王麗霞　張寧　孫寶剛　曹井賀　粱魯南　董業(yè)浩　楊愛軍

【摘 要】目的：探討男性年齡對(duì)精子質(zhì)量及其宮腔內(nèi)人工授精臨床結(jié)局影響的研究。方法： 選擇在濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖中心接受宮腔內(nèi)人工授精（IUI）治療的男性精液標(biāo)本262例，按照男方年齡分為3組。<35歲組（n=95）、35～39歲組（n=85）、≥40（n=82）， 我們對(duì)其進(jìn)行精液分析以及精子DNA損傷檢測，并分析宮腔內(nèi)人工授精（IUI）妊娠結(jié)局及和出生后代指標(biāo)的影響。結(jié)果： 3組精液量、精子濃度、精子活力差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P> 0. 05）；<35歲組的正常形態(tài)率和DNA碎片率與35～39歲組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P> 0. 05）。但是≥40歲組和<35歲組與35～39歲組相比，精子的正常形態(tài)率明顯降低、DNA碎片率明顯增高。有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0. 05）。3組組周期臨床妊娠率、后代出生體重、雙胎周期臨床妊娠率、男嬰比例、出生缺陷率兩兩比較后顯示無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P>0.05）。而男方年齡≥40歲組患者的流產(chǎn)率與男方年齡<35歲及35～39歲組相比明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0. 05）。結(jié)論： 男性年齡增加可能導(dǎo)致精子正常形態(tài)率降低，精子DNA損傷率增加。男性年齡和宮腔內(nèi)人工授精（IUI）周期臨床妊娠率及出生后代指標(biāo)之間沒有明顯的相關(guān)性。而男性年齡對(duì) IUI流產(chǎn)率有一定影響。在生育過程中，男性年齡應(yīng)引起關(guān)注。

【關(guān)鍵詞】男性年齡； 宮腔內(nèi)人工授精； 周期臨床妊娠率

【中圖分類號(hào)】R321. 1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1005-0019（2018）15-0-02

據(jù)統(tǒng)計(jì)，近20%的夫婦患有不孕癥，隨著生育年齡的推遲以及全面二胎的放開，更多高齡的夫婦加入生育的行列。母親年齡對(duì)輔助生殖技術(shù)成功率存在不利影響已是共識(shí)，但是男性年齡對(duì)精子質(zhì)量及其宮腔內(nèi)人工授精臨床結(jié)局影響的研究，其影響作用也是不可忽略的，且存在爭議。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象 選擇在濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生殖中心宮腔內(nèi)人工授精（IUI）治療的不同年齡男性患者262例，按男方年齡分為3組，<35歲組（n=95）、35～39歲組（n=85）、≥40（n=82）， 我們對(duì)其進(jìn)行精液分析以及精子DNA損傷檢測，并分析宮腔內(nèi)人工授精（IUI）妊娠結(jié)局及和出生后代指標(biāo)的影響。

所有患者均排除有煙酒嗜好、遺傳性疾病、傳染性疾病，無接觸X射線及無氰化物 、苯類 、二氧化硫等有毒物接觸史和接受放、化療患者，為減少女方因素對(duì)結(jié)果的影響，我們規(guī)定女方年齡在35歲及以下，繼發(fā)不孕，不孕年限為1.5～3年，且第一次行宮腔內(nèi)人工授精（IUI），沒有其他相關(guān)婦科病史和盆腔手術(shù)史。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 （1）計(jì)算機(jī)輔助精子分析（CASA）： 采用計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀（西班牙， SCA）檢測精子密度、總數(shù)、各級(jí)運(yùn)動(dòng)精子百分率和數(shù)量等。（2）精子形態(tài)學(xué)分析（Diff-Quik法）： 檢測精子形態(tài)正常率=畸形精子數(shù)/計(jì)數(shù)精子總數(shù)×100%（3）精子DNA 碎片率 采用深圳市博銳德生物科技有限公司產(chǎn)品試劑盒檢測精子DNA 碎片率。

1.2.2 宮腔內(nèi)人工授精（IUI）周期選擇①自然周期用于月經(jīng)規(guī)律、有排卵的患者，自月經(jīng)周期第10～12天開始陰道超聲監(jiān)測卵泡發(fā)育于 IUI 術(shù)后 14 d 檢測女方尿液及血液 hCG 水平，以孕 7 周 B 超檢查見孕囊者為臨床妊娠。

2 結(jié)果

2.1 各年齡組患者精夜質(zhì)量及臨床治療結(jié)局比較

各組精液量、精液參數(shù)中，精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子率（PR）、精子存活率、各組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。<35歲組與35～39歲組的正常形態(tài)率、DNA碎片率、差異無顯著性差異（P> 0. 05）。但是≥40歲組的正常形態(tài)率和<35歲組與35～39歲組相比明顯降低，≥40歲組的正常形態(tài)率和<35歲組與35～39歲組相比DNA碎片率明顯增高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0. 05）。

各年齡組：<35歲組（n=95）、35～39歲組（n=85）、≥40（n=82），患者周期臨床妊娠率指標(biāo)兩兩比較后顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而男方年齡≥40歲組患者的流產(chǎn)率與男方年齡<35歲組、35～39歲組相比明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P<0. 05）。

討論

研究發(fā)現(xiàn)隨著男性年齡增大，精子畸形率，DNA 碎片率隨之升高。也照燕等[1]認(rèn)為精裝中ROS水平隨年齡的增加逐漸增加，尤其在40歲后增加更加明顯。精液中的ROS和精子抗氧化能力在生理狀態(tài)下是保持平衡點(diǎn)，當(dāng)這種平衡被打破，氧化應(yīng)激將會(huì)發(fā)生[2]。從而影響精子功能[3-4]，DNA碎片以及畸形精子的數(shù)量隨著年齡的增長而增加。

男性年齡對(duì)精子質(zhì)量及其宮腔內(nèi)人工授精臨床結(jié)局影響的研究較少，且存在爭議[5-7]。但是他們大多數(shù)研究并未對(duì)女性因素進(jìn)行嚴(yán)格篩查。為了更準(zhǔn)確評(píng)估男性年齡對(duì)精子質(zhì)量及其宮腔內(nèi)人工授精臨床結(jié)局影響，我們對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行嚴(yán)格篩查，我們研究發(fā)現(xiàn)：認(rèn)為隨著男性年齡增大，精子畸形率，DNA 碎片率隨之升高，增加了在精卵結(jié)合及胚胎發(fā)生當(dāng)中染色體異常和基因缺陷的可能性，從而提高了胚胎停育、早產(chǎn)及出生缺陷發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。最終會(huì)導(dǎo)致周期臨床妊娠率降低以及流產(chǎn)率升高[8]。

綜上所述，男性年齡對(duì)精子正常形態(tài)、精子DNA損傷及IUI流產(chǎn)率有一定影響。在做輔助生殖治療時(shí)，人們也必須關(guān)注男性的年齡。

參考文獻(xiàn)

也照燕，吳海峰，張娜等.男性年齡對(duì)精子氧化應(yīng)激水平、核DNA損傷的影響，中國計(jì)劃生育學(xué)雜志，2012，1（20）30-2

Chavkin DE，Molinaro TA，Roe AH.et al.Donor sperm insemination cycles：are two inseminations better than one？ J Androl.2012 May-Jun；33（3）：375-80.

0WS，Chen H，Chow PH.Male genital tract antioxidant enzymes —their abilityto preserve sperm DNA integrity.Mol Cell Endocrino，2006，250（1 -2）：80-83.

Potts RJt Notarianni LJ，Jefferies TM.Seminal plasma reduces exogenous oxidative damage to human sperm，determined by the measurement of DNA strand breaks and lipid peroxidation.Mutat Res，2000 447（2）：249.

程艽、張莉嘉，蘇慧.男性不育相關(guān)因素對(duì)夫精人工授精周期臨床妊娠率的影響[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2011，（03）：99-102.

Ni W，Xiao S，Qiu X，et al.Effect of sperm DNA fragmentation on clinical outcome of frozen-thawed embryo transfer and on blastocystformation[J].PLoS One，2014，9（ 4）：e94956.

BellverJ，Garrido N，Remohi J.Influence of paternal age on assisted reproductionoutcome.Reprod Biomed Online.2008 Nov； 17（5）：595-604.

商學(xué)軍，陳亮，夏欣一，劉德風(fēng)，等.男性生殖遺傳學(xué)檢查專家共識(shí)[J].中華男科學(xué)雜志，2015，21（ 12）：1138-1142