韓 萃， 朱麗巖， 江田田， 陳 香， 卜亞謙， 王 超， 董輝輝

(中國(guó)海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島266003)

不同溫度鹽度下TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)?

韓 萃， 朱麗巖**， 江田田， 陳 香， 卜亞謙， 王 超， 董輝輝

(中國(guó)海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院，山東 青島266003)

四溴雙酚A (TBBPA) 作為一種被廣泛使用的溴代阻燃劑，是海洋環(huán)境中主要的有機(jī)污染物之一。在海洋污染檢測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中，橈足類作為海洋生態(tài)系統(tǒng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)被認(rèn)為是理想的受試生物。實(shí)驗(yàn)以擬長(zhǎng)腹劍水蚤 (Oithonasimilis)作為受試生物，探討了溫度和鹽度影響下TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)測(cè)得TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h-LC50=3.106 mg·L-1。設(shè)定溫度梯度10、20、30℃和鹽度梯度10、20、30，擬長(zhǎng)腹劍水蚤暴露在2.485、3.106、3.883 mg·L-1TBBPA中48 h，死亡率均會(huì)隨著溫度升高和鹽度降低而上升。慢性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在15、20、25 ℃，鹽度10、20、30條件下，擬長(zhǎng)腹劍水蚤暴露在0.031和0.310 mg·L-1TBBPA中，存活率和孵化率沒(méi)有顯著變化(Pgt;0.05)，溫度鹽度改變，TBBPA對(duì)其影響也不顯著(Pgt;0.05)；而0.031和0.310 mg·L-1TBBPA對(duì)發(fā)育時(shí)間(無(wú)節(jié)幼蟲到橈足類幼體﹑橈足幼體到成體﹑第一只掛卵雌體的出現(xiàn))和產(chǎn)卵間隔的影響顯著(Plt;0.05)，改變溫度和鹽度，TBBPA的毒性效應(yīng)也會(huì)相應(yīng)改變；TBBPA對(duì)產(chǎn)卵量的影響會(huì)隨溫度的變化而變化，但鹽度并沒(méi)有引起顯著變化(Pgt;0.05)。

四溴雙酚A(TBBPA)；環(huán)境因子；擬長(zhǎng)腹劍水蚤；發(fā)育；生殖

四溴雙酚A(TBBPA)是目前全球用量最大的溴代阻燃劑。2004年，全球溴代阻燃劑的使用量超過(guò)了170 000 t，其中TBBPA占據(jù)了60%[1]。而且，有研究表明[2-3]，TBBPA可通過(guò)不同的途徑進(jìn)入環(huán)境中，在水體、沉積物以及生物體內(nèi)均檢測(cè)出TBBPA的存在，并且其含量日益增加，這使得TBBPA的毒理研究受到越來(lái)越多的關(guān)注。

近年來(lái)，橈足類作為海洋環(huán)境中重要的生物類群成為了研究熱點(diǎn)。橈足類在海洋生態(tài)系統(tǒng)中占據(jù)著重要的生態(tài)位[4-5]，是海洋生態(tài)系統(tǒng)食物鏈中的關(guān)鍵組成部分。另外，橈足類具有數(shù)量龐大、種類繁多、分布廣泛、對(duì)污染物暴露敏感等特點(diǎn)，使之成為海洋污染監(jiān)測(cè)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的理想受試生物。目前，橈足類已被廣泛應(yīng)用到污染研究中，曾艷藝等[6]和Andre等[7]分別研究了重金屬和多環(huán)芳烴對(duì)橈足類毒性作用。Xu等[8]和Andy等[9]分別指出了DDT、三苯基錫對(duì)橈足類的毒性效應(yīng)。此外，Jarvis 等[10]揭示新型污染物納米材料對(duì)橈足類的潛在毒性。

上述研究都表明了污染物對(duì)橈足類的毒性影響，但是都是在一定環(huán)境條件下進(jìn)行的，很少關(guān)注環(huán)境因子對(duì)污染物毒性效應(yīng)的影響。而環(huán)境因子的變化能直接影響橈足類對(duì)有機(jī)污染物的響應(yīng)。因此，本文選用海洋環(huán)境中分布廣泛、數(shù)量龐大的擬長(zhǎng)腹劍水蚤[11-12]，研究不同環(huán)境條件下TBBPA對(duì)其生長(zhǎng)、發(fā)育以及繁殖的影響。不僅探討了TBBPA和環(huán)境因子對(duì)橈足類的影響，更重要的是研究了環(huán)境因子對(duì)TBBPA毒性效應(yīng)的影響，為TBBPA的毒性研究提供數(shù)據(jù)，也為海洋環(huán)境中污染物的檢測(cè)提供較為系統(tǒng)的方法和材料。

1 材料和方法

1.1 擬長(zhǎng)腹劍水蚤的采集及培養(yǎng)

擬長(zhǎng)腹劍水蚤于2014年11月中旬采集于山東省青島市嶗山區(qū)南窯蝦池。實(shí)驗(yàn)前擬長(zhǎng)腹劍水蚤需馴化2周，馴化條件同采集地，光照周期12 hL∶12 hD，水溫20 ℃，鹽度20。培養(yǎng)所用的海水經(jīng)0.45 μm孔徑的濾膜過(guò)濾，充分曝氣24 h后使用。投喂球等鞭金藻(Isochroysisgalbana)1.0×105ind/mL。

1.2 急性毒性實(shí)驗(yàn)

根據(jù)48 h-LC50值，設(shè)定TBBPA濃度組分別是2.485、3.106、3.883 mg·L-1，對(duì)照組為溶劑對(duì)照組。設(shè)定溫度梯度10、20、30℃(鹽度20)和鹽度梯度10、20、30(溫度20 ℃)。每組有3個(gè)平行。每個(gè)平行組挑入20只擬長(zhǎng)腹劍水蚤成體，實(shí)驗(yàn)條件同1.1，測(cè)定死亡率[17, 30]。

1.3 慢性毒性實(shí)驗(yàn)

慢性毒性實(shí)驗(yàn)分別在溫度15、20、25 ℃(鹽度20)；鹽度10、20、30(溫度20℃)條件下進(jìn)行。其他條件同上，設(shè)定溶劑對(duì)照組、1/100 LC50組、1/10 LC50組。每組3個(gè)平行，每個(gè)平行24只。挑選孵化時(shí)間lt;24 h的無(wú)節(jié)幼蟲置于24孔板中，待發(fā)育至橈足幼體階段，挑至50 mL的燒杯中培養(yǎng)至掛卵雌體出現(xiàn)，然后將掛卵雌體挑至12孔板中待其孵化，記錄發(fā)育時(shí)間、產(chǎn)卵量以及孵化的無(wú)節(jié)幼蟲數(shù)。每24 h換水50%并記錄死亡個(gè)體數(shù)[17, 30]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)都使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，Plt;0.05，差異顯著，Plt;0.01，差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 急性毒性實(shí)驗(yàn)

2.1.1 TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h急性毒性 實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)SPSS 19.0軟件線性回歸分析得出TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h-LC50值為3.106 mg·L-1。

表1 TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h的急性毒性Table 1 Acute toxicity of TBBPA to O.similis in 48 h

2.1.2 不同溫度下TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的急性毒性 在鹽度20條件下，10、20、30 ℃組擬長(zhǎng)腹劍水蚤的死亡率均與TBBPA濃度呈正相關(guān)關(guān)系(見圖1)。而暴露在2.485、3.106和3.883 mg·L-1TBBPA中，死亡率都隨著溫度的升高而上升。溫度30℃組與10℃組相比，死亡率分別增加了58.56%、61.05%和52.11%。

經(jīng)分析，各TBBPA濃度組間與各溫度組間差異極其顯著(Plt;0.01)，說(shuō)明TBBPA和溫度對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤存活影響極其顯著。

(不同字母Plt;0.05；相同字母Pgt;0.05。Different lettersPlt;0.05; Same lettersPgt;0.05)

圖1 暴露在不同溫度和不同TBBPA濃度下擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h死亡率
Fig.1 Average mortality ofO.Similisexpose to various concentrations of TBBPA under different temperature for 48 h

2.1.3 不同鹽度下TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的急性毒性 圖2顯示，2.485、3.106和3.883 mg·L-1TBBPA組的死亡率隨鹽度的升高而降低，同時(shí)，在鹽度10、20、30條件下，擬長(zhǎng)腹劍水蚤的死亡率隨著TBBPA濃度的升高呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。暴露在3.883 mg·L-1TBBPA中，各鹽度組死亡率達(dá)到最高，鹽度10、20和30組分別是81.17%、65.65%和35.91%。分析得出各鹽度組和各濃度組間差異極其顯著(Plt;0.01)。

圖2 暴露在不同鹽度和不同TBBPA濃度下擬長(zhǎng)腹劍水蚤48 h死亡率

2.2 慢性毒性實(shí)驗(yàn)

2.2.1 溫度和鹽度對(duì)暴露在TBBPA中的擬長(zhǎng)腹劍水蚤存活的影響 不同溫度、鹽度和濃度組間，在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，擬長(zhǎng)腹劍水蚤的存活率均gt;80%(見表2)，分析結(jié)果顯示各組間并沒(méi)有顯著差異(Pgt;0.05)，可以認(rèn)為實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度、鹽度以及TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的存活影響不明顯。

表2 暴露在不同鹽度不同溫度不同TBBPA濃度下無(wú)節(jié)幼蟲的死亡率

2.2.2 溫度和鹽度對(duì)暴露在TBBPA中的擬長(zhǎng)腹劍水蚤發(fā)育時(shí)間的影響

2.2.2.1 對(duì)無(wú)節(jié)幼蟲到橈足幼體階段發(fā)育的影響

結(jié)果顯示，溫度15～25 ℃，D組、0.031、0.310 mg·L-1TBBPA組無(wú)節(jié)幼蟲發(fā)育至橈足幼體的時(shí)間呈現(xiàn)縮短趨勢(shì)。溫度20和25 ℃條件下，暴露在0.031和0.310 mg·L-1TBBPA中會(huì)縮短發(fā)育時(shí)間(見圖3)。此外，在15 ℃條件下，無(wú)節(jié)幼蟲在第16 d依然未發(fā)育到幼體階段，所以之后的實(shí)驗(yàn)沒(méi)有討論15 ℃組。

溫度15 ℃與20、25 ℃間差異顯著(Plt;0.05)；D組和TBBPA濃度組差異顯著(Plt;0.05)。其余組間差異不顯著(Pgt;0.05)。

圖3 暴露在不同溫度不同濃度TBBPA中無(wú)節(jié)幼蟲發(fā)育至橈足幼體的時(shí)間

無(wú)節(jié)幼蟲到橈足幼體的發(fā)育時(shí)間在鹽度10、20和30組中，均隨著鹽度的降低而縮短，D組在鹽度10條件下的發(fā)育時(shí)間，相對(duì)于鹽度20和30分別縮短了2.50和2.47 d(見圖4)；另外，在各鹽度條件下，TBBPA都會(huì)縮短發(fā)育時(shí)間。

分析得出，D組與TBBPA濃度組間差異顯著(Plt;0.05)；各鹽度組間差異極其顯著(Plt;0.01)；0.310與0.0310 mg·L-1TBBPA組只有在鹽度10條件下才顯示明顯差異(Plt;0.05)。

圖4 暴露在不同鹽度不同濃度TBBPA中無(wú)節(jié)幼蟲發(fā)育至橈足幼體的時(shí)間Fig.4 The development time from nauplii to copepodid expose to various concentrations of TBBPA under different salinity

2.2.2.2 對(duì)橈足幼體至成體發(fā)育時(shí)間的影響

橈足幼體與20 ℃組相比，25 ℃組的擬長(zhǎng)腹劍水蚤發(fā)育至成體的時(shí)間明顯縮短，D組、0.031和0.310 mg·L-1TBBPA組的發(fā)育時(shí)間分別縮短了3.8、1.7和7.9 d(見圖5)。在20 ℃條件下，與D組相比，0.031 mg·L-1TBBPA組發(fā)育時(shí)間會(huì)縮短，0.310 mg·L-1TBBPA組會(huì)延長(zhǎng)；但在25 ℃條件下，2個(gè)TBBPA濃度組發(fā)育時(shí)間都會(huì)縮短。分析得出，溫度組和濃度組間差異均顯著(Plt;0.05)。

圖5 暴露在不同溫度不同濃度TBBPA中橈足幼體發(fā)育至成體的時(shí)間

橈足幼體發(fā)育至成體的時(shí)間隨著鹽度的升高，在D組和0.031 mg·L-1TBBPA組顯示逐漸延長(zhǎng)趨勢(shì)；在0.310 mg·L-1TBBPA組顯示逐漸降低趨勢(shì)。同鹽度條件下，0.031 mg·L-1TBBPA會(huì)促進(jìn)橈足類的發(fā)育。而0.310 mg·L-1TBBPA，只在鹽度30組顯示促進(jìn)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的發(fā)育(見圖6)。分析顯示，各鹽度組間差異極其顯著(Plt;0.01)，但在各濃度組間差異不顯著(Pgt;0.05)。

2.2.2.3 對(duì)第一只掛卵雌體出現(xiàn)時(shí)間的影響 D組在鹽度10、20、30條件下，第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間分別是第27、29和38 d(見表3)，隨鹽度的升高而延長(zhǎng)，而0.031 和0.310 mg·L-1TBBPA組在鹽度20條件下第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間最短，在鹽度10條件下最長(zhǎng)。D組、0.031和0.310 mg·L-1TBBPA組第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間在鹽度10條件下逐漸延長(zhǎng)；在鹽度20條件下逐漸縮短；在鹽度30條件下沒(méi)有明顯變化。分析得出鹽度組間差異及其顯著(Plt;0.01)；濃度組間差異不顯著(Pgt;0.05)。

圖6 暴露在不同鹽度不同濃度TBBPA中橈足幼體發(fā)育至成體的時(shí)間

與20 ℃條件相比，25 ℃條件下第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間明顯縮短(Plt;0.01)，D組、0.031、0.310 mg·L-1TBBPA組分別縮短了5.7、7.7、7.7 d(見表3)。20和25 ℃條件下，0.031和0.310 mg·L-1TBBPA組的掛卵雌體出現(xiàn)時(shí)間都有明顯縮短，0.310 mg·L-1TBBPA組的時(shí)間最短(Plt;0.01)。

表3 暴露在不同鹽度不同溫度不同濃度TBBPA中第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間Table 3 The mature time of first female expose to various concentrations of TBBPA under different salinity and temperature

2.2.3 溫度和鹽度對(duì)暴露在TBBPA中的擬長(zhǎng)腹劍水蚤繁殖的影響

2.2.3.1 對(duì)產(chǎn)卵量的影響 D組在不同鹽度條件下，產(chǎn)卵量無(wú)明顯的變化規(guī)律。鹽度10條件下，0.031 mg·L-1TBBPA組產(chǎn)卵量最少；在鹽度20條件下，產(chǎn)卵量隨著TBBPA濃度的升高呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；在鹽度30條件下，0.031 mg·L-1TBBPA組產(chǎn)卵量最高(見表4)。各濃度組間和各溫度組間差異均不顯著(Pgt;0.05)。

如表4，產(chǎn)卵量在25 ℃條件下的產(chǎn)卵量要明顯高于20 ℃條件下的，在0.310 mg·L-1TBBPA組(20 ℃：10.05只；25 ℃：14.24只)。D組、0.031和0.310 mg·L-1TBBPA組在20和25 ℃時(shí)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵量都呈現(xiàn)升高趨勢(shì)。數(shù)據(jù)分析顯示，溫度組間差異顯著(Pgt;0.05)；濃度組間差異不顯著(Pgt;0.05)。

表4 暴露在不同鹽度不同溫度不同濃度TBBPA中擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵量Table 4 Egg production of O.similisexpose to various concentrations of TBBPA under different salinity and temperature

2.2.3.2 對(duì)產(chǎn)卵間隔的影響 20 ℃與25 ℃組相比，20 ℃的產(chǎn)卵間隔明顯延長(zhǎng)(Plt;0.01)。D組、0.031、0.310 mg·L-1TBBPA組在20 ℃條件下的產(chǎn)卵間隔相比25 ℃分別延長(zhǎng)了3、1.4和1.3 d(見圖7)；與D組相比，TBBPA組在20 ℃下會(huì)縮短擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵間隔(Plt;0.05)，但在25 ℃條件下，沒(méi)有明顯差異(Pgt;0.05)。

圖7 暴露在不同溫度不同濃度TBBPA中擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵間隔

D組、0.031、0.310 mg·L-1TBBPA組的產(chǎn)卵間隔在鹽度10的條件下最短(見圖8)。除了鹽度20條件下的D組外，其他組都顯示鹽度越低產(chǎn)卵間隔越短(Plt;0.05)。而TBBPA濃度組相對(duì)于對(duì)照組，產(chǎn)卵間隔有縮短的趨勢(shì)，但差異并不明顯(Pgt;0.05)。

圖8 暴露在不同鹽度不同濃度TBBPA中擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵間隔Fig.8 Spawn interval of O.similis expose to various concentrations of TBBPA under different salinity

2.2.3.3 對(duì)無(wú)節(jié)幼蟲孵化的影響 在不同溫度和鹽度條件下，濃度組間無(wú)節(jié)幼蟲孵化率并沒(méi)有顯著差異(Pgt;0.05)，均gt;80%，可認(rèn)為在溫度20～25 ℃，鹽度10～30的范圍內(nèi)，0.031和0.310 mg·L-1的TBBPA對(duì)無(wú)節(jié)幼蟲的孵化沒(méi)有顯著影響。

表5 暴露在不同鹽度不同溫度不同濃度TBBPA中擬長(zhǎng)腹劍水蚤的孵化率Table 5 Hatching rate interval of O.similis expose to various concentrations of TBBPA under different salinity and temperature

3 討論

目前的研究認(rèn)為，TBBPA引起哺乳動(dòng)物的急性毒性效應(yīng)的劑量相對(duì)較高，達(dá)到一定的劑量的要求才會(huì)引起毒害效應(yīng)，而對(duì)于水生動(dòng)物而言，TBBPA對(duì)其具有較高的急性毒性[13]。有研究表明TBBPA對(duì)大型溞[14]、櫛孔扇貝幼貝[15]、斑馬魚[16]的48 h-LC50分別是8.590、4.169和2.310 mg·L-1。TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤成體48 h-LC50為3.106 mg·L-1。與其他水生生物相比，擬長(zhǎng)腹劍水蚤對(duì)TBBPA 的敏感性相對(duì)較高。而且，有研究表明[34]污染物對(duì)生物的48 h-LC50在1～10 mg·L-1范圍內(nèi)，被認(rèn)為該污染物對(duì)該生物是有毒的。所以說(shuō)，TBBPA對(duì)于上述水生生物都是有毒性的。

在急性毒性實(shí)驗(yàn)中，設(shè)定TBBPA濃度為2.485、3.106和3.883 mg·L-1，溫度梯度10、20、30 ℃和鹽度梯度10、20、30，測(cè)定48 h的死亡率。結(jié)果表明，暴露在相同TBBPA濃度中，在溫度10～30 ℃范圍內(nèi)，擬長(zhǎng)腹劍水蚤的死亡率會(huì)隨著溫度的上升而升高；在鹽度10～30的范圍內(nèi)，擬長(zhǎng)腹劍水蚤的死亡率會(huì)隨著鹽度的降低而升高。相似的結(jié)果也在其他一些研究中得到驗(yàn)證。Kwok等[17]研究指出Cu和TBT對(duì)日本虎斑猛水蚤的毒性效應(yīng)隨著溫度的升高和鹽度的降低而增強(qiáng)。黃瑛等[18]發(fā)現(xiàn)溫度的升高會(huì)增強(qiáng)三丁基氧化錫(TBTO)對(duì)火腿許水蚤的毒性效應(yīng)，而火腿許水蚤在鹽度15比25敏感性更高。這些研究表明不同污染物對(duì)不同種類的毒性效應(yīng)受溫度和鹽度影響相同，溫度升高和鹽度降低都能放大污染物的毒性效應(yīng)。Raymond Gaudy等[19]研究表明橈足類的呼吸速率在高溫和低鹽的條件下最高。Changling Li等[20]得出，溫度升高促進(jìn)橈足類的攝食率和濾水率，在鹽度25～35范圍內(nèi)，鹽度越高攝食率和濾水率越低。Siriporn等[21]研究表明，溫度和鹽度會(huì)影響B(tài)PA在生物體內(nèi)的累計(jì)和毒性。可以得出結(jié)論：溫度和鹽度的改變會(huì)影響橈足類的新陳代謝，從而影響TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)，暴露在TBBPA中，溫度升高或鹽度降低都能放大TBBPA對(duì)橈足類的毒性效應(yīng)。

在慢性毒性實(shí)驗(yàn)中，研究了不同溫度和鹽度條件下，TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖過(guò)程的影響。結(jié)果顯示，在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，在溫度15～25 ℃，鹽度10～30范圍內(nèi)，0.031和0.310 mg·L-1TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的存活沒(méi)有顯著影響，所有組中擬長(zhǎng)腹劍水蚤的存活率均大于80%。說(shuō)明0.031和0.310 mg·L-1TBBPA不會(huì)對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤產(chǎn)生致死效應(yīng)，改變溫度和鹽度，TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)也不明顯。

在不同鹽度和溫度條件下，擬長(zhǎng)腹劍水蚤發(fā)育時(shí)間對(duì)TBBPA的敏感性實(shí)驗(yàn)中，從無(wú)節(jié)幼蟲到橈足幼體階段的發(fā)育時(shí)間、橈足幼體到成體的發(fā)育時(shí)間以及第一只掛卵雌體出現(xiàn)的時(shí)間這三個(gè)指標(biāo)得出結(jié)論：(1)在溫度15～25 ℃，鹽度10～30范圍內(nèi)，擬長(zhǎng)腹劍水蚤的發(fā)育時(shí)間會(huì)隨著溫度的升高和鹽度的降低而縮短(見表3，圖3、4、5、6)。這與Stottrup等[22]、Rhyne等[23]、Santhanam等[24]和Alexander等[25]研究結(jié)果一致，低溫會(huì)延長(zhǎng)橈足類的發(fā)育時(shí)間，高溫會(huì)縮短其發(fā)育時(shí)間。還有Chinnery等[26]發(fā)現(xiàn)，5～20 ℃條件下，20 ℃時(shí)橈足類無(wú)節(jié)幼蟲最早發(fā)育至橈足幼體階段。Shayegan等[31]指出湯氏紡錘水蚤Acartiatonsa的發(fā)育時(shí)間隨鹽度的升高而延長(zhǎng)。Kyun等[27]表明溫度升高和鹽度降低，都能使無(wú)節(jié)幼蟲的發(fā)育時(shí)間縮短。上述研究都表明橈足類在溫度較高，鹽度相對(duì)降低的條件下發(fā)育更快。Alexander等[25]研究表明溫度和鹽度會(huì)通過(guò)改變橈足類新陳代謝速度，從而影響發(fā)育時(shí)間。也就是說(shuō)，在一定溫度和鹽度范圍內(nèi)，高溫和低鹽條件會(huì)促進(jìn)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的發(fā)育。(2)對(duì)照組和TBBPA濃度組比較發(fā)現(xiàn)，在一定時(shí)間內(nèi)0.031和0.310 mg·L-1TBBPA會(huì)促進(jìn)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的發(fā)育，但生物體內(nèi)蓄積的TBBPA達(dá)到一定量時(shí)又會(huì)抑制擬長(zhǎng)腹劍水蚤的發(fā)育(見圖5、6)。鹽度10、溫度25 ℃條件下的0.310 mg·L-1的TBBPA表現(xiàn)出了對(duì)橈足類發(fā)育的抑制作用(見圖5、6)，這可能是低鹽高溫促進(jìn)了TBBPA在橈足類體內(nèi)的積累達(dá)到了抑制效應(yīng)濃度，從而表現(xiàn)出抑制作用。Piazza等[32]研究表明溫度升高和鹽度降低都能放大鎘對(duì)紋藤壺幼蟲的毒性效應(yīng)。在擬長(zhǎng)腹劍水蚤發(fā)育階段，溫度升高和鹽度降低會(huì)使橈足類對(duì)TBBPA的攝入和吸收加快，進(jìn)而增加了TBBPA在橈足類體內(nèi)的蓄積量，蓄積量達(dá)到一定劑量，產(chǎn)生毒性效應(yīng)?？梢缘贸鼋Y(jié)論，溫度的升高和鹽度的降低放大了TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)。

在不同鹽度和溫度條件下，TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤繁殖過(guò)程的影響實(shí)驗(yàn)中，從產(chǎn)卵量、產(chǎn)卵間隔以及無(wú)節(jié)幼蟲孵化率這3個(gè)指標(biāo)可以得出結(jié)論：(1)在溫度20～25，鹽度10～30范圍內(nèi)，產(chǎn)卵間隔會(huì)隨著溫度的升高和鹽度的降低而縮短(見圖7、8)。Cortney L. Ohs等[28]研究表明，橈足類的產(chǎn)卵間隔在隨鹽度升高而延長(zhǎng)，而溫度對(duì)產(chǎn)卵間隔的影響研究中，Andrew L. Rhyne等[23]指出，溫度越高產(chǎn)卵間隔越短?？梢缘贸鼋Y(jié)論高溫低鹽條件促進(jìn)橈足類的新陳代謝，加速了卵的成熟，縮短了生活史周期。(2)在本文研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)卵量會(huì)隨溫度的升高而增加，而鹽度對(duì)產(chǎn)卵量的影響不顯著(見表4)。P. Santhanam等[29]和Andrew L. Rhyne等[23]研究也分別表明，橈足類在15～26和24～28 ℃范圍內(nèi)，分別在26和28 ℃條件下產(chǎn)卵量達(dá)到最高。Ohs等[33]研究中也得出鹽度10～35，對(duì)Pseudodiaptomuspelagicus的產(chǎn)卵量沒(méi)有顯著影響。溫度升高會(huì)促進(jìn)橈足類繁殖，而鹽度影響不明顯。(3)在對(duì)照組和TBBPA濃度組間的比較中發(fā)現(xiàn)，0.031和0.310 mg·L-1TBBPA會(huì)縮短擬長(zhǎng)腹劍水蚤的產(chǎn)卵間隔(見圖7)，增加產(chǎn)卵量(見表4)，而無(wú)節(jié)幼蟲的孵化率沒(méi)有受到顯著影響(見表5)。這就說(shuō)明溫度升高和0.310 mg·L-1TBBPA存在都會(huì)促進(jìn)繁殖，而鹽度變化對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的繁殖影響只表現(xiàn)在產(chǎn)卵間隔上。綜上，溫度、鹽度、TBBPA都會(huì)對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤繁殖過(guò)程產(chǎn)生影響，TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤繁殖的毒性效應(yīng)受溫度和鹽度影響顯著。

總之，溫度、鹽度、TBBPA對(duì)橈足類的生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖有顯著影響，另外，溫度和鹽度還會(huì)通過(guò)影響橈足類的新陳代謝水平，從而影響TBBPA的攝入量以及在體內(nèi)的積累量，導(dǎo)致橈足類對(duì)TBBPA的敏感性變化。本文討論了TBBPA對(duì)擬長(zhǎng)腹劍水蚤的毒性效應(yīng)，以及環(huán)境因子對(duì)這種毒性效應(yīng)的影響，為之后污染檢測(cè)提供較為完善的方法和材料。

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責(zé)任編輯 高 蓓

TheEffectofTBBPAonCopepod(Oithonasimilis)UnderDifferentSalinityandTemperature

HAN Cui, ZHU Li-Yan, JIANG Tian-Tian, CHEN Xiang, BU Ya-Qian, WANG Chao, DONG Hui-Hui

(College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

As a widely used brominated flame retardant, Tetrabromobisphenol A (TBBPA) was one of the main pollution in marine environment. In the monitoring and risk assessment of the Marine pollution, copepod seen as the ideal subjects because of its important status in marine ecology system. In experiment,Oithonasimilisas the subjects, discussed the effect of TBBPA onO.Similisunder different temperature and salinity. The 48 h-LC50of TBBPA effect on copepod was 3.106 mg·L-1. The 48 h acute toxicity experiment shown, under the temperature 10, 20, 30 and salinity 10, 20, 30, the mortality ofO.Similiswas increasing with the increasing of temperature and the decreasing of salinity when expose to 2.485, 3.106, 3.883 mg/L TBBPA. Chronic toxicity experiment results shown: under the temperature 15, 20, 25 ℃and salinity 10, 20, 30, the hatching rate and mortality ofO.Similishad no significant difference exposed to 0.031and 0.310 mg·L-1TBBPA . Temperature and salinity changing did not affect hatching rate and mortality ofO.Similis. But the toxic effect that the development time and spawning interval were affected significantly by TBBPA changed with temperature and salinity. The egg reproduction was increasing expose to TBBPA, change temperature, the response of egg reproduction was change, but salinity was not affect it.

TBBPA；environmental factor；Oithonasimilis；development；reproduction

X55

A

1672-5174(2018)01-049-08

10.16441/j.cnki.hdxb.20160355

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國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(3157261；31172412)資助

Supported by Natural Science Foundation of China(3157261;31172412)

2016-11-10；

2016-12-28

韓萃(1993-)，女，碩士生。E-mail: hancui999@126.com

?? 通訊作者：E-mail:lyzhu@ouc.edu.cn