李 龍， 劉鎖珠， 王宏輝， 張振倉(cāng)

(1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程分院，陜西楊凌 712100； 2.西藏農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，西藏林芝 860000

目前西藏養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展迅速，盡管西藏本地的藏雞能很好地適應(yīng)高海拔缺氧環(huán)境[1]，但其生長(zhǎng)仍緩慢，很難滿(mǎn)足當(dāng)?shù)厝找嬖鲩L(zhǎng)的禽肉需求量。因此，當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶(hù)開(kāi)始引進(jìn)內(nèi)地生長(zhǎng)速度更快的肉雞品種，但是這些引入品種不能很好地適應(yīng)高海拔地區(qū)的缺氧環(huán)境，使肉雞在缺氧條件下表現(xiàn)出生產(chǎn)性能降低和死亡率高(特別是腹水死亡率)的特點(diǎn)[2]。如何有效地緩解缺氧對(duì)肉雞飼養(yǎng)的負(fù)面影響已成為當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶(hù)重點(diǎn)關(guān)心的問(wèn)題。

紅景天主要分布于歐亞的高海拔地區(qū)，在我國(guó)青藏高原廣泛分布。紅景天根莖中含有大量活性成分，如酚酸類(lèi)、三萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、類(lèi)苯脂類(lèi)和苯丙脂類(lèi)，其中紅景天苷、羅塞維和酪醇被認(rèn)為是紅景天中3種主要的活性成分[3-4]。紅景天因其抗缺氧[5]、抗氧化[6]、抗抑郁[7]、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫機(jī)能[8]和增強(qiáng)機(jī)體適應(yīng)性[9]等生理功能已在人類(lèi)醫(yī)藥中廣泛應(yīng)用。筆者所在課題組前期研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加紅景天對(duì)缺氧條件下肉雞生產(chǎn)性能無(wú)影響，但低劑量的紅景天粉(0.5%)能夠降低肉雞非腹水死亡率、提高肉雞的抗氧化能力和免疫力，而高劑量紅景天粉會(huì)減少肉雞的采食量從而降低肉雞的生產(chǎn)性能，并且紅景天粉對(duì)肉雞的腹水敏感性無(wú)顯著影響[1，10-11]，但結(jié)果并不能說(shuō)明添加紅景天對(duì)肉雞腹水癥就沒(méi)有影響，因?yàn)橹胁菟幊煞謴?fù)雜，藥效相對(duì)比較慢，且試驗(yàn)中所添加紅景天粉的計(jì)量不高，可能會(huì)造成其中有效含量太少而沒(méi)有對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和腹水癥產(chǎn)生顯著的影響。因此，本試驗(yàn)在肉雞飼料中添加紅景天水提物，提高飼料中紅景天有效活性成分含量，進(jìn)一步研究紅景天提取物對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和腹水敏感性的影響。

1 材料與方法

1.1 紅景天水提物制備

紅景天，來(lái)自于西藏農(nóng)牧學(xué)院校內(nèi)人工種植，經(jīng)本校相關(guān)專(zhuān)家鑒定為大花紅景天。取紅景天干燥根部用蒸餾水清洗根部泥土，在陰涼處風(fēng)干，用粉碎機(jī)將紅景天制成粉末，按質(zhì)量體積比為1 ∶5(W/V)加入蒸餾水，室溫放置24 h(冷滲法)以獲得紅景天水提物，將上層液體轉(zhuǎn)入另一容器中，殘?jiān)貜?fù)上述操作4次。將所有紅景天水提物混合并用紗布過(guò)濾，8 000 r/min 離心2 min，取上清。上清利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行干燥處理，結(jié)果顯示1 g大花紅景天根部可以生產(chǎn)約0.18 g紅景天水提物粉末。通過(guò)液相色譜檢測(cè)提取物中紅景天苷、絡(luò)塞維、酪醇的含量分別為25.21、10.44、0.03 mg/g。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用1日齡AA雄性肉仔雞900羽(Ozkan等研究表明雄性肉仔雞的腹水敏感性高于雌性[12]，因此本試驗(yàn)全部選用雄性肉仔雞以更好地建立肉雞腹水癥模型)，隨機(jī)分5個(gè)日糧處理組，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30羽，進(jìn)行為期42 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)所用肉仔雞出雛當(dāng)日從成都空運(yùn)至西藏林芝。試驗(yàn)期飼料全部使用商品肉雞全價(jià)配合飼料(購(gòu)于新希望有限責(zé)任公司)。5種日糧分別是在基礎(chǔ)日糧中添加0(對(duì)照組，CK)、0.10%、0.15%、0.20%、0.40%的紅景天水提物干粉。

1.3 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)于2017年5—7月在西藏林芝西藏農(nóng)牧學(xué)院教學(xué)實(shí)習(xí)基地(海拔高度2 896 m)進(jìn)行，所有雞只飼養(yǎng)在3層雞籠內(nèi)，每個(gè)處理6個(gè)雞籠，每個(gè)雞籠30羽雞。第1周育雛溫度約為35.5 ℃，后逐漸降低，3周后禽舍溫度控制在約 25 ℃。第1周24 h照明，從第2周起每天保持恒定光照時(shí)間(23 h照明，1 h熄燈)，自由采食和飲水，免疫和消毒按常規(guī)程序進(jìn)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生產(chǎn)性能 在試驗(yàn)1、7、14、21、28、35、42 d時(shí)稱(chēng)取各重復(fù)雞空腹體質(zhì)量，并記錄上述不同生長(zhǎng)階段的耗料量，計(jì)算各組雞的平均日增質(zhì)量(ADG)、平均日采食量(ADFI)和飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)。

1.4.2 死亡率 試驗(yàn)期間每天記錄發(fā)病、死亡雞只，并對(duì)死雞逐個(gè)剖檢確定死因。如出現(xiàn)腹腔有淺黃色或黃色膠凍狀液體、心包積水、右心室肥大(右心指數(shù)>0.29)等癥狀判定為腹水死亡，未發(fā)現(xiàn)此類(lèi)癥狀判定為非腹水死亡。

1.5 血液指標(biāo)和心臟指數(shù)

在試驗(yàn)期14、28、42 d清晨空腹每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選2羽雞，稱(chēng)質(zhì)量，后心臟采血屠宰。血液指標(biāo)(紅細(xì)胞數(shù)RBC、血紅蛋白濃度HGB和紅細(xì)胞壓積HGT)利用全自動(dòng)血液分析儀(XFA6000，普朗)測(cè)定。

屠宰雞完整取出心臟后，剪除附著的脂肪組織并清除心腔內(nèi)的血凝塊，右心指數(shù)(右心室質(zhì)量/總心室質(zhì)量)和心室指數(shù)(總心室質(zhì)量/100 g體質(zhì)量)按照Hassanpour等方法[13]進(jìn)行稱(chēng)量和計(jì)算。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0軟件的one-way ANOVA進(jìn)行單因素方差分析，D’ancan法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅景天提取物對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

飼料中添加紅景天提取物對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響，由表1可知，0～14日齡時(shí)添加0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他處理組顯著提高平均日增質(zhì)量(P<0.05)。在15～28日齡階段、29～42日齡階段和整個(gè)飼養(yǎng)期(0～42 d)時(shí)，添加0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他處理組明顯提高了平均日增質(zhì)量(P<0.05)和平均日采食量，并且0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著提高了 42 d 的肉雞體質(zhì)量(P<0.05)。但在整個(gè)飼養(yǎng)期，各處理組之間飼料轉(zhuǎn)化率無(wú)顯著差異。

表1 紅景天提取物對(duì)高原缺氧條件下肉雞生產(chǎn)性能的影響

注：數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示同列數(shù)據(jù)差異顯著(P<0.05)。下表同。

2.2 紅景天提取物對(duì)肉雞死亡率的影響

由圖1-A可知，相比于對(duì)照組和0.10%處理組，0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著降低肉雞非腹水死亡率(P<0.05)。由圖1-B可知，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組腹水死亡率相比于其他3個(gè)處理組顯著降低(P<0.05)。

2.3 紅景天提取物對(duì)肉雞心臟指數(shù)和血液指標(biāo)的影響

由表2可知，在14、28 d時(shí)，相比于對(duì)照組，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組顯著提高了肉雞血液紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞壓積(P<0.05)，而0.10%、0.15%紅景天提取物處理組與對(duì)照組各項(xiàng)測(cè)定指標(biāo)均無(wú)顯著差異。在42 d時(shí)，相比于對(duì)照組，0.10%、0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組均顯著提高了肉雞血液紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白濃度和紅細(xì)胞壓積(P<0.05)，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組相比于其他3個(gè)處理組顯著降低了右心指數(shù)(P<0.05)。

表2 紅景天提取物對(duì)高原缺氧條件下血液指標(biāo)和心臟指數(shù)的影響

3 結(jié)論與討論

高原地區(qū)伴隨著氧分壓的降低和吸入氧氣的減少，氧分壓的降低會(huì)造成動(dòng)物機(jī)體體質(zhì)量降低[14-15]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，盡管飼喂?fàn)I養(yǎng)成分滿(mǎn)足肉雞需要的商品飼料，對(duì)照組肉雞與NRC給出的雄性AA肉雞標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)性能[16]仍表現(xiàn)出很大的差距，這與Li等的研究結(jié)果[2]一致。缺氧環(huán)境是造成機(jī)體體質(zhì)量降低的原因，這與食欲降低、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收不良、腸道發(fā)育受阻、能量消耗增加和水分損失增加等因素有關(guān)[17-18]，其中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入的減少是主要因素[19]。本研究也同樣發(fā)現(xiàn)相比于NRC給出的AA肉雞標(biāo)準(zhǔn)采食量(3 717 g)，對(duì)照組的采食量明顯降低。相比于對(duì)照組，飼料中添加0.20%、0.40%紅景天提取物明顯提高了肉雞的生產(chǎn)性能，但0.10%、0.15%紅景天提取物對(duì)肉雞的生產(chǎn)性能無(wú)顯著影響。已有大量研究表明，紅景天能夠提高機(jī)體對(duì)應(yīng)激環(huán)境(包括缺氧應(yīng)激)的適應(yīng)性， 而其中增加機(jī)體缺氧適應(yīng)性的一個(gè)重要原因是紅景天能夠通過(guò)降低轉(zhuǎn)錄因子HIF-α降解，從而促進(jìn)促紅細(xì)胞生成素表達(dá)，最終增加紅細(xì)胞的生成[20-21]。本研究同樣發(fā)現(xiàn)飼料中添加紅景天提取物能夠增加肉雞紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯提高了14、28、42 d肉雞紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，提高了肉雞的缺氧耐受性，最終提高了肉雞的生產(chǎn)性能。0.10%、0.15%處理組只在42 d提高了肉雞紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白濃度，但可能由于這2個(gè)紅景天提取物處理下飼料中活性成分過(guò)低，發(fā)揮作用過(guò)慢，從而對(duì)肉雞的生產(chǎn)性能無(wú)顯著影響。

肉雞育種造成心肺功能發(fā)育過(guò)緩遺傳缺陷，使肉雞易受缺氧的影響，而高原地區(qū)肉雞的飼養(yǎng)容易引起腹水癥的發(fā)生[22]，因此本研究將肉雞的死亡率分為腹水死亡和非腹水死亡。本研究發(fā)現(xiàn)0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯降低了肉雞非腹水死亡率的發(fā)生，這可能與紅景天提取物能夠提高機(jī)體抗缺氧能力有關(guān)。已有研究表明，紅景天提取物能夠通過(guò)增加紅細(xì)胞生成和抗氧化等功能提高機(jī)體的缺氧耐受力。同時(shí)本研究還發(fā)現(xiàn)0.15%、0.20%、0.40%紅景天提取物處理組明顯降低了肉雞非腹水死亡率的發(fā)生，這可能與紅景天提取物能夠提高機(jī)體免疫機(jī)能有關(guān)。0.15%紅景天提取物組降低了非腹水死亡率但對(duì)腹水死亡率無(wú)顯著影響，這說(shuō)明紅景天提取物對(duì)肉雞不同生理機(jī)能的影響存在計(jì)量特異性。紅景天提取物成分復(fù)雜，目前從紅景天提取物中已分離出超過(guò)100種的化合物，并且功能多樣[23]，但究竟是哪種化合物在本試驗(yàn)中發(fā)揮主要的生理功能尚不清楚，有待進(jìn)一步的研究。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)日糧中添加紅景天提取物能夠提高高原缺氧環(huán)境下肉雞的生產(chǎn)性能，降低死亡率和腹水敏感性，但存在劑量依賴(lài)性，以0.2%添加效果為最佳。