李曉曉 李志瑜

淺部真菌病是指皮膚、指(趾)甲和毛發(fā)發(fā)生的真菌感染，是臨床最常見的真菌病，也是皮膚科門診常見感染性疾病。為了解我院淺部真菌病的發(fā)病情況及其鏡檢的檢出結果，我們對2016年1月至2017年12月在我院皮膚科門診擬診淺部真菌病而進行真菌直接鏡檢的數(shù)據(jù)分析，以便更好地掌握本地區(qū)淺部真菌病發(fā)病情況從而進行防治。

1 病例資料與方法

1.1 病例資料 收集2016年1月至2017年12月我院門診擬診淺部真菌病患者的臨床標本15418例進行真菌直接鏡檢，其中鏡檢陽性患者共7366例，男4232例，女3134例，年齡0～93歲，平均36.5歲。

1.2 標本采集與真菌鏡檢 提取擬診淺部真菌病患者的皮屑、甲屑、毛發(fā)進行檢測。標本采集時使用一次性無菌手術刀片，固定取材部位，刀片傾斜輕刮[1]。

將標本置于載玻片中間，滴一滴10%KOH，加蓋玻片，酒精燈加熱促進角質溶解，注意避免過度加熱沸騰，輕壓蓋玻片，驅除氣泡，用棉簽吸除周圍溢出液，置光學顯微鏡下觀察，先用低倍鏡查找菌絲或/和孢子，再用高倍鏡確認；毛囊炎標本火焰固定后滴2～3滴結晶紫染液搖勻流水沖洗后用紙壓干，油鏡下觀察。直接涂片標本查找到菌絲/和孢子為陽性，毛囊炎標本油鏡下觀察有成簇孢子或芽生孢子為陽性結果；陰性結果需再次取材復查，若患處已使用抗真菌藥物，則建議停藥一周后再次取材鏡檢。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對資料進行χ2檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學意義，P<0.01為有顯著統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2016至2017年皮膚科門診淺部真菌病發(fā)病情況 見表1。

2.2 皮膚科門診各種淺部真菌病在不同年齡段的分布差異 見表2。

2.2 皮膚科門診常見淺部真菌病發(fā)病情況與性別的關系 見表3。

2.4 皮膚科門診常見淺部真菌病發(fā)病情況與季節(jié)的關系 見表4。

3 討論

近年來，隨著人們生活水平提高、患者就醫(yī)意識增強和醫(yī)院診斷技術進步，淺部真菌病發(fā)病率有上升趨勢，真菌引起的疾病占皮膚科門診患者的1/4以上[2]，全球范圍內患病率為20%～25%[3]。淺部真菌病的發(fā)病情況存在地區(qū)差異，了解其病種和發(fā)病規(guī)律

表1 2016年至2017年常見淺部真菌病的鏡檢情況 (n，%)

經(jīng)χ2檢驗，2016年與2017年門診淺部真菌病及股癬的鏡檢陽性率差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.001)，2017年低于2016年；頭癬的鏡檢陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P=0.042)，2017年低于2016年對臨床開展防治工作具有指導意義。

表2 各種淺部真菌病鏡檢陽性率在不同年齡段的分布差異 %

經(jīng)χ2檢驗，淺部真菌病及甲真菌病、手癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)、足癬(P=0.002)、體癬(P=0.004)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異有顯著統(tǒng)計學意義，股癬(P=0.046)、念珠菌陰道炎(P=0.039)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異有統(tǒng)計學意義，而念珠菌包皮龜頭炎(P=0.081)及頭癬(P=0.057)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異無統(tǒng)計學意義

表3 常見淺部真菌病發(fā)病情況與性別的關系 %

經(jīng)χ2檢驗，淺部真菌病及甲真菌病、手癬、足癬、股癬、生殖器念珠菌病、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)、花斑癬(P=0.006)的鏡檢陽性率在不同性別中差異均有顯著統(tǒng)計學意義，體癬(P=0.016)的鏡檢陽性率在不同性別中差異有統(tǒng)計學意義，頭癬(P=0.317)的鏡檢陽性率在不同性別中差異無統(tǒng)計學意義

表4 常見淺部真菌病發(fā)病情況與季節(jié)的關系 (n，%)

經(jīng)χ2檢驗，足癬、股癬、體癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)不同季節(jié)鏡檢陽性率差異有顯著統(tǒng)計學意義，甲真菌病(P=0.224)、手癬(P=0.452)、念珠菌包皮龜頭炎(P=0.117)、念珠菌陰道炎(P=0.266)、頭癬(P=0.786)不同季節(jié)鏡檢陽性率差異無統(tǒng)計學意義

本文分析了南京鼓樓醫(yī)院皮膚科門診淺部真菌病鏡檢陽性患者7366例，鏡檢總陽性率47.78%，低于張欠欠等[4,5]研究。有研究表明鏡檢陽性率低于培養(yǎng)陽性率，其假陰性率14.77%[6]，本文因實驗室條件有限，無法進行真菌培養(yǎng)，僅進行鏡檢，結果易受多方面影響，患處含菌少或已用藥、取材不佳、檢驗者操作技術均可致假陰性。真菌鏡檢熒光染色一步法正在我院皮膚科實驗室試用，該法通過特殊熒光素與真菌細胞壁上的β-葡聚糖或幾丁質結合，熒光顯微鏡下菌絲及孢子發(fā)出亮藍色熒光，與黑暗背景形成明顯反差，可減少KOH濕片法因背景雜亂、主觀判斷而造成的誤差，從而提高鏡檢陽性率[7]。一步法染液中含KOH，較兩步法更方便，無需加熱，反應僅數(shù)十秒。熒光染色法也能標記纖維素，但纖維形態(tài)不規(guī)則、無立體感，憑經(jīng)驗即可辨別[8]。其次，熒光染色法較KOH濕片法更容易辨認真菌孢子，提高了花斑癬等馬拉色菌相關性皮膚病的病原菌檢測。對于濕片法陰性而臨床高度懷疑真菌感染的標本可再次進行熒光染色，如油脂、護膚品等雜質較多的標本、難治性手足癬、甲真菌病等。

研究發(fā)現(xiàn)，甲真菌病、股癬、足癬、花斑癬為我院門診淺部真菌病的優(yōu)勢病種，與廣東[9]、上海[10]類似，與延安[4]、溫州[5]、廣西[11]有差異，顯示不同地區(qū)淺部真菌病分布差異，可能與地域氣候、生活衛(wèi)生習慣、研究病例數(shù)、研究時間等有關。

淺部真菌病鏡檢陽性患者(7366例)中男4232例，女3134例，除頭癬外，不同性別淺部真菌病病種分布有明顯差異。男性以股癬、體癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎和手癬為主，可能由于其汗腺皮脂分泌旺盛、局部長期潮濕不透氣所致；女性以甲真菌病為主，推測女性重視甲的外觀，從而及時就診，導致其甲真菌病增多[10]。淺部真菌病鏡檢陽性患者多為20～39歲中青年，系其生理功能旺盛、多集體生活、衛(wèi)生習慣不良等因素所致[4,5]。手癬在20～39、40～59歲均較多，考慮其發(fā)生與職業(yè)及日常生活有一定的相關性[12]，長期浸水或接觸洗滌劑的人群(經(jīng)常做家務、從事餐飲行業(yè)等)角質易受損，導致真菌感染；建筑工人、農民等體力勞動者雙手經(jīng)常接觸水泥、化肥等物質，易受外傷從而導致手癬的發(fā)生。手癬鏡檢陽性率低，手多暴露于外界，角質層厚，較難采集到含菌量足夠的皮損，直接鏡檢易漏診。足癬、股癬、體癬、花斑癬及馬拉色菌毛囊炎隨季節(jié)變化鏡檢陽性率差異有統(tǒng)計學意義，淺部真菌病多發(fā)于春、夏季，與該季節(jié)溫度高、濕度大有利于真菌生長繁殖有關。

綜上所述，南京鼓樓醫(yī)院皮膚科淺部真菌病分布大體符合國內真菌流行病學趨勢，具南方地域特點。真菌直接鏡檢法診斷淺部真菌病簡便、經(jīng)濟，適合在臨床上應用和推廣，熒光染色法是一種快速有效檢測真菌的新方法，但熒光染色液價格昂貴，推廣仍有一定難度。直接鏡檢法雖有一定假陰性，但可在臨床高度懷疑真菌感染時重復鏡檢或進行熒光染色鏡檢，提高鏡檢陽性率，為皮膚科醫(yī)生診斷淺部真菌病提供幫助。