孫偉麗 樊燕燕 張 婷 王 卓 李恒偉 李光玉*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130112；2.牧原食品科技股份有限公司，洛陽(yáng) 420106；3.山東亞康檢測(cè)技術(shù)有限公司，濰坊 261101)

半胱胺鹽酸鹽(cysteamine hydrochloride，CSH)作為一種功能性飼料添加劑，具有多種生物學(xué)作用，主要表現(xiàn)在通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能、耗竭生長(zhǎng)抑素(SS)來(lái)促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[1]，這在雞、豬等畜禽及水產(chǎn)動(dòng)物生產(chǎn)上已得到證實(shí)。CSH作為一種SS抑制劑的出現(xiàn)，在畜禽生產(chǎn)上被廣泛應(yīng)用，主要在于其可以通過(guò)神經(jīng)內(nèi)分泌途徑來(lái)調(diào)控畜禽的生長(zhǎng)。CSH主要通過(guò)抑制機(jī)體外周組織和中樞神經(jīng)組織的SS免疫活性和生物活性發(fā)揮作用，從而相對(duì)提高機(jī)體生長(zhǎng)激素(GH)含量，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，是一種高效的SS抑制劑。有研究表明，CSH可以降低垂體催乳素含量，抑制多巴胺β羥化酶活性[2-4]。多巴胺β羥化酶可以催化多巴胺生成去甲腎上腺素，其活性的抑制導(dǎo)致多巴胺在下丘腦大量蓄積，從而促進(jìn)GH的合成和分泌，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。CSH可以引起動(dòng)物機(jī)體組織(胰腺、消化道和中樞神經(jīng)組織等)和血清中SS免疫活性的迅速喪失，且在胰腺組織中，CSH在抑制胰島細(xì)胞中SS免疫活性的同時(shí)，可禁止胰島細(xì)胞分泌SS[5-8]；Mcleod等[9]研究發(fā)現(xiàn)，CSH可以提高機(jī)體胰島素、胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)的分泌。這些激素是促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育，參與機(jī)體同化作用的重要激素，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用。

影響毛皮動(dòng)物產(chǎn)毛品質(zhì)的一個(gè)關(guān)鍵因素是飼料營(yíng)養(yǎng)，營(yíng)養(yǎng)調(diào)控技術(shù)是改善毛皮動(dòng)物皮張質(zhì)量、提高養(yǎng)殖效益的關(guān)鍵技術(shù)。王忠艷[10]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中每隔5 d添加70 mg/kg BW的CSH可以提高銀狐平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，同時(shí)對(duì)繁殖期銀狐產(chǎn)仔率也有一定的改善作用。白世平等[11]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加CSH可以提高育成期雄性水貂的平均日增重和整個(gè)生長(zhǎng)期的血清GH、T3、T4和IGF-Ⅰ含量，對(duì)毛皮品質(zhì)也有一定的改善作用。黃卉[12]研究發(fā)現(xiàn)，在干粉飼糧中添加20 mg/kg的CSH可以提高貉平均日增重、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、飼料轉(zhuǎn)化率和毛皮品質(zhì)，同時(shí)提高血清中總蛋白(TP)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和甘油三酯(TG)含量。徐銀學(xué)等[13]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加5 mg/d的CSH對(duì)海貍鼠有一定的促生長(zhǎng)作用，同時(shí)可以提高血清GH和IGF-Ⅰ含量。

CSH對(duì)毛皮動(dòng)物有一定的促生長(zhǎng)作用，但是作用機(jī)理還有待進(jìn)一步探討。根據(jù)以上背景，結(jié)合水貂的生理特點(diǎn)及CSH的作用機(jī)理開展本試驗(yàn)，旨在研究飼糧中添加CSH對(duì)冬毛期雄性水貂毛皮品質(zhì)、血清生化和激素指標(biāo)及肝臟相關(guān)基因表達(dá)的影響，以期為CSH在水貂生產(chǎn)上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用CSH為β-CD-CSH，由上海華擴(kuò)達(dá)生化科技有限公司提供，是以β-環(huán)糊精與CSH等營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)，采用超分子技術(shù)、仿生物膜技術(shù)和維持生理穩(wěn)態(tài)技術(shù)，經(jīng)特殊工藝生產(chǎn)的生理代謝調(diào)控添加劑，具有一定的穩(wěn)定性，CSH有效成分含量≥30%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動(dòng)物試驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)采用雙因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，影響因素為CSH的添加水平和添加方式。選取160日齡體重[(2.13±0.10) kg]相近的健康雄性水貂56只，隨機(jī)分為7組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只。預(yù)試期7 d，正試期51 d。

1.3 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

基礎(chǔ)飼糧為參照NRC[14](1982)中有關(guān)的水貂營(yíng)養(yǎng)需要量，并結(jié)合本課題組多年來(lái)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)的冬毛期飼糧?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。各組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)中添加0(Ⅰ組，對(duì)照組)、60(Ⅱ組)、90(Ⅲ組)、120(Ⅳ組)、60(Ⅴ組)、90(Ⅵ組)、120 mg/kg(Ⅶ組)CSH的試驗(yàn)飼糧；其中，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組添加方式為連續(xù)添加，Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ組添加方式為間隔添加(連續(xù)添加1周，間隔1周)。試驗(yàn)動(dòng)物單籠飼養(yǎng)，由專人進(jìn)行飼養(yǎng)管理，每日08:00和15:00各飼喂1次，自由采食并保證充足飲水。觀察試驗(yàn)動(dòng)物健康狀況并做好記錄。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of the diet: VA 10 000 IU，VD32 000 IU，VE 100 IU，VB16 mg，VB210 mg，VB66 mg，VB120.1 mg，VK31 mg，VC 400 mg，煙酸 nicotinic acid 30 mg，D-泛酸D-pantothenic acid 40 mg，生物素 biotin 0.2 mg，葉酸 folic acid 1 mg，膽堿 choline 400 mg，F(xiàn)e 82 mg，Cu 20 mg，Mn 120 mg，Zn 50 mg，I 0.5 mg，Se 0.2 mg，Co 0.3 mg。2)代謝能為計(jì)算值，其他為實(shí)測(cè)值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.4 樣品采集與指標(biāo)測(cè)試

1.4.1 毛皮品質(zhì)指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，采用皮下注射氯化琥珀膽堿的方法對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死后，取皮后上煊板由鼻尖到尾根測(cè)定皮長(zhǎng)，并用精密刻度尺測(cè)量背中部皮膚的針毛長(zhǎng)度、絨毛長(zhǎng)度。

1.4.2 血清生化和激素指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組挑選6只健康水貂，屠宰前每只水貂心臟采血5 mL，裝入促凝采血管，迅速帶回實(shí)驗(yàn)室，4 000 r/min離心10 min，分離血清于1.5 mL EP離心管中，-20 ℃冷凍保存?zhèn)溆?。血清生化指?biāo)[TP、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(UN)、TG、CHO含量] 采用全自動(dòng)生化分析儀(Selectra E，荷蘭)測(cè)定，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作，試劑盒購(gòu)自中生北控生物科技股份有限公司。血清激素指標(biāo)[GH、SS、生長(zhǎng)激素受體(GHR)、IGF-Ⅰ、胰島素樣生長(zhǎng)因子-I受體(IGF-ⅠR)、T3、T4含量]采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)試劑盒進(jìn)行測(cè)定，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作，試劑盒購(gòu)自南京中生北控生物科技股份有限公司。

1.4.3 肝臟相關(guān)基因表達(dá)量測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死。解剖取肝臟5～10 g，放入RNase-free凍存管中，現(xiàn)場(chǎng)置入液氮保存，隔天轉(zhuǎn)入-80 ℃冷藏。準(zhǔn)備試劑如下：RNase-free、DNase-free Water、氯仿、異丙醇、無(wú)水乙醇，Trizol、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒、DNA Marker DL500、pMDTM18-T Vector、瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒、熒光定量PCR反應(yīng)試劑盒。采用Trizol法提取水貂肝臟總RNA，參照TaKaRa的反轉(zhuǎn)錄試劑盒，采用兩步法進(jìn)行，第1步去除基因組DNA，第2步反轉(zhuǎn)錄。β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)引物參照張海華[15]設(shè)計(jì)；根據(jù)GenBank中水貂IGF-Ⅰ序列(登錄號(hào)：FJ_472818.1)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體(IGF-ⅠR)序列(登錄號(hào)：XM_004759809.1)和生長(zhǎng)激素受體(GHR)序列(登錄號(hào)：XM_004737948.2)利用Primer 5.0設(shè)計(jì)特異性引物；引物由華大基因合成，PCR引物序列見表2?；虻谋磉_(dá)量用2-ΔΔCT法計(jì)算。

表2 PCR引物序列

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SAS 9.1進(jìn)行雙因素方差分析(two-way ANOVA)，差異顯著性采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，再采用GLM程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行多因子統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。P>0.05為差異不顯著，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂毛皮品質(zhì)的影響

由表4可知，飼糧中添加CSH顯著影響了水貂皮長(zhǎng)、針毛長(zhǎng)度和絨毛長(zhǎng)度(P<0.05)。水貂皮長(zhǎng)隨著CSH添加水平的提高而增大，Ⅵ和Ⅶ組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；針毛長(zhǎng)度、絨毛長(zhǎng)度分別以Ⅶ和Ⅵ組最高，分別極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05)高于對(duì)照組。CSH添加方式極顯著影響了水貂針毛長(zhǎng)度(P<0.01)，間隔添加組極顯著高于連續(xù)添加組(P<0.01)。CSH添加水平顯著影響了水貂針毛長(zhǎng)度(P<0.05)，90 mg/kg添加組顯著高于60和120 mg/kg添加組(P<0.05)。CSH添加方式和添加水平對(duì)水貂針毛長(zhǎng)度、絨毛長(zhǎng)度有顯著或極顯著交互作用(P<0.05或P<0.01)。

表3 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂毛皮品質(zhì)的影響

同一項(xiàng)目同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，相同或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。In the same item and column, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧中添加CSH顯著影響了水貂血清UN、TG含量(P<0.05)。其中，Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ組水貂血清UN含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，Ⅱ組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組血清TG含量極顯著低于對(duì)照組、Ⅳ組(P<0.01)，Ⅴ、Ⅶ組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。CSH添加方式極顯著影響了水貂血清UN含量(P<0.01)，間隔添加組血清UN含量極顯著低于連續(xù)添加組(P<0.01)。CSH添加水平顯著或極顯著影響了水貂血清UN和TG含量(P<0.05或P<0.01)，90 mg/kg添加組血清UN含量顯著低于60和120 mg/kg添加組(P<0.05)，90 mg/kg添加組血清TG含量極顯著低于120 mg/kg添加組(P<0.01)。CSH添加方式和添加水平對(duì)水貂血清TG含量有顯著交互作用(P<0.05)。

2.3 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂血清激素指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧中添加CSH顯著或極顯著影響了水貂血清GH、SS、GHR、IGF-Ⅰ含量(P<0.05或P<0.01)。其中，水貂血清GH含量隨著CSH添加水平的升高先升高后降低，Ⅵ組顯著高于對(duì)照組、Ⅳ組(P<0.05)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組血清SS含量顯著低于Ⅰ、Ⅳ組(P<0.05)；Ⅱ、Ⅳ、Ⅶ組血清GHR含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ組極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)；Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ組血清IGF-Ⅰ含量顯著高于Ⅳ組(P<0.05)。CSH添加方式對(duì)水貂血清激素含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。CSH添加水平顯著影響了水貂血清SS含量(P<0.05)，90 mg/kg添加組顯著低于120 mg/kg添加組。CSH添加方式和添加水平對(duì)水貂血清激素含量無(wú)顯著交互作用(P>0.05)。

表4 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂血清生化指標(biāo)的影響

表5 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂血清激素指標(biāo)的影響

續(xù)表5項(xiàng)目Items生長(zhǎng)激素GH生長(zhǎng)抑素SS生長(zhǎng)激素受體GHR胰島素樣生長(zhǎng)因子-ⅠIGF-Ⅰ 胰島素樣生長(zhǎng)因子-Ⅰ受體IGF-ⅠR三碘甲腺原氨酸T3甲狀腺素T4添加方式Supplemental way連續(xù)Continuous0.97±0.0838.45±6.854.88±0.6778.38±9.096.64±0.69 0.65±0.15 21.40±3.68間隔Interval1.03±0.1138.38±4.135.01±0.6983.53±5.487.22±0.960.69±0.1021.65±3.45添加水平Supplemental level/(mg/kg)601.01±0.1438.34±6.00ab4.96±0.8583.45±8.927.20±1.170.69±0.1421.98±3.81901.06±0.0834.89±2.42b5.27±0.2184.05±3.167.08±0.360.67±0.1121.13±3.451200.96±0.0441.18±5.07a4.71±0.6777.26±7.336.67±0.860.66±0.1321.46±3.48P值P-value組別 Group0.017 60.012 10.006 10.033 70.325 60.924 20.941 8添加方式Supplemental way0.119 10.649 70.733 20.120 40.104 20.455 20.873 8添加水平Supplemental level0.102 60.017 70.187 90.065 00.500 50.949 30.750 4添加方式×添加水平 Supplemental way×supplemental level0.894 60.317 50.996 80.351 80.947 90.653 70.652 6

2.4 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量的影響

由表7可知，飼糧中添加CSH顯著或極顯著影響了水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量(P<0.05或P<0.01)。其中，以Ⅵ組水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量最高，Ⅵ組肝臟IGF-Ⅰ基因表達(dá)量顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組(P<0.05)，與其他各組差異不顯著(P>0.05)；Ⅵ組肝臟IGF-ⅠR基因表達(dá)量顯著高于Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組(P<0.05)，與其他各組差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ、Ⅴ組肝臟GHR基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ組肝臟GHR基因表達(dá)量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。CSH添加方式極顯著影響了水貂肝臟IGF-ⅠR基因表達(dá)量(P<0.01)，間隔添加組肝臟IGF-ⅠR基因表達(dá)量極顯著高于連續(xù)添加組(P<0.01)。CSH添加水平顯著或極顯著影響了水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR基因表達(dá)量(P<0.05或P<0.01)，隨著CSH添加水平的提高，肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR基因表達(dá)量先升高后降低，90 mg/kg添加組肝臟IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因表達(dá)量顯著或極顯著高于60和120 mg/kg添加組(P<0.05或P<0.01)。CSH添加水平和添加方式對(duì)水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量無(wú)顯著交互作用(P>0.05)。

3 討 論

3.1 CSH對(duì)冬毛期水貂毛皮品質(zhì)的影響

冬毛期水貂以毛皮生長(zhǎng)發(fā)育為主，度過(guò)了骨骼快速生長(zhǎng)期，主要是肌肉的生長(zhǎng)和脂肪的沉積，毛皮品質(zhì)是評(píng)價(jià)冬毛期水貂生產(chǎn)性能的直接指標(biāo)，本試驗(yàn)對(duì)冬毛期末水貂皮長(zhǎng)、針毛長(zhǎng)度和絨毛長(zhǎng)度做了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)， CSH添加組水貂皮長(zhǎng)、針毛長(zhǎng)度和絨毛長(zhǎng)度均有所增加，以Ⅵ、Ⅶ組添加效果最好，間隔添加組針毛長(zhǎng)度較連續(xù)添加組提高了3.4%；不同添加水平之間以90 mg/kg添加組最佳；CSH對(duì)水貂毛皮品質(zhì)有一定的改善作用。黃繼卓等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CSH提高了東北細(xì)毛羊生產(chǎn)性能，降低了料重比，其中羊毛長(zhǎng)度較對(duì)照組提高了9.1%，細(xì)度提高了6.2%，彈力也有所提高，且隨著CSH添加水平的升高先增加后降低。徐軍等[17]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中間隔添加CSH使遼寧絨山羊絨和毛的自然長(zhǎng)度分別提高了32.2%和34.8%，毛細(xì)度提高了6.56%，絨細(xì)度降低了6.22%。白世平等[11]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧連續(xù)添加CSH提高了冬毛期雄性水貂皮長(zhǎng)和皮重，皮重提高了23%。綜上所述，飼糧中添加CSH可以改善動(dòng)物毛皮品質(zhì)，這可能與CSH分子內(nèi)部的活性巰基有關(guān)。影響毛皮質(zhì)量的因素很多，硫的供給成為毛角蛋白合成的限制性因素，無(wú)論有機(jī)硫或無(wú)機(jī)硫?qū)γて焚|(zhì)都有一定的促進(jìn)作用[18]。CSH不僅為機(jī)體提供硫元素，還參與機(jī)體內(nèi)分泌調(diào)節(jié)，改善營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分配，綜合作用可能提高水貂生產(chǎn)性能，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

表6 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量的影響

3.2 CSH對(duì)冬毛期水貂血清生化和激素指標(biāo)的影響

蛋白質(zhì)是血液中固體成分最多的一類物質(zhì)，具有運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和調(diào)節(jié)被運(yùn)輸物質(zhì)生理功能、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等作用，對(duì)其含量的分析有助于了解機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況和免疫機(jī)能[19]。本試驗(yàn)中，CSH添加組水貂血清含量顯著高于對(duì)照組，飼糧中添加CSH對(duì)血清ALB和GLO含量無(wú)顯著影響，間隔添加組血清TP和GLO含量高于連續(xù)添加組。UN是反映機(jī)體蛋白質(zhì)分解的重要指標(biāo)，哺乳動(dòng)物氮排泄的主要形式，與氮的利用率呈負(fù)相關(guān)[20]。本試驗(yàn)中，CSH添加組血清UN含量低于對(duì)照組，說(shuō)明CSH提高了冬毛期水貂氮沉積，這與氮代謝研究結(jié)果一致[21]。冬毛期水貂體重已達(dá)到成熟，處于維持體重階段，但毛皮發(fā)育尤其針毛和絨毛的生長(zhǎng)處于活躍階段，且蛋白質(zhì)是影響毛皮生長(zhǎng)的主要因素。血清含量的升高有助于提高機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)，促進(jìn)蛋白質(zhì)沉積，提高機(jī)體免疫力，進(jìn)而促進(jìn)毛皮的生長(zhǎng)。

飼糧中添加CSH顯著降低了冬毛期雄性水貂血清TG含量，且隨著CSH添加水平的增加先降低后升高，血清CHO含量無(wú)顯著變化。肝臟是血清TG合成的主要來(lái)源，高脂血癥是脂肪病變的主要致病因素之一[22]。本試驗(yàn)中，飼糧中添加CSH降低了水貂血清TG含量，說(shuō)明其對(duì)肝臟有一定的保護(hù)作用。冬毛期水貂以毛皮生長(zhǎng)和越冬脂肪沉積為主，動(dòng)物從飼糧中獲取的脂肪多沉積到皮下脂肪組織中，CSH添加組血清TG含量的降低說(shuō)明其減少脂肪組織中的脂肪動(dòng)員，相應(yīng)促進(jìn)脂肪沉積。血清生化指標(biāo)反映整個(gè)動(dòng)物機(jī)體的代謝狀況，受多種因素的影響，CSH對(duì)動(dòng)物機(jī)體的影響主要基于其對(duì)內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)，進(jìn)而引起相關(guān)的生理變化，所以血清蛋白質(zhì)和血脂含量的改變可能與CSH改變激素分泌狀況有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步分析。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加CSH提高了冬毛期雄性水貂血清GH、GHR和IGF-Ⅰ含量，降低了血清SS含量，間隔添加組顯著提高了血清GH含量，降低了血清SS含量，以90 mg/kg添加水平最佳。這說(shuō)明飼糧中添加CSH對(duì)冬毛期水貂促生長(zhǎng)類激素的分泌依然有一定的促進(jìn)作用，尤其對(duì)IGF-Ⅰ的分泌影響較大。SS具有抑制GH、IGF-Ⅰ、促甲狀腺素及相關(guān)激素分泌的生理作用，同時(shí)對(duì)胃腸消化酶的分泌及活性也有一定抑制作用，進(jìn)而抑制動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育[23-25]。動(dòng)物的毛囊發(fā)育受多種生長(zhǎng)因子的調(diào)控，IGF-Ⅰ對(duì)毛囊發(fā)育有著十分重要的意義[26]。飼糧中添加CSH提高了血清IGF-Ⅰ含量，說(shuō)明飼糧中添加CSH可以促進(jìn)水貂冬毛期水貂毛皮的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.3 CSH對(duì)冬毛期雄性水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量的影響

動(dòng)物的生長(zhǎng)受GH-胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGFs)生長(zhǎng)軸的調(diào)控，主要包括垂體釋放的GH以及靶器官如肝臟分泌的IGFs。本試驗(yàn)研究了CSH對(duì)水貂生長(zhǎng)軸相關(guān)基因表達(dá)量的影響，結(jié)果顯示，飼糧中添加CSH提高了水貂肝臟IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和GHR基因表達(dá)量，間隔添加效果均優(yōu)于連續(xù)添加，且隨著CSH添加水平的增加先升高后降低。Li等[27]研究表明，飼糧連續(xù)添加CSH提高了石斑魚垂體GH和肝臟GHR的基因表達(dá)量，且隨著CSH添加水平的增加先升高后降低。馬細(xì)蘭等[28]研究發(fā)現(xiàn)，給尼羅羅非魚腹腔注射100 μg/g的CSH，垂體GH基因表達(dá)量顯著升高，同時(shí)肝臟GHR和IGF-Ⅰ基因表達(dá)量也顯著上升。任道平等[29]研究報(bào)道，飼糧中添加CSH提高了東北細(xì)毛羊肝臟、肌肉和皮膚中IGF-Ⅰ基因表達(dá)量，隨著CSH添加水平的升高有所降低。綜上所述，飼糧中添加CSH可以提高生長(zhǎng)軸相關(guān)基因的表達(dá)量，但當(dāng)CSH添加水平達(dá)到一定程度時(shí)，相關(guān)基因表達(dá)量有所下降，這表明CSH在生產(chǎn)中具有一定的劑量依賴性。飼糧中添加CSH對(duì)冬毛期水貂毛皮品質(zhì)有所改善，血清促生長(zhǎng)類激素含量也有所升高，這與本試驗(yàn)關(guān)于生長(zhǎng)軸基因表達(dá)量的結(jié)果相呼應(yīng)。綜合說(shuō)明，飼糧中添加CSH通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)，提高生長(zhǎng)軸相關(guān)基因表達(dá)量，進(jìn)而改善動(dòng)物的毛皮生產(chǎn)性能，但作用中有一定的劑量-時(shí)間依賴效應(yīng)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，間隔添加的效果優(yōu)于連續(xù)添加，連續(xù)添加CSH能引起動(dòng)物胃潰瘍。CSH促生長(zhǎng)的機(jī)理主要是抑制SS的分泌，然而SS對(duì)于應(yīng)激和CSH等引起的胃損傷有明顯的保護(hù)作用，應(yīng)激和CSH性潰瘍的特征是胃酸和胃蛋白酶分泌增加[30-32]。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加CSH能夠提高冬毛期雄性水貂的毛皮品質(zhì)，降低血清UN含量，提高促生長(zhǎng)類激素含量。

② 綜合各項(xiàng)指標(biāo)，在本試驗(yàn)條件下，冬毛期雄性水貂飼糧中CSH的適宜添加水平為90 mg/kg，適宜添加方式為間隔添加。