林 琎，楊 松，慕 衛(wèi),，許樂(lè)園

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院，山東 泰安 271000；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)藥環(huán)境毒理研究中心，山東 泰安 271000)

甲哌鎓，也稱助壯素(mepiquat chloride，MQ)，化學(xué)名稱為1，1-二甲基哌啶鎓氯化物，是一種新型內(nèi)吸性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，可與乙烯利、胺鮮酯、多效唑等復(fù)配，能起到改善作物株型結(jié)構(gòu)、提高根系數(shù)量和活力、促進(jìn)同化物分配轉(zhuǎn)運(yùn)和提高產(chǎn)量等作用，廣泛應(yīng)用于棉花、水稻、小麥、花生、玉米、甜椒等農(nóng)作物[1-5]。

甲哌鎓是季銨鹽類(lèi)化合物，具有較好的水溶性和熱穩(wěn)定性，在酸和水中相對(duì)穩(wěn)定，易生物降解[6-7]。目前分析檢測(cè)甲哌鎓的方法有高效液相離子對(duì)色譜法、共振光散射法、核磁共振法、陽(yáng)離子交換色譜法、電導(dǎo)檢測(cè)法和氣相色譜法等[8-12]，這些方法存在前處理方法繁瑣、柱上保留較弱、準(zhǔn)確度不好、靈敏度不高等缺點(diǎn)。因此，本文建立了甲哌鎓的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析方法，并用該方法進(jìn)行了水體中甲哌鎓含量的分析。試驗(yàn)證明，該方法操作簡(jiǎn)便，測(cè)定速度快，準(zhǔn)確度高，適用于甲哌鎓的制劑含量分析及其在基質(zhì)中的含量分析。

1 材料與方法

1.1 藥劑與儀器

藥劑包含99.0%甲哌鎓標(biāo)準(zhǔn)樣品(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥環(huán)境毒理研究中心)；甲醇、乙酸銨、乙腈為色譜純(天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)；試驗(yàn)用水為去離子水。

儀器包含超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(Waters TQD)；色譜柱(島津Shim-packXR-ODSⅡ，規(guī)格75 mm×2.0 mm，2.2 μm)；電子天平；EPED-40TF 超純水儀；數(shù)控超聲波清洗器。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取一定量的甲哌鎓標(biāo)準(zhǔn)樣品，用甲醇溶解并定容，配制甲哌鎓標(biāo)準(zhǔn)溶液母液，用甲醇稀釋成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。

1.3 分析條件

Waters TQD超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，采用電噴霧(ESI+)離子源，多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式掃描，外標(biāo)法定量。選用島津Shim-packXR-ODSⅡ(規(guī)格75 mm×2.0 mm，2.2 μm)色譜柱，流動(dòng)相為水(5 mmol/L乙酸銨，0.1%甲酸)∶乙腈=10∶90，進(jìn)樣量為2 μL，流速為0.25 mL/min，柱溫35℃，樣品室溫度為15℃，保留時(shí)間為0.63 min左右，質(zhì)譜參數(shù)如表1所示。

表1 質(zhì)譜參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)條件優(yōu)化

甲哌鎓屬于強(qiáng)極性化合物，在液相分離中使用常規(guī)反相色譜柱，保留時(shí)間較短，且易受溶劑峰干擾，難以達(dá)到分析檢測(cè)的目的，本研究選用島津Shim-packXR-ODSⅡ色譜柱，可提高分離度，在此液相條件下分離，目標(biāo)物不受雜質(zhì)峰干擾。以0.1%甲酸水-乙腈、0.2%甲酸水-乙腈、5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水-乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸水-乙腈為流動(dòng)相時(shí)，可提高離子化效率，有較高響應(yīng)值。

分別將甲哌鎓在ESI+和ESI-兩種模式下進(jìn)行掃描，在ESI+模式下，目標(biāo)物對(duì)應(yīng)的母離子114.10響應(yīng)值較強(qiáng)。在ESI+模式下，優(yōu)化錐孔電壓和碰撞電壓，選擇20,25,30,35,40 V為錐孔電壓，結(jié)果表明，在25 V下，母離子信號(hào)值最大。以114.10為母離子，進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜條件優(yōu)化，確定兩個(gè)特征子離子，并選擇合適的碰撞電壓，以響應(yīng)值最大的碎片離子58.05為定量離子，以次級(jí)響應(yīng)碎片離子98.10為定性離子,如圖1所示。

圖1 甲哌鎓母離子圖

圖2 甲哌鎓子離子圖

2.3 方法線性關(guān)系

將系列濃度甲哌鎓標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述分析條件下進(jìn)行檢測(cè)。以濃度為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在該檢測(cè)方法下，在0.001～0.5 mg/L 濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=4 235 241.6x-153.3，R2=0.996 8。

2.4 準(zhǔn)確度和精密度測(cè)定

在去離子水中添加一定量的上述標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)三檔添加水平，分別為0.005、0.05和0.5 mg/L，每檔重復(fù)5次，進(jìn)行添加回收試驗(yàn)。平均回收率為84.67%～91.38%，變異系數(shù)分別為3.10%～5.18%，如表2所示，LOQ為信噪比(S/N)等于10時(shí)所對(duì)應(yīng)的基質(zhì)中目標(biāo)物的濃度，以最低添加水平0.005 mg/L的色譜圖進(jìn)行衡量，得出去離子水中甲哌鎓的LOQ為3×10-4mg/L，符合基質(zhì)中農(nóng)藥痕量分析的實(shí)驗(yàn)要求。

表2 分析方法準(zhǔn)確度和精密度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)束語(yǔ)

本研究采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，建立了水樣中甲哌鎓含量檢測(cè)的分析方法，結(jié)果表明，在0.001～0.5 mg/L 濃度范圍內(nèi)，甲哌鎓標(biāo)準(zhǔn)樣品具有良好的線性關(guān)系，平均回收率和變異系數(shù)可達(dá)到農(nóng)藥痕量分析實(shí)驗(yàn)要求。該方法快速高效、準(zhǔn)確度和精密度高，可用于水體中痕量甲哌鎓的檢測(cè)，也可為其產(chǎn)品登記中的含量分析檢測(cè)提供方法參考。