周立峰 尤春娟 黃帥波

（吉林省正和藥業(yè)集團股份有限公司，吉林通化134001）

0 引言

肝加欣片由五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根、云芝胞內(nèi)糖肽、豬膽粉組成，具有舒肝解郁、清熱利濕的作用，用于治療慢性病毒性肝炎肝郁脾虛證，癥見胸脅脹痛、神疲乏力、食欲不振、煩躁等。該品種為半浸膏片，即由五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根的浸膏與云芝胞內(nèi)糖肽、豬膽粉細粉制粒壓片而成。本文采用正交試驗法，對肝加欣片中五味子的乙醇提取工藝[1]進行優(yōu)選，為該制劑的生產(chǎn)工藝提供依據(jù)。

1 試驗材料

1.1 試驗設(shè)備

實驗室用索氏提取器（上海舍巖儀器有限公司）、實驗室用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（天津星科科技有限公司）、XZB-01型循環(huán)水式多用真空泵（遼寧方泰儀器有限公司）、SY-Z型數(shù)顯水浴鍋（上海晰達儀器有限公司）、電加熱套（上海晰達儀器有限公司）、多功能微型提取濃縮機組（武漢制藥設(shè)備制造有限公司）、YQB系列超音速氣流粉碎機（山東某氣流粉碎機廠）、LY-2型實驗室用槽型混合機（常州某制藥機械有限公司）、YB-30型實驗室用搖擺式顆粒機（常州某制藥機械有限公司）、實驗室用熱風(fēng)循環(huán)烘箱（蘇州某制造有限公司）、XYP-1小型旋轉(zhuǎn)式壓片機（上海某制藥機械廠）、XXB-A實驗型高效包衣機（上海某制藥機械廠）、MB25型快速水分測定儀（上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司）、CS241電子計數(shù)臺秤（上海宏衡實業(yè)有限公司）、GF-300AX萬能粉碎機（江陰某機械制造有限公司）、多功能提取罐（武漢某制藥機械廠）、球形罐（武漢某制藥機械廠）、WZ75型外循環(huán)式真空蒸發(fā)器（武漢某制藥機械廠）、乙醇回收器（武漢某制藥機械廠）、GZHX-22管式真空干燥箱（武漢某制藥機械廠）、JZJ2BE型水環(huán)式羅茨真空泵機組（上海萬經(jīng)泵業(yè)制造有限公司）、CHW-6型槽型混合機（北京某研究所）、YB-99型搖擺式顆粒機（北京某研究所）、GFG120型高效沸騰干燥機（上海某制藥設(shè)備廠）、HD-600型多向運動混合機（溫州某制藥機械設(shè)備廠）、ZPY-136型旋轉(zhuǎn)式壓片機（上海某制藥設(shè)備廠）、BGB-150B型高效包衣機（溫州某制藥機械設(shè)備廠）、DPP-250B型鋁塑包裝機（瑞安某包裝機械廠）、RE5210A（10 L）旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海賢德實驗儀器有限公司）、HH-A型數(shù)顯水浴鍋、電加熱套（上海況勝實業(yè)發(fā)展有限公司）、HTYWS-H型快速水分測定儀（武漢市華天電力自動化有限責(zé)任公司）、RS232接口電子臺秤（江蘇麥莎實業(yè)有限公司）、1/1 000電子天平（深圳市中杰衡器有限公司）、島津LC2010AC型高效液相色譜儀（上海納諾實業(yè)有限公司）、玻璃燒杯（上海達豐玻璃儀器廠）、藥典篩（山東青州市邁德森制藥機械廠）。

1.2 原輔料

原料：五味子、柴胡、棉茵陳、板藍根、云芝多糖、豬膽粉等藥材（安徽省亳州市藥材總公司中藥材公司）。

輔料：淀粉（蘇州德巴化工有限公司），藥用乙醇（南京化學(xué)試劑股份有限公司），白色包衣粉、灰藍色包衣粉（湖南岳陽嘉之源生物科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 因素水平的確定

本試驗選擇提取次數(shù)（A）、提取時間（B）、乙醇濃度（C）、乙醇用量（D）4個影響因素，根據(jù)以往生產(chǎn)的提取工藝經(jīng)驗，本試驗將提取次數(shù)（A）作為固定因素，選擇提取時間（B）、乙醇濃度（C）、乙醇用量（D）3個因素作為變量進行考察。

本試驗采用L9（34）正交試驗法，每次試驗水平為N，即試驗號，其因素水平設(shè)計如表1所示。

2.2 試驗方法與結(jié)果

按照L9（34）正交試驗表安排試驗，以粉碎后的浸膏混合粉中五味子醇甲的百分比含量為考察指標(biāo)，試驗安排及結(jié)果如表2所示，方差分析結(jié)果如表3所示。

從方差分析結(jié)果可知：方差分析各因素兩水平間均無顯著性差異，影響最大的因素為D乙醇用量，3個因素影響主次順序為D＞B＞C。綜合考慮最佳提取工藝為AB2C2D2，即提取3次、提取180 m in、乙醇濃度75%、乙醇用量3倍量。

2.3 驗證試驗

2.3.1 制劑驗證過程

按以上最佳提取工藝，制備3批（批量300 000片）肝加欣片，稱取五味子95.25 kg，經(jīng)萬能粉碎機粗碎成0.2～0.5mm顆粒，裝袋投入醇提罐中，提取3次。第1次：（先浸泡2 h）提取180 m in，75%乙醇3倍量；第2次：提取60 m in，75%乙醇3倍量；第3次：提取60 min，75%乙醇3倍量，提取液備用。按批配方量稱取柴胡、板藍根、棉茵陳投入提取罐中，加水量為藥材量的5倍，常壓回流提取1 h；真空回流提取4 h進行真空濃縮，溫度為60～90℃，真空度為-0.05～-0.09MPa，濃縮到相對密度達1.10～1.14（60℃）備用；將醇提藥液和水提藥液加入到刮板式濃縮器內(nèi)合并濃縮至相對密度達1.3（60℃）；將五味子提取液與板藍根等藥液合并，用球形罐進行濃縮成稠膏（真空度0.04～0.06 MPa，溫度75～80℃）；稠膏相對密度為1.3（60℃），再加入30 kg的淀粉混合后，減壓真空干燥（干燥溫度為60～70℃，真空度為0.075～0.095MPa），干燥8 h后，放涼，稱重，用萬能粉碎機粉碎，過80目篩，放入桶內(nèi)的塑料袋中；用600型多向運動混合機混合30 m in，放入桶內(nèi)的塑料袋中，以30萬片為一批，分兩次制粒。

表1 肝加欣片正交試驗的因素水平

表2 肝加欣片正交試驗安排及結(jié)果

表3 方差分析

稱取每批量肝加欣膏粉的1/2，加入3 kg的云芝胞內(nèi)糖肽和3 kg的豬膽粉，投入濕法混合顆粒機中，干混30 s后緩緩加入60%乙醇3 000m L，快切慢混60 s，投入沸騰干燥機內(nèi)，60～65℃下干燥10m in，下料后用12目旋振篩整粒；兩批的顆粒稱重后投入多向運動混合機中，加總重1.0%的硬脂酸鎂，混合20m in，下料于不銹鋼桶中；在旋轉(zhuǎn)式壓片機10.5mm的淺凹沖膜中進行壓片，轉(zhuǎn)速為30 r/min，壓力適度。每15m in稱量一次片重，用1%的電子天平稱量，分別稱量10片，記錄，片重差異控制在0.35 g（±2%）。片子外觀：硬度適宜，無麻面，無破邊，無裂片，表面光潔。稱取白色包衣粉（為基片重的2.5%）放進不銹鋼桶中，加純化水，濃度為12%，如白色包衣粉2.5 kg，加純化水量為2.5 kg÷（12/100）-2.5 kg（包衣劑用量）=18.3 kg，攪拌45m in，即可噴用。噴漿開始轉(zhuǎn)速可為4 r/min，當(dāng)包上一層后即可改為5～6 r/m in，再增加到8～9 r/m in，噴漿量以不粘片為準(zhǔn)，溫度不可超過45℃。白色漿料用完后包灰藍色漿料（在白色漿料未包完之前即配灰藍色漿料，方法用量同白色），片面要求平滑，顏色均勻，無色差，無污點，美觀。對顆粒含量（按每片五味子乙素計）、每片素片五味子醇甲含量及每片薄膜衣五味子醇甲含量進行檢測，證明提取工藝的實用性。2.3.2 合格標(biāo)準(zhǔn)

每片含五味子醇甲以五味子醇甲計不得少于0.56mg。

2.3.3 檢測結(jié)果對比

每批取樣一次進行樣品檢測，以確認提取工藝的重現(xiàn)性，結(jié)果如表4所示。

表4 各指標(biāo)檢測結(jié)果

檢測結(jié)果表明：顆粒含量、素片含量、薄膜衣片含量等均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，表明優(yōu)選的肝加欣片提取工藝穩(wěn)定可靠。

3 結(jié)語

本研究運用正交試驗法優(yōu)選肝加欣片提取工藝，優(yōu)選的提取工藝操作簡便，切實有效，為提高肝加欣片中五味子醇甲的含量提供了新的提取方法，且經(jīng)驗證該方法可用于實際生產(chǎn)。