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(西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)院,陜西咸陽(yáng) 712100)

遼東櫟(Quercusliaotungensis)作為黃土高原地帶性植被建群種及橋山林區(qū)主要成林樹(shù)種之一,對(duì)維持當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)平衡起著重要作用[1-2]。除具有較高生態(tài)價(jià)值外,張娜等[3]研究指出遼東櫟不同器官均含有植物多酚單寧,新鮮葉片中單寧含量可達(dá)206.74 mg/g。植物多酚由于富含酚羥基,可貢獻(xiàn)氫原子或電子進(jìn)而表現(xiàn)出抗氧化活性[4-5]。不同植物以及同種植物不同器官中的植物多酚化學(xué)結(jié)構(gòu)及聚合方式可能不同,進(jìn)而導(dǎo)致其反應(yīng)活性及用途也各不相同。槭屬植物紅楓和糖槭單寧具有抗氧化,抗糖尿病及α-糖苷酶抑制作用[6]。美麗白千層(Melaleucastyphelioides)鞣花單寧具有抗氧化及護(hù)肝活性[7];富含鞣花單寧的紅樹(shù)莓提取物除具有抗氧化活性外[8],還可以改善老年大鼠的運(yùn)動(dòng)功能[9]。高粱中縮合單寧可降血糖[10],松樹(shù)皮單寧作為添加劑,可增強(qiáng)塑料的抗紫外輻射能力[11]。

由于單寧是由不同分子量、不同極性的酚類(lèi)組成的混合物,蒸餾水及純?nèi)軇┨崛⌒食２焕硐?在實(shí)際操作中多選用乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑的水溶液作為提取劑。超聲波的空化作用可形成高溫高壓,迅速破壞植物細(xì)胞壁同時(shí)不影響被提取有效成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。為了進(jìn)一步提高提取效率,實(shí)際操作中多結(jié)合超聲波作為輔助提取[12-14]。Rhazi Naima等[15]、張志健等[16]研究結(jié)果均表明,超聲輔助可大大提高單寧提取效率。目前,有關(guān)櫟類(lèi)單寧的研究主要集中在提取工藝的優(yōu)化,尹藝凝等[17]對(duì)四種類(lèi)型栓皮櫟不同器官單寧含量研究發(fā)現(xiàn),栓皮櫟不同器官以橡碗單寧含量最高。薛文艷等[18]對(duì)橋山林區(qū)麻櫟橡子單寧提取工藝進(jìn)行了響應(yīng)面優(yōu)化并提出了最佳提取工藝,并對(duì)提取的麻櫟橡子單寧進(jìn)行了抗氧化活性分析,但目前未見(jiàn)關(guān)于遼東櫟單寧提取工藝及抗氧化活性的研究報(bào)道。

本文以黃陵縣店頭林場(chǎng)采集的遼東櫟橡碗為原料,采用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)響應(yīng)面分析,探索遼東櫟橡碗單寧提取的最優(yōu)工藝,并對(duì)所提取的單寧進(jìn)行了抗氧化活性分析,以期為提高遼東櫟綜合利用率及經(jīng)濟(jì)價(jià)值提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

遼東櫟橡碗 陜西黃陵縣店頭林場(chǎng);單寧酸、鎢酸鈉、磷鉬酸、磷酸、無(wú)水碳酸鈉、無(wú)水乙醇、水楊酸、雙氧水、七水合硫酸亞鐵、抗壞血酸等試劑 均為分析純,天津市天力化學(xué)試劑有限公司;二苯基苦基肼自由基(分析純) 日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社。

R-1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;日本島津UV-1800紫外光分光光度計(jì) 寧波新芝生物科技股份有限公司;WLD07S-05型超聲波設(shè)備 南京三樂(lè)超聲波技術(shù)發(fā)展有限公司；FW135粉碎機(jī)、HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋 圖華電器有限公司;TG16-W微量高速離心機(jī) 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器開(kāi)發(fā)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 單寧的提取 遼東櫟橡碗洗凈后置于室內(nèi)陰干,粉碎后過(guò)100目篩。將粉碎后的樣品保存于4 ℃冰箱內(nèi)備用。測(cè)定時(shí)取1 g樣品于錐形瓶中,按一定液料比加入一定體積分?jǐn)?shù)的乙醇,置于一定功率、一定溫度下提取一定時(shí)間,之后,對(duì)提取液進(jìn)行抽濾并收集濾液待測(cè)。

1.2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

1.2.2.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)提取量的影響 取遼東櫟橡碗粉末1 g,設(shè)置液料比25∶1 mL/g、提取溫度40 ℃,在200 W的功率下超聲30 min,考察乙醇體積分?jǐn)?shù)分別在20%、30%、40%、50%、60%、70%時(shí)單寧提取量。

1.2.2.2 液料比對(duì)提取量的影響 取遼東櫟橡碗粉末1 g,設(shè)置乙醇體積分?jǐn)?shù)50%、提取溫度40 ℃,在200 W的功率下超聲30 min,考察液料比分別在10∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1、60∶1 mL/g時(shí)單寧提取量。

1.2.2.3 提取功率對(duì)提取量的影響 取遼東櫟橡碗粉末1 g,設(shè)置液料比25∶1 mL/g、乙醇體積分?jǐn)?shù)50%、在40 ℃下提取30 min,考察超聲功率分別在100、150、200、250、300、350、400 W時(shí)單寧提取量。

1.2.2.4 提取溫度對(duì)提取量的影響 取遼東櫟橡碗粉末1 g,設(shè)置液料比25∶1、乙醇體積分?jǐn)?shù)50%,在200 W的功率下超聲30 min,考察提取溫度分別在30、40、50、60、70、80 ℃時(shí)單寧提取量。

1.2.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn) 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,采用Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)法對(duì)影響單寧提取的四個(gè)因素進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)中各因素編碼及水平見(jiàn)表1。

表1 BoX-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素及水平Table 1 Factors and coded levels of the Box-Behnken experimental design

1.2.4 單寧提取量的計(jì)算

1.2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 準(zhǔn)確稱(chēng)量2 mg單寧酸標(biāo)準(zhǔn)品,定容至100 mL,所得單寧標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為20 mg/L。于8個(gè)50 mL容量瓶中分別加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0 mL單寧標(biāo)準(zhǔn)溶液、2 mL F-D顯色劑、10 mL 1 mol/L的Na2CO3溶液,60%乙醇定容后,室溫下靜置30 min,4000 r/min離心10 min后,測(cè)定760 nm下單寧溶液的吸光度值。

以單寧濃度c為橫坐標(biāo),吸光度A為縱坐標(biāo),繪制單寧標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖,得到多元回歸方程為y=72.988x+0.0015,R2=0.9999。

1.2.4.2 單寧的測(cè)定 橡碗單寧的測(cè)定采用Folin-Denis法[19]。于50 mL容量瓶中加入待測(cè)液1 mL,F-D顯色劑2.5 mL,1 mol/L的飽和碳酸鈉溶液10 mL,定容。將溶液置于50 ℃水浴鍋中,5 min后取出。待冷卻后測(cè)定溶液在760 nm處的吸光值,以0 mL標(biāo)準(zhǔn)液體系作對(duì)照,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。依標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及回歸方程計(jì)算溶液中單寧質(zhì)量濃度,進(jìn)而通過(guò)下式計(jì)算單寧提取量。

式中:C為單寧質(zhì)量濃度(mg/L);D為稀釋倍數(shù);V為待測(cè)液體積(L);m為樣品質(zhì)量(g)。

1.2.5 單寧抗氧化活性的測(cè)定

1.2.5.1 總抗氧化活性的測(cè)定 參照文獻(xiàn)[20],配制質(zhì)量濃度為30、40、50、60、70、80、100 mg/L單寧的樣品溶液,于10 mL離心管中加入0.6 mol/L硫酸、28 mmol/L鉬酸銨、4 mmol/L磷酸鈉各2.0 mL,實(shí)驗(yàn)組各離心管中分別加入20、30、40、50、60、70、80 mg/L的單寧樣液1 mL,對(duì)照組各離心管中加入20、30、40、50、60、70、80 mg/L的VC溶液1 mL。搖勻后將兩組離心管置于95 ℃水浴鍋中水浴90 min。冷卻后于695 nm處測(cè)定其吸光度。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次取平均值。

1.2.5.2 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力 參照文獻(xiàn)[21],測(cè)定0.1 mL蒸餾水與3.9 mL DPPH·混合液的吸光值(A0),0.1 mL蒸餾水與3.9 mL 95%乙醇混合液的吸光值(A2)。于3.9 mL DPPH溶液中加入0.1 mL 20、30、40、50、60、70、80 mg/L的單寧樣品溶液作為實(shí)驗(yàn)組,加入0.1 mL 20、30、40、50、60、70、80 mg/L的VC溶液作為對(duì)照。搖勻后室溫下靜置30 min,于517 nm處測(cè)定吸光值(A1)。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

DPPH·清除率計(jì)算公式為:

1.2.5.3 羥自由基(·OH)清除能力 參照文獻(xiàn)[22],于10 mL離心管中加入0.3 mol/L FeSO4,0.25 mL 20 mmol/L H2O2,1 mL 3 mmol/L水楊酸,實(shí)驗(yàn)組加入20、30、40、50、60、70、80 mg/L 的樣品溶液1 mL,對(duì)照組加入20、30、40、50、60、70、80 mg/L的VC溶液1 mL,最后加入蒸餾水使各反應(yīng)體系體積均為3 mL。2000 r/min離心10 min,于510 nm處測(cè)定上清液吸光值。每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

式中:A0為空白管光吸收值,A1為加入樣品后的光吸收值。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

本文單因素實(shí)驗(yàn)每個(gè)水平均重復(fù)3次并取平均值。采用Spss 22.0進(jìn)行單因素方差分析,若因素內(nèi)差異顯著(p<0.05),則進(jìn)行Duncan多重比較因素間的差異性。采用Design-Expert 8.0進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及優(yōu)化。在Excel 2016中繪制單寧酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、單因素及抗氧化實(shí)驗(yàn)圖形。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)單寧提取量的影響 由圖1可知,超聲輔助條件下,乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%時(shí)單寧提取量最高。當(dāng)體積分?jǐn)?shù)低于50%時(shí),隨著體積分?jǐn)?shù)的提高,單寧提取量也顯著提高(p<0.05),乙醇體積分?jǐn)?shù)從20%變化為50%時(shí),單寧提取量提高了127.78%。乙醇體積分?jǐn)?shù)由50%提高到60%,單寧提取量顯著降低(p<0.05),降幅為26.96%,當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)繼續(xù)提高(由60%到70%),單寧提取量降幅為4.37%。單寧提取量隨乙醇體積分?jǐn)?shù)增大而降低的原因是,乙醇體積分?jǐn)?shù)越大極性越小,進(jìn)而降低了單寧溶解度[23]。本文選擇50%乙醇體積分?jǐn)?shù)進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。

圖1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)單寧提取量的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on the extract yield注:不同字母表示差異顯著(p<0.05)。圖2～圖7同。

2.1.2 液料比對(duì)單寧提取量的影響 由圖2可知,超聲輔助條件下,液料比由10∶1 mL/g提高到30∶1 mL/g,單寧提取量顯著提高(p<0.05)。液料比為30∶1 mL/g時(shí)提取量已達(dá)較高水平。隨著液料比繼續(xù)增加至50∶1 mL/g時(shí),單寧提取量增加不顯著(p>0.05)。液料比由30∶1 mL/g增加到60∶1 mL/g,單寧提取量?jī)H提高1.30%。本文選擇液料比30∶1 mL/g進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。

圖2 液料比對(duì)單寧提取量的影響Fig.2 Effect of material-liquid ration on the extract yield

單寧的浸提分兩個(gè)階段:第一階段浸提液擴(kuò)散至樣品內(nèi)部并溶解其中的單寧和其他可溶物,在細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)溶液,與細(xì)胞外浸提液形成濃度梯度;第二階段為在濃度梯度的驅(qū)動(dòng)下,單寧從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移至浸提液中。此速率與固液兩相濃度差(傳質(zhì)推動(dòng)力)有關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中,浸提前期,液料比越高,固液兩相接觸越充分,提取量越高[24-25];隨著液料比繼續(xù)升高,固液濃度差減小,導(dǎo)致傳遞速率降低,提取量升高不明顯。

2.1.3 提取功率對(duì)單寧提取量的影響 由圖3可知,功率由100 W提高至200 W時(shí),單寧提取量也顯著地提高(p<0.05),增幅為56.33%。功率為200 W時(shí),單寧提取量達(dá)到最大,為69.13 mg/g。超聲功率由200 W提高到300 W,單寧提取量顯著降低(p<0.05),降幅為8.10%,其原因類(lèi)似于溫度對(duì)提取量的影響,即高功率導(dǎo)致聚合單寧液化失活[23]。隨著超聲功率繼續(xù)提高,單寧被充分提取,提取量降低不顯著(p>0.05)。本文選擇提取功率200 W進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。

圖3 提取功率對(duì)單寧提取量的影響Fig.3 Effect of extraction power on the extract yield

2.1.4 提取溫度對(duì)單寧提取量的影響 由圖4可知,超聲輔助條件下,溫度由30 ℃提高到50 ℃,單寧提取量顯著提高(p<0.05),增幅為72.98%;溫度升高至70 ℃時(shí),單寧提取量顯著降低(p<0.05),這主要是由于溫度過(guò)高導(dǎo)致聚合單寧液化而失去活性[23]。本文選擇提取溫度50 ℃進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化。

圖4 提取溫度對(duì)單寧提取量的影響Fig.4 Effect of extraction temperature on the extract yield

2.2 響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)結(jié)果 在確定了乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比、提取功率、提取溫度這4個(gè)單因素的最適范圍后,利用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方案進(jìn)行了29次實(shí)驗(yàn)得到單寧提取量實(shí)測(cè)值。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果Table 2 Experimental design and results of Box-Behnken design

2.2.2 響應(yīng)模型的建立及分析 通過(guò)對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸擬合,得到遼東櫟橡碗單寧提取量對(duì)乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比、提取溫度、提取功率的多元回歸方程:單寧提取量=70.15-0.14A-0.16B+0.28C-0.14D+0.22AB+1.08AC-0.22AD+0.34BC-0.34BD+0.36CD-1.26A2-0.41B2-0.43C2-0.44D2

2.2.3 響應(yīng)面圖分析 用Design-expert軟件對(duì)各因素交互作用對(duì)單寧提取量的影響做出相應(yīng)的響應(yīng)面曲線(xiàn)圖,從該圖中可以看出各因素交互作用對(duì)響應(yīng)值影響的顯著程度并得出最佳工藝參數(shù)。3D圖曲面傾斜度越大,說(shuō)明該因素對(duì)響應(yīng)值的影響越大。響應(yīng)面等高線(xiàn)圖是3D圖在水平面上的投影,橢圓形表示兩因素交互作用顯著。圓形表示不顯著,響應(yīng)面等高線(xiàn)圖圓心處可以得出最大響應(yīng)值。

表3 多元回歸方程的方差分析Table 3 ANOVA for response surface quadratic model

圖5～圖10給出了當(dāng)固定乙醇體積分?jǐn)?shù)、液料比、提取功率、提取溫度中任意兩個(gè)因素為零水平時(shí),其余兩個(gè)因素的交互作用及對(duì)單寧提取量的影響。圖5～圖10各3D圖均較為陡峭,說(shuō)明各因素交互作用均較明顯,與方差分析結(jié)果相符。圖5～圖10各等高線(xiàn)均為橢圓形,說(shuō)明各因素交互作用對(duì)響應(yīng)值影響均顯著,但橢圓的曲率不同,說(shuō)明各因素交互作用對(duì)響應(yīng)值影響的顯著程度不同。圖7等高線(xiàn)圖為長(zhǎng)橢圓形,說(shuō)明乙醇體積分?jǐn)?shù)與提取功率交互作用對(duì)單寧提取量影響最為顯著;圖6與圖8等高線(xiàn)橢圓曲率近似,說(shuō)明乙醇體積分?jǐn)?shù)與液料比交互作用對(duì)單寧提取量影響的顯著性近似于乙醇體積分?jǐn)?shù)與提取溫度的交互作用;圖8～圖10等高線(xiàn)圖橢圓曲率近似,說(shuō)明液料比與提取功率、液料比與提取溫度、提取功率與提取溫度交互作用對(duì)單寧提取量影響的顯著性近似。

圖5 乙醇體積分?jǐn)?shù)與液料比交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.5 Surface and contour plots of mutual-influence of ethanol concentration and material-liquid ration on the tannins yield

圖6 乙醇體積分?jǐn)?shù)與提取功率交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.6 Surface and contour plots of mutual-influence of ethanol concentration and extraction power on the tannins yield

圖7 乙醇體積分?jǐn)?shù)與提取溫度交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.7 Surface and contour plots of mutual-influence of ethanol concentration and extraction temperature on the tannins yield

圖8 液料比與提取功率交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.8 Surface and contour plots of mutual-influence of material-liquid ration and extraction power on the tannins yield

圖9 液料比與提取溫度交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.9 Surface and contour plots of mutual-influence of material-liquid ration and extraction temperature on the tannins yield

圖10 提取功率與提取溫度交互作用對(duì)單寧提取量的影響Fig.10 Surface and contour plots of mutual-influence of extraction power and extraction temperature on the tannins yield

2.2.4 最佳條件的確定和回歸模型的驗(yàn)證 為進(jìn)一步確定最優(yōu)提取工藝,在設(shè)置擬合方程各因素的取值范圍后,根據(jù)模型使用快速上升法[26-27]進(jìn)行方案優(yōu)化,得到的最優(yōu)方案如下:液料比30∶1 mL/g,乙醇體積分?jǐn)?shù)50%,溫度50 ℃,功率200 W,此工藝下單寧提取量為70.152 mg/g。為檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,取干燥的遼東櫟橡碗粉末進(jìn)行三次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)單寧平均提取量為70.143 mg/g,相對(duì)誤差為0.013%。表明經(jīng)過(guò)相應(yīng)回歸方程擬合得出的理論值與實(shí)際值吻合,證明用響應(yīng)面法可以有效優(yōu)化遼東櫟橡碗單寧提取工藝。

曹海霞等[28]通過(guò)超聲波輔助提取法對(duì)蒙古櫟橡子單寧脫除工藝進(jìn)行優(yōu)化后,發(fā)現(xiàn)最優(yōu)工藝下蒙古櫟橡子單寧提取量為69.99 mg/g,本研究同樣采用超聲波輔助提取法得到最優(yōu)工藝下遼東櫟橡碗單寧提取量為70.143 mg/g,這種差異來(lái)源于所選擇實(shí)驗(yàn)材料,同時(shí),橡碗的采集時(shí)間及處理方式也會(huì)對(duì)單寧提取量造成影響。

2.3 單寧抗氧化活性的測(cè)定

2.3.1 總抗氧化活性 以樣液濃度(mg/L)為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),比較樣液濃度為20～80 mg/L時(shí),遼東櫟橡碗單寧及抗壞血酸的抗氧化活性差異。

由圖11可知,遼東櫟橡碗單寧與抗壞血酸的總抗氧化活性均隨樣液濃度提高而顯著提高(p<0.05)。遼東櫟橡碗單寧濃度為80 mg/L時(shí),吸光值達(dá)到最大,為0.66,較相同質(zhì)量濃度的抗壞血酸吸光值低25.84%,說(shuō)明遼東櫟橡碗單寧具有一定的抗氧化活性。

圖11 不同質(zhì)量濃度樣液的總抗氧化性Fig.11 Total antioxidant activity ofsamples with different concentration

2.3.2 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除率 由圖12可知,遼東櫟橡碗單寧與抗壞血酸對(duì)DPPH·清除率呈顯著正相關(guān)關(guān)系(p<0.05)。遼東櫟橡碗單寧濃度為80 mg/L時(shí),DPPH·清除率達(dá)到最大,為72.4%,較相同質(zhì)量濃度的抗壞血酸DPPH·清除率(91.3%)低18.9%,說(shuō)明遼東櫟橡碗單寧具有較強(qiáng)的DPPH·清除率。

圖12 不同質(zhì)量濃度樣液的DPPH·清除率Fig. 12 Scavenging rate of samples with different concentration on DPPH·

2.3.3 羥自由基(·OH)清除率 由圖13可知,隨樣液濃度的提高,遼東櫟橡碗單寧濃度與·OH清除率呈顯著正相關(guān)(p<0.05)。遼東櫟橡碗單寧濃度為80 mg/L時(shí),其對(duì)·OH清除率達(dá)到最高值58.7%,較同濃度抗壞血酸(87.3%)低28.6%。表明遼東櫟橡碗單寧具有一定的·OH清除能力。

圖13 不同質(zhì)量濃度樣液的·OH清除率Fig. 13 Scavenging rate of samples with different concentration on ·OH

3 結(jié)論

采用響應(yīng)面法對(duì)遼東櫟橡碗單寧提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化,建立了單寧提取量的回歸模型,由該模型優(yōu)化的單寧提取條件為液料比30∶1 mL/g,乙醇體積分?jǐn)?shù)50%,溫度50 ℃,功率200 W,此工藝下理論單寧提取量為70.152 mg/g。為檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,進(jìn)行了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),得單寧平均提取量為70.143 mg/g,相對(duì)誤差為0.013%,說(shuō)明該模型可靠。遼東櫟橡碗單寧具有較強(qiáng)的抗氧化能力,且對(duì)DPPH·與·OH均具有較強(qiáng)的清除能力?？寡趸钚约白杂苫宄芰εc單寧質(zhì)量濃度呈顯著正相關(guān)?？蓪⑦|東櫟橡碗作為新型抗氧化劑開(kāi)發(fā),提高遼東櫟資源的綜合利用率。