羅泰然

（成都七中嘉祥外國語學(xué)校，四川 成都 610023）

銀杏科植物銀杏（Ginkgo biloba L.），又名白果樹，是古老的珍稀樹種，被譽(yù)為地球的“長壽樹”“活化石”。銀杏葉是銀杏的干燥樹葉，黃酮類化合物是其主要的活性成分之一。銀杏葉總黃酮不僅具有潤肺、止痛、平喘等功效[1]，還具有降血脂、抗凝結(jié)、腦保護(hù)等作用[2]，常用于咳嗽、肺虛、心絞痛等疾病的治療，還廣泛運(yùn)用于化妝品和食品添加劑等領(lǐng)域的工業(yè)生產(chǎn)[3]。因此，近年來國內(nèi)學(xué)者對銀杏葉總黃酮的提取工藝進(jìn)行了大量的研究。

1 提取工藝

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，銀杏葉總黃酮提取方法主要有水浸法、酮類提取—氨水沉淀法、乙醇溶劑提取法、負(fù)壓沸騰提取工藝、微波提取工藝、超聲提取工藝等。

1.1 水浸法

閆高穎等[4]用水作為提取溶劑，對銀杏葉總黃酮成分的提取工藝參數(shù)進(jìn)行了考察，并采用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化，得出提取銀杏葉總黃酮的最佳條件為：用26倍量的水在100℃條件下提取3次，每次1 h，該條件下銀杏葉總黃酮的提取率達(dá)0.59%，這種方法可降低生產(chǎn)成本。

1.2 酮類提取—氨水沉淀法

李雨蔚等[5]采用酮類提取—氨水沉淀法，對金葉銀杏落葉中總黃酮成分的提取進(jìn)行了研究，并應(yīng)用響應(yīng)面分析法對其總黃酮的提取條件進(jìn)行了優(yōu)化，得出最佳工藝條件為：液固比13.5 mL/g、丙酮與水的比例為70∶30、提取溫度55℃、提取時(shí)間3 h。鑒于目前我國對于以丙酮—水為提取溶劑的研究報(bào)道較少，此工藝能為銀杏葉總黃酮的提取提供新的思路。

1.3 乙醇溶劑提取法

鮑宇茹等[6]采用乙醇溶劑提取法，對采集于河南工業(yè)大學(xué)校園的銀杏葉中黃酮類物質(zhì)進(jìn)行提取，并通過正交試驗(yàn)得出最佳的提取工藝參數(shù)為：提取溫度80℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)70%、提取時(shí)間120 min、液固比5∶1，該條件下銀杏葉總黃酮提取率為89.8%。

1.4 負(fù)壓沸騰提取工藝

負(fù)壓沸騰提取工藝的原理是溶劑的沸點(diǎn)會隨外界大氣壓的降低而降低，所以在負(fù)壓條件下，可在較低的溫度下使溶液處于沸騰狀態(tài)，然后進(jìn)行提取。周昊等[7]為減少銀杏葉中總黃酮等有效成分的熱分解，采用負(fù)壓沸騰提取工藝，提取采自邳州銀杏葉生產(chǎn)基地的銀杏葉（銀杏黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.80%）中的總黃酮等熱敏性成分，并通過響應(yīng)面分析法優(yōu)化后得出最佳的提取工藝參數(shù)為：乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、提取壓力-0.08 MPa、提取時(shí)間70 min、提取溫度50℃、液固比10 mL/g、提取2次，該條件下銀杏葉總黃酮提取率為93.55%。

1.5 微波提取工藝

微波提取工藝的原理是細(xì)胞吸收微波能后內(nèi)部溫度迅速上升導(dǎo)致細(xì)胞破裂，使細(xì)胞內(nèi)有效成分自由流出，隨后在較低的溫度條件下被萃取、過濾和分離。王衛(wèi)華等[8]為優(yōu)化銀杏葉總黃酮的提取及純化的最佳方法，以采自山東菏澤郊區(qū)的銀杏葉為原料，通過微波提取工藝，以銀杏葉中總黃酮提取液在510 nm所測吸光度為參考指標(biāo)，確定以銀杏葉為原料微波提取總黃酮的最佳工藝條件為：乙醇體積分?jǐn)?shù)80%、料液比1∶40、提取1次、提取時(shí)間1 h，該條件下銀杏葉總黃酮提取率為91.4%。

1.6 超聲提取工藝

申偉培[9]等以銀杏葉中總黃酮醇苷和銀杏內(nèi)酯類成分含量的綜合評分為指標(biāo)，以超聲提取工藝輔以正交設(shè)計(jì)優(yōu)化，得出最佳提取工藝為：用70%乙醇超聲提取1次，每次20 min，超聲提取功率為150 W。崔潤麗等[10]通過正交試驗(yàn)與超聲提取工藝研究銀杏葉中總黃酮類化合物的最佳提取條件，結(jié)果表明，超聲波輔助提取法僅用10 min，其提取效率比乙醇浸提5 h的提取率高出9%，比微波輔助提取工藝高出6.1%。

1.7 酶輔助提取法

張偉等[11]發(fā)現(xiàn)銀杏葉中的黃酮類化合物主要包裹在以纖維素為主構(gòu)成的細(xì)胞壁內(nèi)，溶出存在阻力，影響了提取效果。而纖維素酶是一類復(fù)合酶，可逐級降解纖維素而破壞細(xì)胞壁骨架結(jié)構(gòu)，增加細(xì)胞內(nèi)黃酮類化合物的溶出。張偉等采用纖維素酶輔助提取法，在酶解溫度為45℃、酶處理pH值為4、酶用量為0.3 mg/mL的條件下酶解2 h，銀杏葉總黃酮提取率為2.80%，與未添加纖維素酶相比，總黃酮提取率增加了45.83%。

1.8 超臨界流體CO2萃取法

該萃取法利用超臨界流體替代常規(guī)有機(jī)溶劑來對有效成分進(jìn)行萃取和分離。在超臨界狀態(tài)下的CO2性質(zhì)介于液體和氣體之間，此時(shí)傳質(zhì)能力和溶解性能較好。張玉祥等[12]使用超臨界CO2萃取技術(shù)提取銀杏葉有效成分，發(fā)現(xiàn)其最佳工藝條件為：20 MPa的壓力下，夾帶劑15%，50℃萃取40 min，該條件下所得銀杏葉提取物黃酮含量可達(dá)27%。該方法操作方便，并實(shí)現(xiàn)了萃取和分離過程的一體化。

2 小結(jié)

水浸法具有工藝和設(shè)備簡單、操作方便、產(chǎn)品安全、無環(huán)境污染等特點(diǎn)，但提取效率低、雜質(zhì)含量高、后續(xù)處理復(fù)雜、耗時(shí)長、產(chǎn)品不易保存和干燥。乙醇溶劑提取法具有無毒、安全性高、產(chǎn)品易保存和干燥的特點(diǎn)，但該方法乙醇溶劑用量較大，易燃且回收操作復(fù)雜。酮類提取—氨水沉淀法是有機(jī)溶劑提取法的改進(jìn)，不僅具備了有機(jī)溶劑提取法的優(yōu)點(diǎn)，而且還利用氨水沉淀法提高了提取銀杏葉中總黃酮的產(chǎn)量，所得提取率較高，提取工藝流程獨(dú)特。負(fù)壓沸騰提取工藝可以較好地保護(hù)熱敏性成分且減少淀粉、蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)；微波提取工藝操作簡便、成本低且污染較小，但是這兩種方法的研究不夠系統(tǒng)和深入，且對設(shè)備的要求較高。超聲提取工藝所用儀器簡單，自動化程度極高，便于大規(guī)模生產(chǎn)使用，而且提取時(shí)間短、成本低、提取率高。酶輔助提取法的優(yōu)點(diǎn)在于酶解法專一性強(qiáng)、效率極高，對環(huán)境污染較小，但酶對溫度和pH值要求十分嚴(yán)格，對設(shè)備要求也較高。超臨界流體CO2萃取法不僅節(jié)能、省時(shí)，而且這種低溫、高壓的條件尤為適宜熱不穩(wěn)定和易氧化物質(zhì)的提取，但其投資費(fèi)用較高，目前較難以推廣。

總之，相對于水提法和乙醇提取法等基本提取方法，超聲提取法在銀杏葉總黃酮提取中有著較好的工業(yè)應(yīng)用前景。而負(fù)壓沸騰提取法、酶輔助提取法、超臨界萃取法等新技術(shù)在保護(hù)熱敏性成分、減少環(huán)境污染等方面具有一定的優(yōu)勢，需要進(jìn)行進(jìn)一步、系統(tǒng)的研究，以推廣應(yīng)用。