高延宏

摘 要：本文對(duì)百蕊草口服液工藝進(jìn)行研究。采用高校液相測(cè)定了百蕊草口服液中山奈酚的含量，固定相為USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（5μm，4.6mm×150mm），甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為428nm；山奈酚對(duì)照品在進(jìn)樣量為0.3～1.5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，呈良好的線性關(guān)系?；亓魈崛∨c水提醇沉制得百蕊草口服液均為淺褐色透明氣微香，味甘、苦?；亓魈崛≈频冒偃锊菘诜纳侥畏雍扛哂谒岽汲林频冒偃锊菘诜骸?/p>

關(guān)鍵詞：百蕊草口服液；制備；工藝

百蕊草為檀香科植物百蕊草ThesiumchinenseTurcz.的全草。百蕊草具有清熱解毒，補(bǔ)腎澀精的功效。百蕊草常用于急性乳腺炎、肺炎、扁桃體炎、上呼吸道感染、頭昏、遺精等。《貴州民間方藥集》記載：“治頭昏體弱，腰痛，遺精，滑精?！卑偃锊莺偃锊菟?、3，5，7，4′-四羥基黃酮-3-葡萄糖-鼠李糖甙（3，5，7，4′-tetrahydrox-yflavone-3-glucosyl-rhamnoside）、紫云英甙（astragalin）、琥珀酸、D-甘露醇、山柰酚、3-葡萄鼠李糖甙山柰酚等成分。百蕊草在體外具廣譜抗菌活性、止咳、祛疫、平喘等作用。本文對(duì)百蕊草口服液工藝進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統(tǒng)（大連依利特分析儀器有限公司）；CO-Ⅳ色譜柱溫箱（恒溫柱箱）（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；WIGGENS WT2加熱制冷循環(huán)器（北京桑翌實(shí)驗(yàn)儀器研究所）；10升超純水器water-10n（中科儀（北京）儀器有限公司）；IKA RV10數(shù)顯型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海泰坦科技股份有限公司）；新芝scientz-T超聲波提取機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限公司）；UV-5500（PC）掃描型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海元析儀器有限公司）。山奈酚對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。甲醇（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸氫二鈉（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、三乙胺（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、醋酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、乙酸銨（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、乙腈（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）。

2 制備百蕊草口服液

2.1 回流提取

稱重后，將百蕊草在洗藥機(jī)水槽內(nèi)進(jìn)行淋洗，投入提取提取罐內(nèi)，加7倍的55%的乙醇，浸潤(rùn)三十分鐘，在加熱回流提取時(shí)間為四十五分鐘（加熱溫度為75℃），過(guò)濾，真空濃縮提取液并回收乙醇，回收乙醇，至無(wú)醇味，加純化水至200升，灌裝，滅菌，即得百蕊草口服液。

2.2 水提醇沉

稱重后，將百蕊草在洗藥機(jī)水槽內(nèi)進(jìn)行淋洗，投入提取提取罐內(nèi)，煎煮兩遍，第一遍加純化水6倍量，溫浸30分鐘后煎煮60分鐘；第二遍加純化水4倍量，煎煮60分鐘，過(guò)濾，合并濾液。將濾液濃縮至相對(duì)密度1.25（60攝氏度測(cè)）。冷卻至室溫，放至醇洗罐中緩緩加入3倍乙醇，邊加邊攪拌至均勻，靜止24小時(shí)。取上清藥液，回收乙醇，至無(wú)醇味，加純化水至200升，灌裝，滅菌，即得百蕊草口服液。

3 測(cè)定方法

3.1 色譜條件

色譜柱為USA Agilent ZORBAXSB-C18柱（規(guī)格4.6mm×150mm，5μm）；甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為428nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃[1-6]。

3.2 供試品溶液的制備

取百蕊草口服液適量，精密量取1ml，置10mL量瓶中，加80%甲醇適量，超聲處理5分鐘使溶解，放置至室溫，加80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，即得。

3.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取山奈酚對(duì)照品約10mg，置50mL容量瓶中，用20%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5mL至10mL容量瓶中，用80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含山奈酚100.0μg）。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別吸入標(biāo)準(zhǔn)品3μl，6μl，9μl，12μl，15μl注入HPLC，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)表明，山奈酚對(duì)照品在進(jìn)樣量為0.3～1.5μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取山奈酚對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.88%。

3.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批百蕊草口服液樣品6份，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值為0.98%，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

3.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一對(duì)照品溶液與同一供試品溶液，分別在0，4，8，12進(jìn)樣測(cè)定，樣品溶液的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明，室溫下12h內(nèi)測(cè)定峰面積基本一致。

3.8 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分別精密添加一定量的山奈酚對(duì)照品，按供試品制備所述方法測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%。

4 討論

分別考察甲醇-水-三乙胺（25∶75：0.1），0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20），甲醇-水（80：20，含0.1%三乙胺，甲醇-2%醋酸水溶液（18∶82），甲醇：乙酸銨溶液（33：67體積比），乙腈-水（體積比為65∶35），甲醇-0.1%磷酸溶液（30：70），甲醇-0.4%磷酸（55：45）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-0.4%磷酸（55：45）為流動(dòng)相。回流提取與水提醇沉制得百蕊草口服液均為淺褐色透明氣微香，味甘、苦?；亓魈崛≈频冒偃锊菘诜纳侥畏雍扛哂谒岽汲林频冒偃锊菘诜?。

參考文獻(xiàn)

[1]蔡定國(guó)，繆平，顧明娟.高速逆流色譜法從銀杏葉分離異鼠李素、山奈酚和槲皮素對(duì)照品[J].中藥新藥與臨床藥理，1999（01）.

[2]翔，盛潔靜，曲中原，張振國(guó)，徐陽(yáng)，季宇彬.曇花中槲皮素、異鼠李素和山奈酚量的測(cè)定[J].鄒哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2015（05）.

[3]黃興富，黎其萬(wàn)，劉宏程，王繼良，孫浩巖，邵金良.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定苦蕎中蘆丁、槲皮素和山柰酚的含量[J].中成藥，2011（02）.

[4]劉知遠(yuǎn)，沈廷明，吳仲玉.RP-HPLC法同時(shí)測(cè)定福建產(chǎn)金線蓮中槲皮素、山柰素、異鼠李素的量[J].中草藥，2015（03）.

[5]馬銀海，彭永芳，郭亞?wèn)|，楊光宇，尹家元，胡秋芬.高效液相色譜法快速測(cè)定蓮須中的槲皮素和山萘酚[J].昆明師范高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2005（04）.

[6]浦錦寶，梁衛(wèi)青，鄭軍獻(xiàn)，胡軼娟，魏克民.HPLC法測(cè)定三葉青中槲皮素、山奈酚的含量[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，2011（02）.