李孝武，譚鑫，李競(jìng)，潘婷婷，萬(wàn)靜

（四川省德陽(yáng)市羅江區(qū)畜牧食品局，四川 羅江 618500）

獸藥在防治動(dòng)物疾病、提高生產(chǎn)效率等方面起著十分重要的作用，但由于經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使，常常出現(xiàn)違規(guī)生產(chǎn)、濫用獸藥的情況，造成動(dòng)物源食品的獸藥殘留[1]。獸藥殘留既包括原藥，也包括藥物在動(dòng)物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物和獸藥生產(chǎn)中伴生的雜質(zhì)[2]，其在畜禽細(xì)胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品（奶、蛋）中蓄積，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體內(nèi)，導(dǎo)致人體產(chǎn)生急慢性中毒、耐藥菌繁殖、過(guò)敏反應(yīng)、腸道菌群失調(diào)等疾病[3-4]。因此，獸藥殘留是食品安全和公共衛(wèi)生安全的重要監(jiān)管對(duì)象?；鶎荧F藥殘留監(jiān)控是保障畜產(chǎn)品質(zhì)量安全的重要舉措，但基層沒(méi)有專業(yè)的獸藥殘留檢測(cè)機(jī)構(gòu)，故監(jiān)管方面存在不小的難度。獸藥殘留快速檢測(cè)卡是一種快速、比較高效的檢測(cè)方式，本研究旨在探討其在基層獸藥殘留監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，為建立基層獸藥殘留檢測(cè)體系提供參考。

1 材料與方法

1.1 待檢樣本 采取隨機(jī)抽樣的方式從羅江區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)中抽取雞蛋樣本、鴨蛋樣本、豬尿液樣本、牛尿液樣本、羊尿液樣本、牛奶樣本、雞肉樣本共200個(gè)，保存至4℃冰箱備用（樣本分布情況見(jiàn)表1）。

1.2 快速檢測(cè)卡 環(huán)丙沙星快速檢測(cè)卡（檢測(cè)限20μg/kg），氯霉素快速檢測(cè)卡（檢測(cè)限 1μg/kg），青霉素G快速檢測(cè)卡（檢測(cè)限20 μg/kg），頭孢類快速檢測(cè)卡（檢測(cè)限 20 μg/kg），喹諾酮類快速檢測(cè)卡（20～80 μg/kg）。以上檢測(cè)卡均購(gòu)買于杭州泰熙生物技術(shù)有限公司。

表1 待檢樣本抽樣情況

1.3 檢測(cè)方法 按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行獸藥殘留的快速檢測(cè)。操作步驟如下：

1.3.1 禽蛋中獸藥殘留的測(cè)定 （1）用滴管吸取3滴（約100μL）待檢蛋清樣本，滴至1.5mL小離心管中；（2）再用潔凈滴管滴加 9滴（約 300 μL）專用稀釋液于小離心管中；（3）將離心管劇烈振蕩2min，靜置1min；（4）取出檢測(cè)卡平放，吸取待檢樣品的上清液，緩慢垂直滴加2～3滴于加樣孔中，加樣后開始計(jì)時(shí)；（5）3～5min讀取結(jié)果，按照說(shuō)明書判定標(biāo)準(zhǔn)填寫檢測(cè)結(jié)果。

1.3.2 尿液和牛奶中獸藥殘留的測(cè)定 （1）取出檢測(cè)卡平放（打開后1h內(nèi)盡快使用），用滴管吸取待檢樣品溶液，緩慢垂直滴加2～3滴于加樣孔中，加樣后開始計(jì)時(shí)；（2）結(jié)果在3～5min時(shí)讀取，按照說(shuō)明書判定標(biāo)準(zhǔn)填寫檢測(cè)結(jié)果。

1.3.3 雞肉組織中獸藥殘留的測(cè)定 （1）將待檢的去脂肪肉組織樣本搗碎；（2）稱取2g置于5mL冷凍管中，加入0.5mL專用提取液；（3）劇烈振蕩5min，室溫下 4000r/min 離心 3min，再靜置 5min；（4）取出檢測(cè)卡平放，吸取待檢樣品的上清液，緩慢垂直滴加2～3滴于加樣孔中，加樣后開始計(jì)時(shí)；（5）結(jié)果在3～5min時(shí)讀取，按照說(shuō)明書判定標(biāo)準(zhǔn)填寫檢測(cè)結(jié)果。

2 檢測(cè)結(jié)果

使用獸藥殘留快速檢測(cè)卡對(duì)待檢樣本進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，40個(gè)雞蛋樣本的環(huán)丙沙星檢測(cè)結(jié)果為陰性，40個(gè)鴨蛋樣本的環(huán)丙沙星檢測(cè)結(jié)果也為陰性；50個(gè)豬尿樣本的環(huán)丙沙星和青霉素G檢測(cè)結(jié)果均為陰性；20個(gè)牛尿樣本的青霉素G檢測(cè)結(jié)果為陰性，環(huán)丙沙星檢測(cè)結(jié)果有1個(gè)樣本為陽(yáng)性；20個(gè)羊尿樣本的環(huán)丙沙星和青霉素G檢測(cè)結(jié)果均為陰性；20個(gè)牛奶樣本的青霉素G和喹諾酮類檢測(cè)結(jié)果為陰性，氯霉素檢測(cè)結(jié)果有1個(gè)樣本無(wú)效，其余19個(gè)呈陰性；10個(gè)雞肉樣本的環(huán)丙沙星、頭孢類和喹諾酮類檢測(cè)結(jié)果均為陰性（表2）。

表2 200個(gè)樣本的藥殘檢測(cè)結(jié)果

3 結(jié)論與分析

本研究共使用350張快速檢測(cè)卡對(duì)200個(gè)樣本進(jìn)行了檢測(cè)，其中有一個(gè)牛尿樣本的環(huán)丙沙星檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，經(jīng)核查，該樣本來(lái)源于一頭12月齡肉牛，因前期換季生病，駐場(chǎng)獸醫(yī)使用過(guò)抗生素治療。本研究只有一個(gè)牛奶樣本的氯霉素檢測(cè)結(jié)果為無(wú)效，其他檢測(cè)均有效。我國(guó)基層目前基本沒(méi)有專業(yè)的獸藥殘留檢測(cè)機(jī)構(gòu)，需要將樣品送至市級(jí)或省級(jí)檢測(cè)部門分析，由于基層樣品量大，檢測(cè)成本高及檢測(cè)周期長(zhǎng)，導(dǎo)致檢測(cè)效率很低。本研究結(jié)果表明，獸藥殘留快速檢測(cè)卡方便、快速、有效，適合基層單位使用。

獸藥殘留快速檢測(cè)卡是一種以膠體金為標(biāo)記物的免疫層析方法，檢測(cè)原理為：滴加樣品溶液到試紙卡上后，待測(cè)物與卡內(nèi)層析材料上相應(yīng)的受體結(jié)合，通過(guò)膠體金結(jié)合物顯示條帶，達(dá)到檢測(cè)目的[5]。該方法操作簡(jiǎn)單，可現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，不用攜帶儀器，幾分鐘就出結(jié)果。獸藥殘留快速檢測(cè)卡是一種具有檢測(cè)限的定性定量檢測(cè)卡，只有當(dāng)有害物質(zhì)的殘留量超出規(guī)定的檢測(cè)限后，才能被檢測(cè)到，但其不能對(duì)獸藥殘留物進(jìn)行準(zhǔn)確定量，故也具有局限性。