李曉曉 李志瑜

淺部真菌病是指皮膚、指(趾)甲和毛發(fā)發(fā)生的真菌感染，是臨床最常見的真菌病，也是皮膚科門診常見感染性疾病。為了解我院淺部真菌病的發(fā)病情況及其鏡檢的檢出結(jié)果，我們對(duì)2016年1月至2017年12月在我院皮膚科門診擬診淺部真菌病而進(jìn)行真菌直接鏡檢的數(shù)據(jù)分析，以便更好地掌握本地區(qū)淺部真菌病發(fā)病情況從而進(jìn)行防治。

1 病例資料與方法

1.1 病例資料 收集2016年1月至2017年12月我院門診擬診淺部真菌病患者的臨床標(biāo)本15418例進(jìn)行真菌直接鏡檢，其中鏡檢陽性患者共7366例，男4232例，女3134例，年齡0～93歲，平均36.5歲。

1.2 標(biāo)本采集與真菌鏡檢 提取擬診淺部真菌病患者的皮屑、甲屑、毛發(fā)進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)本采集時(shí)使用一次性無菌手術(shù)刀片，固定取材部位，刀片傾斜輕刮[1]。

將標(biāo)本置于載玻片中間，滴一滴10%KOH，加蓋玻片，酒精燈加熱促進(jìn)角質(zhì)溶解，注意避免過度加熱沸騰，輕壓蓋玻片，驅(qū)除氣泡，用棉簽吸除周圍溢出液，置光學(xué)顯微鏡下觀察，先用低倍鏡查找菌絲或/和孢子，再用高倍鏡確認(rèn)；毛囊炎標(biāo)本火焰固定后滴2～3滴結(jié)晶紫染液搖勻流水沖洗后用紙壓干，油鏡下觀察。直接涂片標(biāo)本查找到菌絲/和孢子為陽性，毛囊炎標(biāo)本油鏡下觀察有成簇孢子或芽生孢子為陽性結(jié)果；陰性結(jié)果需再次取材復(fù)查，若患處已使用抗真菌藥物，則建議停藥一周后再次取材鏡檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)資料進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2016至2017年皮膚科門診淺部真菌病發(fā)病情況 見表1。

2.2 皮膚科門診各種淺部真菌病在不同年齡段的分布差異 見表2。

2.2 皮膚科門診常見淺部真菌病發(fā)病情況與性別的關(guān)系 見表3。

2.4 皮膚科門診常見淺部真菌病發(fā)病情況與季節(jié)的關(guān)系 見表4。

3 討論

近年來，隨著人們生活水平提高、患者就醫(yī)意識(shí)增強(qiáng)和醫(yī)院診斷技術(shù)進(jìn)步，淺部真菌病發(fā)病率有上升趨勢(shì)，真菌引起的疾病占皮膚科門診患者的1/4以上[2]，全球范圍內(nèi)患病率為20%～25%[3]。淺部真菌病的發(fā)病情況存在地區(qū)差異，了解其病種和發(fā)病規(guī)律

表1 2016年至2017年常見淺部真菌病的鏡檢情況 (n，%)

經(jīng)χ2檢驗(yàn)，2016年與2017年門診淺部真菌病及股癬的鏡檢陽性率差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，2017年低于2016年；頭癬的鏡檢陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.042)，2017年低于2016年對(duì)臨床開展防治工作具有指導(dǎo)意義。

表2 各種淺部真菌病鏡檢陽性率在不同年齡段的分布差異 %

經(jīng)χ2檢驗(yàn)，淺部真菌病及甲真菌病、手癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)、足癬(P=0.002)、體癬(P=0.004)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，股癬(P=0.046)、念珠菌陰道炎(P=0.039)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而念珠菌包皮龜頭炎(P=0.081)及頭癬(P=0.057)的鏡檢陽性率在不同年齡段差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表3 常見淺部真菌病發(fā)病情況與性別的關(guān)系 %

經(jīng)χ2檢驗(yàn)，淺部真菌病及甲真菌病、手癬、足癬、股癬、生殖器念珠菌病、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)、花斑癬(P=0.006)的鏡檢陽性率在不同性別中差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，體癬(P=0.016)的鏡檢陽性率在不同性別中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，頭癬(P=0.317)的鏡檢陽性率在不同性別中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表4 常見淺部真菌病發(fā)病情況與季節(jié)的關(guān)系 (n，%)

經(jīng)χ2檢驗(yàn)，足癬、股癬、體癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎(均P<0.001)不同季節(jié)鏡檢陽性率差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，甲真菌病(P=0.224)、手癬(P=0.452)、念珠菌包皮龜頭炎(P=0.117)、念珠菌陰道炎(P=0.266)、頭癬(P=0.786)不同季節(jié)鏡檢陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

本文分析了南京鼓樓醫(yī)院皮膚科門診淺部真菌病鏡檢陽性患者7366例，鏡檢總陽性率47.78%，低于張欠欠等[4,5]研究。有研究表明鏡檢陽性率低于培養(yǎng)陽性率，其假陰性率14.77%[6]，本文因?qū)嶒?yàn)室條件有限，無法進(jìn)行真菌培養(yǎng)，僅進(jìn)行鏡檢，結(jié)果易受多方面影響，患處含菌少或已用藥、取材不佳、檢驗(yàn)者操作技術(shù)均可致假陰性。真菌鏡檢熒光染色一步法正在我院皮膚科實(shí)驗(yàn)室試用，該法通過特殊熒光素與真菌細(xì)胞壁上的β-葡聚糖或幾丁質(zhì)結(jié)合，熒光顯微鏡下菌絲及孢子發(fā)出亮藍(lán)色熒光，與黑暗背景形成明顯反差，可減少KOH濕片法因背景雜亂、主觀判斷而造成的誤差，從而提高鏡檢陽性率[7]。一步法染液中含KOH，較兩步法更方便，無需加熱，反應(yīng)僅數(shù)十秒。熒光染色法也能標(biāo)記纖維素，但纖維形態(tài)不規(guī)則、無立體感，憑經(jīng)驗(yàn)即可辨別[8]。其次，熒光染色法較KOH濕片法更容易辨認(rèn)真菌孢子，提高了花斑癬等馬拉色菌相關(guān)性皮膚病的病原菌檢測(cè)。對(duì)于濕片法陰性而臨床高度懷疑真菌感染的標(biāo)本可再次進(jìn)行熒光染色，如油脂、護(hù)膚品等雜質(zhì)較多的標(biāo)本、難治性手足癬、甲真菌病等。

研究發(fā)現(xiàn)，甲真菌病、股癬、足癬、花斑癬為我院門診淺部真菌病的優(yōu)勢(shì)病種，與廣東[9]、上海[10]類似，與延安[4]、溫州[5]、廣西[11]有差異，顯示不同地區(qū)淺部真菌病分布差異，可能與地域氣候、生活衛(wèi)生習(xí)慣、研究病例數(shù)、研究時(shí)間等有關(guān)。

淺部真菌病鏡檢陽性患者(7366例)中男4232例，女3134例，除頭癬外，不同性別淺部真菌病病種分布有明顯差異。男性以股癬、體癬、花斑癬、馬拉色菌毛囊炎和手癬為主，可能由于其汗腺皮脂分泌旺盛、局部長期潮濕不透氣所致；女性以甲真菌病為主，推測(cè)女性重視甲的外觀，從而及時(shí)就診，導(dǎo)致其甲真菌病增多[10]。淺部真菌病鏡檢陽性患者多為20～39歲中青年，系其生理功能旺盛、多集體生活、衛(wèi)生習(xí)慣不良等因素所致[4,5]。手癬在20～39、40～59歲均較多，考慮其發(fā)生與職業(yè)及日常生活有一定的相關(guān)性[12]，長期浸水或接觸洗滌劑的人群(經(jīng)常做家務(wù)、從事餐飲行業(yè)等)角質(zhì)易受損，導(dǎo)致真菌感染；建筑工人、農(nóng)民等體力勞動(dòng)者雙手經(jīng)常接觸水泥、化肥等物質(zhì)，易受外傷從而導(dǎo)致手癬的發(fā)生。手癬鏡檢陽性率低，手多暴露于外界，角質(zhì)層厚，較難采集到含菌量足夠的皮損，直接鏡檢易漏診。足癬、股癬、體癬、花斑癬及馬拉色菌毛囊炎隨季節(jié)變化鏡檢陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，淺部真菌病多發(fā)于春、夏季，與該季節(jié)溫度高、濕度大有利于真菌生長繁殖有關(guān)。

綜上所述，南京鼓樓醫(yī)院皮膚科淺部真菌病分布大體符合國內(nèi)真菌流行病學(xué)趨勢(shì)，具南方地域特點(diǎn)。真菌直接鏡檢法診斷淺部真菌病簡便、經(jīng)濟(jì)，適合在臨床上應(yīng)用和推廣，熒光染色法是一種快速有效檢測(cè)真菌的新方法，但熒光染色液價(jià)格昂貴，推廣仍有一定難度。直接鏡檢法雖有一定假陰性，但可在臨床高度懷疑真菌感染時(shí)重復(fù)鏡檢或進(jìn)行熒光染色鏡檢，提高鏡檢陽性率，為皮膚科醫(yī)生診斷淺部真菌病提供幫助。