劉桂艷
(武漢華夏理工學(xué)院,湖北武漢 430223)
紅景天為多年生草本植物,主要生長(zhǎng)在海拔1600~4000m的高寒、干燥、缺氧、強(qiáng)紫外線照射、晝夜溫差大的地區(qū),具有極強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)能力和生命力。紅景天苷是從紅景天中提取而來,在醫(yī)學(xué)中,紅景天苷具有增強(qiáng)免疫力、消除憂郁感、保護(hù)心血管、美白、抗輻射等功效,其與其他藥物相互作用還能夠提高T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和吞噬細(xì)胞活力、抑制腫瘤細(xì)胞的增長(zhǎng)[1],因此具有一定的研究?jī)r(jià)值。
在市場(chǎng)中購(gòu)買了紅景天,經(jīng)過鑒定后,確定其為紅景天,將其作為實(shí)驗(yàn)的主要材料。為制備溶劑準(zhǔn)備乙醇(分析醇)、純凈水以及氫氧化鈉[2]。
在實(shí)驗(yàn)中,我們選取的實(shí)驗(yàn)設(shè)備為AB135-S天平;6002-8高速粉碎機(jī);高效冷凍離心機(jī)以及高效液相色譜儀[5]。
1.2.1 紅景天苷含量測(cè)定
為了確保紅景天提取紅景天苷實(shí)驗(yàn)的精確性,通過單因素實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)影響提取率的因素進(jìn)行了排除實(shí)驗(yàn)。然后通過公式計(jì)算,得到紅景天苷的提取率。
1.2.2 溶液制備
利用6002-8高速粉碎機(jī)將紅景天粉碎,磨成實(shí)驗(yàn)可以用的粉末,利用AB135-S天平稱取5g的紅景天粉末,然后進(jìn)行水浴回流提取,提取剩余殘?jiān)褂靡掖歼M(jìn)行清洗[4],然后使用甲醇溶液對(duì)其進(jìn)行溶解,最后通過濾膜,將濾液進(jìn)行過濾處理,制定出適宜的濾液,準(zhǔn)備在實(shí)驗(yàn)中使用。
1.2.3 響應(yīng)面優(yōu)化工藝
在提取過程中料液比、溫度、時(shí)間都會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生一定的影響,因此,采用了單因素變化實(shí)驗(yàn)方法,實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。
表1 響應(yīng)面因素
在實(shí)驗(yàn)中,設(shè)置溫度為65℃、提取時(shí)間為60min,然后將pH值分別設(shè)置為6.5、7.0、8.0、8.5和9.0,結(jié)果如圖1所示。由圖1可看出,在溫度與提取時(shí)間相同時(shí),當(dāng)pH值為8.2時(shí)提取率達(dá)到了最高,由此可見,在紅景天苷的提取過程中,pH值最佳設(shè)定參數(shù)為8.2。
圖1 pH值對(duì)提取率的影響
在研究提取時(shí)間對(duì)提取率的影響時(shí),將pH值固定為7.5,提取溫度固定為65℃,將提取時(shí)間分別設(shè)置為25min、40min、55min、70min和85min,經(jīng)過實(shí)驗(yàn),我們對(duì)比了不同時(shí)間段的提取值,時(shí)間在40min左右時(shí),提取率出現(xiàn)高峰,隨后我們從40min開始觀察,當(dāng)時(shí)間處于45.11min時(shí),提取率最佳,因此得出提取時(shí)間為45.11min時(shí),能夠達(dá)到3.9%,由此得到了最佳的提取時(shí)間為45.11min。
對(duì)料液比的比值對(duì)提取率影響進(jìn)行了研究,與上述方法相同,將pH值設(shè)定為7.5,將提取時(shí)間設(shè)定為45min,然后將料液比分別設(shè)置為1∶39、1∶33、1∶29、1∶22、1∶19,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,1∶39時(shí)提取率為3.1%;1∶33時(shí)提取率為3.7%;1∶29時(shí)提取率能夠達(dá)到4.4%;1∶22時(shí)提取率為4.0%;1∶19時(shí)提取率為3.9%。在料液比為1∶29時(shí),提取率能夠達(dá)到4.4%,由此可見,料液比的最佳比值為1∶ 29。
通過實(shí)驗(yàn)與對(duì)比,最終得到了單因素分析法優(yōu)化紅景天中紅景天苷提取工藝最佳參數(shù),其中乙醇的濃度為61%,料液比的比值為1:32:90。最佳的提取時(shí)間為45.11min,最佳提取溫度為63℃,其最佳pH值為8.2。由此可見單因素分析法優(yōu)化紅景天中紅景天苷提取方法具有較高的穩(wěn)定性,提取的過程十分科學(xué),適合在紅景天苷提取過程中使用。通過上述的最佳參數(shù)對(duì)紅景天中的紅景天苷進(jìn)行提取,其提取率能夠達(dá)到5.72%,由實(shí)驗(yàn)前根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行推測(cè)的理論提取率值相比較,兩者能夠吻合,因此響應(yīng)面法在紅景天苷的提取中確實(shí)可行。該提取方法不僅能夠?qū)t景天苷的提取提供最佳方法,與此同時(shí)也為未來的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究提供的實(shí)踐依據(jù)。