表達(dá)量升高(圖6)，熱應(yīng)激2 h后表達(dá)量達(dá)到最高，為對照組的1.96倍，差異極顯著(0.01)，熱應(yīng)激6 h后仍極顯著高于對照組(0.01)；恢復(fù)適溫6 h后，恢復(fù)組mRNA表達(dá)量略高于對照組，但差異不顯著(0.05)。

圖6 熱應(yīng)激對銀鯽HSP70 mRNA表達(dá)的影響

3 討論

3.1 熱應(yīng)激對銀鯽血漿生理指標(biāo)的影響

乳酸是機(jī)體無氧代謝的產(chǎn)物(鄒思湘, 2012)，本研究中，熱應(yīng)激后，銀鯽的血漿乳酸含量先升高，后逐漸降低，說明機(jī)體在熱應(yīng)激后首先會(huì)進(jìn)行無氧運(yùn)動(dòng)，然后機(jī)體進(jìn)行自身代謝調(diào)整，減緩無氧運(yùn)動(dòng)， 劉鳳華等(2002)對仔雞()的研究結(jié)果也支持這一論點(diǎn)。另外，熱應(yīng)激初期，銀鯽運(yùn)動(dòng)較為劇烈，隨后逐漸平靜，此時(shí)，乳酸濃度也隨運(yùn)動(dòng)劇烈程度先升高后降低，說明魚類血漿乳酸的濃度與其應(yīng)激后的活動(dòng)強(qiáng)度有關(guān)(Fanouraki, 2011)，這與Vijayan (1992)和Vijayan等(1997)對應(yīng)激條件下莫桑比克羅非魚()和虹鱒的研究結(jié)果一致。應(yīng)激反應(yīng)是一種耗能過程，會(huì)導(dǎo)致血漿葡萄糖水平的變化，因此，葡萄糖水平常被作為可靠的生理應(yīng)激指標(biāo)之一(Silbergeld, 1974; Sun, 1992)。熱應(yīng)激處理后，乳酸含量升高時(shí)，糖原降低；接著乳酸含量降低，血漿葡萄糖含量增加；隨后肝糖原降低，葡萄糖繼續(xù)升高，說明魚類機(jī)體代謝水平易受外界溫度的影響，隨著溫度的升高，銀鯽體內(nèi)物質(zhì)代謝逐漸加快，導(dǎo)致糖的利用率加快，糖原等轉(zhuǎn)化成葡萄糖的速率也加快，從而使得血漿葡萄糖的濃度顯著升高，此研究結(jié)果與Hyndman等(2003)的研究結(jié)果一致。隨著熱應(yīng)激時(shí)間延長，血漿葡萄糖含量逐漸降低，機(jī)體代謝雖減緩但仍在繼續(xù)，這是由于垂體-腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)能對熱應(yīng)激生理過程起到一定的調(diào)節(jié)作用(王啟軍等, 2006)，如糖異生作用加強(qiáng)，維持血漿葡萄糖恒定。同時(shí)，肝糖原表達(dá)量在熱應(yīng)激后先降低再升高，最后逐漸降低，說明肝糖原是應(yīng)激過程中的重要能量物質(zhì)。熱應(yīng)激后，肝糖原含量降到最低時(shí)，血漿中葡萄糖卻顯著升高，說明糖原是魚體內(nèi)糖的主要儲(chǔ)存形式，是魚類應(yīng)激反應(yīng)的重要能量來源，應(yīng)激后，魚體可通過分解肝糖原來提供血糖，Wendelaar Bonga (1997)對熱應(yīng)激后魚類機(jī)體的研究也與上述結(jié)論相符。

己糖激酶和丙酮酸激酶是糖酵解反應(yīng)過程中的關(guān)鍵酶，其活性的變化對機(jī)體血糖水平具有重要影響，己糖激酶和細(xì)胞膜上葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白功能相互偶聯(lián)，影響機(jī)體細(xì)胞內(nèi)葡萄糖流量和代謝(Allert, 1991)。丙酮酸激酶可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞中ATP、ADP和糖酵解的中間產(chǎn)物，來控制糖酵解速率(鄒思湘, 2012)。機(jī)體內(nèi)主要供能的是葡萄糖，并且葡萄糖的流量與己糖激酶活力緊密相關(guān)(Allert, 1991)，本研究結(jié)果顯示，熱應(yīng)激后0~2 h，己糖激酶活力與葡萄糖含量都顯著增加(<0.05)，變化趨勢幾乎一致，說明熱應(yīng)激后，機(jī)體通過己糖激酶的刺激提高血糖的流量來滿足機(jī)體的需要，機(jī)體葡萄糖的大量消耗，通過糖異生作用來補(bǔ)充。本研究中，熱應(yīng)激后2 h，銀鯽的己糖激酶活力達(dá)到最高水平，糖酵解作用加劇，糖異生作用抑制，以維持機(jī)體的血糖水平，滿足代謝的需要，說明銀鯽葡萄糖水平是通過糖酵解和糖異生這2個(gè)相對立的過程來保持的，Metón(2003)對金頭鯛()的研究也支持這一論點(diǎn)。

丙酮酸激酶(PK)在糖酵解過程中能夠起到關(guān)鍵作用(郭彪等, 2008)，本研究中，丙酮酸激酶活力在熱應(yīng)激后先降低后升高，說明隨著應(yīng)激時(shí)間的增加，耗氧率也會(huì)升高，機(jī)體供氧不足，糖酵解作用加強(qiáng)。熱應(yīng)激6 h時(shí)，丙酮酸激酶活力顯著高于對照組，這是由于機(jī)體的代謝活動(dòng)減慢，糖酵解作用降低，氧化磷酸化作用加強(qiáng)，致使丙酮酸激酶活力下降，這與郭彪等(2008)對對蝦的研究結(jié)果一致?；謴?fù)組的丙酮酸激酶活力顯著低于對照組(<0.01)，是由于糖酵解作用抑制太大，機(jī)體受影響較大，而酶活力的恢復(fù)是一個(gè)漫長的過程，所以丙酮酸激酶活力無法迅速恢復(fù)至正常值。

3.2 熱應(yīng)激對肝臟中HSP70 mRNA表達(dá)量的影響

本研究中，熱應(yīng)激后mRNA表達(dá)量顯著增加，并在2 h后達(dá)到最高，應(yīng)激后6 h和10 h，表達(dá)逐漸降低，恢復(fù)后表達(dá)量與對照組無差異，此變化趨勢與此前報(bào)道的其他水生生物研究結(jié)果一致，如：鯽魚在應(yīng)激后1 hmRNA表達(dá)量有所升高，4 h時(shí)達(dá)到最高值后逐漸降低，48 h降至最初值(蘇嶺等, 2010)；34℃持續(xù)24 h熱應(yīng)激團(tuán)頭魴()肝臟中mRNA相對表達(dá)量呈先上升后降低的趨勢(Ming，2010)；地中海貽貝()在35℃熱激1 h，16℃恢復(fù)3 h后，消化腺mRNA的含量達(dá)到最大值，隨后5~24 h內(nèi)逐漸減少(Franzellitti, 2005)；虹鱒RTG-2細(xì)胞在28℃持續(xù)應(yīng)激24 h后，2種mRNA的表達(dá)量均呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢，應(yīng)激后3 h表達(dá)量達(dá)最大值(王艷妮等, 2015)；大正三色錦鯉()32℃應(yīng)激后2 h和26 h，mRNA的相對表達(dá)量與應(yīng)激前相比顯著上升，應(yīng)激后6~22 h，相對表達(dá)量與應(yīng)激前無顯著差異(>0.05)(張崇英等, 2012)。以上結(jié)果說明，調(diào)節(jié)熱應(yīng)激蛋白的表達(dá)量是機(jī)體細(xì)胞應(yīng)對熱應(yīng)激的反應(yīng)之一(曲凌云等, 2005)，瞬時(shí)熱刺激誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)變性蛋白、異常蛋白量增加，正常狀態(tài)的蛋白平衡被打破，從而引發(fā)一些維持正常生命功能的酶活減弱甚至喪失?；蛲ㄟ^相關(guān)途徑的調(diào)節(jié)，細(xì)胞中mRNA含量升高，表達(dá)的蛋白增加。作為“分子伴侶”，HSP70結(jié)合變性蛋白折疊、裝配中的中間產(chǎn)物，促進(jìn)多肽鏈向天然構(gòu)象轉(zhuǎn)變，修復(fù)應(yīng)激給機(jī)體帶來的損害。應(yīng)激后恢復(fù)時(shí)間增長，蛋白質(zhì)變性現(xiàn)象減少，的表達(dá)量回落。mRNA表達(dá)受熱應(yīng)激調(diào)節(jié)，從而保護(hù)機(jī)體內(nèi)部功能不受損傷。另有學(xué)者指出，HSP70具有高度保守的序列和在受脅迫后能夠大量表達(dá)的特性，使其可能成為一種診斷魚類生理狀態(tài)的生物指標(biāo)(祝璟琳等, 2007)。

綜上所述，熱應(yīng)激會(huì)引起銀鯽強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，血漿中乳酸含量、葡萄糖含量、肝糖原含量、己糖激酶活力和丙酮酸激酶活力先升高后恢復(fù)，表明機(jī)體通過調(diào)節(jié)以上指標(biāo)對抗熱應(yīng)激。熱應(yīng)激下基因的表達(dá)受熱應(yīng)激調(diào)節(jié)，誘導(dǎo)表達(dá)的HSP70使機(jī)體具備一定的高溫耐受力，對應(yīng)激起到一定的保護(hù)作用。本研究為了解銀鯽抗熱應(yīng)激的調(diào)控機(jī)理提供一定的參考數(shù)據(jù)，為研究抗熱應(yīng)激預(yù)防措施等提供新的思路。

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Effects of Heat Stress on Biochemical Indices andmRNA Expression in Gibel Carp ()

ZHOU Chaowei#①, HU Xuwen#, LEI Luo, LIU Xiaoqing, REN Shengjie, YANG Minmin, CAO Gaoxiang, CHEN Guoliang, DENG Xingxing, LI Yan, LI Lukuan

(Department of Fisheries, College of Animal Sciences, Southwest University, Chongqing 402460)

The aim of the present study was to assess the effects of heat stress and recovery on biochemical indices andmRNA expression in gibel carp (). The fishes were selected as experimental animals with an average weight of (72.8±10.1) g under laboratory conditions. Samples used to determine lactic acid (LD) content, glucose (Glu) content, glycogen (Gly) content, hexokinase (HK) activity, pyruvate kinase (PK) activity, andmRNA expression were obtained before heat stress (25℃, the control group), 0, 2, 6, and 10 h after stress (32℃), and heat stress recovery (25℃, HSR), respectively. The results revealed no significant difference in LD content compared with that in the control group (>0.05). Glu content was significantly increased at 0, 2, and 6 h (<0.01). Gly was significantly increased at 0 h (<0.01). HK activity was significantly increased at 2 h (<0.01). PK activity significantly increased at 6 h (<0.01). Meanwhile, the highestmRNA expression was observed at 2 h under heat stress (<0.01). Following HSR (25℃, 6 h), themRNA expression level recovered to the pre-stress levels (>0.05). The results provide basic data for research on the mechanism of high temperature adaption in gibel carp, as well as a scientific basis for acute temperature change in aquaculture and breeding.

; Heat stress; Biochemical indices;

ZHOU Chaowei, E-mail: zcwlzq666@163.com

10.19663/j.issn2095-9869.20171012001

Q344+.1

A

2095-9869(2018)06-0065-07

#Co-first authors

* 中央高?；究蒲谢?XDJK2016C047)資助[This work was supported by the Fundamental Research Funds for the Central Universities (XDJK2016C047)]

周朝偉，E-mail: zcwlzq666@163.com

2017-10-12,

2017-11-25

周朝偉, 胡續(xù)雯, 雷駱, 劉曉慶, 任勝杰, 楊旻珉, 曹高祥, 陳國梁, 鄧星星, 李巖, 李路寬. 熱應(yīng)激對銀鯽生化指標(biāo)和mRNA表達(dá)的影響. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展, 2018, 39(6): 65–71

Zhou CW, Hu XW, Lei L, Liu XQ, Ren SJ, Yang MM, Cao GX, Chen GL, Deng XX, Li Y, Li LK. Effects of heat stress on biochemical indices andmRNA expression in gibel carp (). Progress in Fishery Sciences, 2018, 39(6): 65–71

#并列第一作者：周朝偉，E-mail: zcwlzq666@163.com；胡續(xù)雯，E-mail: 2312669206@qq.com

(編輯 馬璀艷)