劉婧

摘 要 選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，采用光纖固有溶出度實(shí)時(shí)測(cè)定系統(tǒng)測(cè)定了鹽酸阿拉莫林在4種介質(zhì)中的固有溶出度。并制備了鹽酸阿拉莫林片劑，進(jìn)行了4種介質(zhì)中的溶出試驗(yàn)。結(jié)果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的介質(zhì)和水中，鹽酸阿拉莫林的固有溶出度分別為25.27、23.48、25.58、27.30 mg/（cm2·min），>1 mg/（cm2·min），提示溶出不會(huì)成為藥物吸收的限速過(guò)程。阿拉莫林片在4種介質(zhì)中均為快速溶出，溶出速度：水>pH 6.8介質(zhì)>pH 1.2介質(zhì)>pH 4.5介質(zhì)，與固有溶出度測(cè)定大小順序相同。結(jié)果顯示，固有溶出度能夠在一定程度上預(yù)測(cè)藥物從片劑中溶出的行為，為藥物的劑型選擇和處方設(shè)計(jì)提供參考。

關(guān)鍵詞 鹽酸阿拉莫林 固有溶出度 轉(zhuǎn)盤(pán)法 溶出

中圖分類號(hào)：R927.11 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-1533（2018）11-0093-05

Intrinsic dissolution of anamorelin hydrochloride and its dissolution study

LIU Jing

（Research Institute， Shanghai Pharmaceuticals Holding Co.， Ltd.， Shanghai 201203， China）

ABSTRACT Anamorelin hydrochloride was selected as a model drug and its intrinsic dissolution in four media was determined by an optical fiber intrinsic dissolution real-time measurement system. The dissolution test of home-made anamorelin hydrochloride tablets was performed in four media. The results showed that its intrinsic dissolution was 25.27， 23.48， 25.58， 27.30 mg/（cm2·min） in pH 1.2， pH 4.5， pH 6.8 media and water， respectively， suggesting that the dissolution would not be the limit in drug absorption. Anamorelin tablets could be rapidly dissolved in all four media and its dissolution rate was the fastest in water following by in pH 6.8， pH 1.2 and pH 4.5 media with the same rank as the measurement of intrinsic dissolution， which suggested that intrinsic dissolution test could predict the dissolution of drug from tablets to some extent and could provide a reference for the formulation selection and prescription design of drugs.

KEy WORDS anamorelin hydrochloride； intrinsic dissolution； rotating disk system； dissolution

傳統(tǒng)的溶解度測(cè)定方法直接測(cè)定不同溶劑中藥物的飽和濃度，這些方法能夠比較直觀地測(cè)得藥物的溶解度，但在評(píng)價(jià)藥物的生物利用度方面，存在一定的局限[1]。固有溶出度（intrinsic dissolution rate，IDR）通常表述為單位時(shí)間內(nèi)單位面積的溶質(zhì)在特定介質(zhì)中出現(xiàn)的溶質(zhì)的量，能夠動(dòng)態(tài)地反映藥物在溶出介質(zhì)中的溶解行為，可用于藥物的生物藥劑分類系統(tǒng)（biopharmaceutics classification system， BCS）中溶解性判斷[2]，為新藥的研發(fā)提供參考[3]，也可作為控制藥物質(zhì)量的手段用于藥物生產(chǎn)過(guò)程中[4]。目前美國(guó)藥典收載的IDR測(cè)定法包括轉(zhuǎn)盤(pán)法（rotating disk system）和定盤(pán)法（stationary disk system）。測(cè)定時(shí)需要定時(shí)取出部分溶出介質(zhì)檢測(cè)藥物濃度，由于取樣檢測(cè)需要一定的操作時(shí)間，對(duì)于快速溶出的藥物，可能不能準(zhǔn)確地測(cè)定其固有溶出曲線。光纖固有溶出度測(cè)定系統(tǒng)采用光纖探頭直接測(cè)定溶出杯內(nèi)藥物濃度，采樣時(shí)間可縮短至5 s并能實(shí)時(shí)顯示測(cè)定數(shù)值，能夠更準(zhǔn)確地測(cè)得藥物在較短的溶出過(guò)程中的實(shí)時(shí)溶出速率變化[5]。鹽酸阿拉莫林為口服饑餓素的類似物，用于增加癌癥晚期惡病質(zhì)患者的體重[6-7]。該藥物在水中具有較大的溶解度，適合采用光纖實(shí)時(shí)測(cè)定法測(cè)定IDR。本實(shí)驗(yàn)選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，進(jìn)行不同介質(zhì)中的IDR測(cè)定，并制備片劑，進(jìn)行體外溶出度測(cè)定，考察IDR與溶出度的相關(guān)性，評(píng)價(jià)IDR作為處方前研究手段預(yù)測(cè)藥物溶出情況的可行性。

1 材料與方法1.1 材料與設(shè)備

鹽酸阿拉莫林（自制，批號(hào)543-12）；微晶纖維素（FMC Corporation，PH102）；乳糖（DFE Pharma，GR30）；羥丙纖維素（信越化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社，LH-21）；硬脂酸鎂（海鹽六和藥業(yè)有限公司）；Focs Fodt-101G光纖藥物固有溶出度實(shí)時(shí)測(cè)定系統(tǒng)（上海富科思分析儀器有限公司）；Focs Favd-25智能真空脫氣儀（上海富科思分析儀器有限公司）；UV1700 UV-Vis Spectrophotometer（Shimadzu Corporation）；DP30A單沖壓片機(jī)（國(guó)藥龍立科技有限公司）；YD-35片劑硬度儀（天大天發(fā)科技有限公司）；AT 7-Smart溶出儀（Sotax AG）；CPA225D電子天平（Sartorius Corporate）；BSA4020SCW電子天平（Sartorius Corporate）。

1.2 方法

1.2.1 溶出介質(zhì)配制

pH 1.2介質(zhì)：量取鹽酸7.65 ml，加水稀釋至1 000 ml；pH 4.5介質(zhì)：稱取乙酸鈉18 g，加入冰醋酸9.8 ml，加水稀釋至1 000 ml；pH 6.8介質(zhì)：稱取磷酸二氫鉀6.8 g，氫氧化鈉0.94 g，加水稀釋至1 000 ml。以上介質(zhì)所用的純水經(jīng)真空脫氣30 min。

1.2.2 鹽酸阿拉莫林IDR測(cè)定

1.2.2.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

稱取鹽酸阿拉莫林10 mg，置100 ml量瓶中，分別用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的介質(zhì)和水定容，制成100μg/ml的對(duì)照溶液。光纖藥物固有溶出度測(cè)定儀選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定模式，選用2 mm探頭，將探頭裝入光纖傳感器下端，分別采用相應(yīng)的空白溶劑作為空白對(duì)照，掃描220～600 nm波長(zhǎng)吸收光譜。

1.2.2.2 IDR測(cè)定

采用1.2.2.1中的對(duì)照溶液，光纖藥物固有溶出度測(cè)定儀選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定模式，選用2 mm探頭，以相應(yīng)的溶劑為空白對(duì)照，選用550 nm為參比波長(zhǎng)，在1.2.2.1選定的波長(zhǎng)下測(cè)定吸收度，使用系統(tǒng)自帶軟件按照單點(diǎn)法計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。將700 ml溶出介質(zhì)裝入溶出杯中，并加熱至37 ℃。稱取阿拉莫林100 mg，置8 mm壓片模具中，采用測(cè)定系統(tǒng)配置的壓片裝置將粉末壓片，壓力 150 kg，時(shí)間3 min，重復(fù)3次，將壓成片的藥物連同模具裝入連接套，并將連接套裝在轉(zhuǎn)軸下端，使壓制成片的藥物僅有一面可以接觸溶出介質(zhì)，并使探頭位置與藥物表面位于同一高度，儀器選用溶出測(cè)定模式，將模具及探頭浸入溶出杯中，轉(zhuǎn)軸轉(zhuǎn)速300 r/min，選用550 nm為參比波長(zhǎng)，在1.2.2.1中選定的波長(zhǎng)下測(cè)定實(shí)時(shí)吸光度，系統(tǒng)自動(dòng)代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算溶出量，待藥物完全溶出后停止試驗(yàn)。試驗(yàn)中藥物應(yīng)從片面逐漸溶出，不應(yīng)有藥物呈塊狀或片狀進(jìn)入溶出介質(zhì)中。分別在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質(zhì)中進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3 鹽酸阿拉莫林片溶出

1.2.3.1 鹽酸阿拉莫林片制備

按表1處方制備50 mg規(guī)格的鹽酸阿拉莫林片，共制成100片。將藥物與輔料混合后過(guò)50目篩3次，袋混5 min，制成總混物料?？偦煳锪喜捎弥苯訅浩ǎ褂脝螞_壓片機(jī)壓成直徑8.5 mm淺圓片。

1.2.3.2 鹽酸阿拉莫林片溶出

標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定：稱取鹽酸阿拉莫林100 mg，置100 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，作為母液，取5.0 ml，置50 ml量瓶中，分別用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的溶出介質(zhì)和水稀釋至刻度，分別取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml，置10 ml量瓶中，用相應(yīng)的緩沖液稀釋至刻度，制成濃度為0.01、0.02、0.04、0.06和0.08 mg/ml的供試液，于1.2.2.1選定波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸光度A對(duì)濃度C（mg/ml）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算相關(guān)系數(shù)。

精密度考察：取標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定所配制0.06 mg/ml溶液作為樣品，重復(fù)測(cè)定吸收度6次，計(jì)算RSD。

穩(wěn)定性考察：取精密度測(cè)定樣品，分別于0、2、4、6 h測(cè)定吸收度，考察藥物含量的變化情況。

回收率考察：分別選用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8溶出介質(zhì)和水為溶劑，每個(gè)溶劑下精密稱定按處方配制的空白輔料6份，分別置100 ml量瓶中，加入適量相應(yīng)溶劑，超聲5 min后，分別加入鹽酸阿拉莫林50 mg，加入相應(yīng)溶劑稀釋至刻度，過(guò)4.5 μm水系濾膜，并棄去初濾液約2 ml，精密量取續(xù)濾液1.0 ml，置10 ml量瓶中，加相應(yīng)溶劑稀釋至刻度，配制成相當(dāng)于溶出濃度100%的供試品，于1.2.2.1選定的波長(zhǎng)處測(cè)定紫外吸收度，計(jì)算回收率。

含量測(cè)定：取鹽酸阿拉莫林片10片，研磨后稱取適量粉末，使其含有標(biāo)示量的鹽酸阿拉莫林，置100 ml量瓶中，加入適量水，超聲5 min后，加水稀釋至刻度，過(guò)4.5 μm水系濾膜，并棄去初濾液約2 ml，精密量取續(xù)濾液1 ml，置10 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，于選定波長(zhǎng)處測(cè)定紫外吸收度，計(jì)算含量。

溶出度測(cè)定：采用《中華人民共和國(guó)藥典（2015版）》溶出度測(cè)定法第二法，轉(zhuǎn)速50 r/min，分別在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8介質(zhì)和水中測(cè)定溶出度。于第5、10、15、20、30、45、60、90 min取樣10 ml，補(bǔ)液10 ml，樣品進(jìn)行紫外分光光度法測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 固有溶出度測(cè)定

2.1.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

根據(jù)掃描結(jié)果，在4種溶出介質(zhì)中，鹽酸阿拉莫林均在280 nm處有最大吸收，故選擇280 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.1.2 IDR測(cè)定

在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8介質(zhì)和水中，鹽酸阿拉莫林片在7～9 min完全溶出，溶出過(guò)程中無(wú)藥物散落的現(xiàn)象，選用1～7 min的數(shù)據(jù)計(jì)算平均溶出速率。

2.2 溶出度測(cè)定

2.2.1 片劑制備

按照1.2.3.1方法制備片劑，并進(jìn)行含量和硬度測(cè)定，鹽酸阿拉莫林片含量99.2%（按50 mg標(biāo)示量計(jì)算），平均硬度（7.38±0.41）kg。

2.2.2 溶出度測(cè)定

2.2.2.1 測(cè)定方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性良好，方法精密度良好，樣品放置6 h吸收度RSD在2%以內(nèi)，顯示在6 h內(nèi)，溶液穩(wěn)定性良好，回收率在95%～105%之間。標(biāo)準(zhǔn)曲線、精密度、穩(wěn)定性及回收率結(jié)果見(jiàn)表3～表6。

2.2.2.2 溶出度測(cè)定結(jié)果

鹽酸阿拉莫林在4種溶出介質(zhì)中的溶出曲線如圖2所示。

3 討論

本試驗(yàn)選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，進(jìn)行了IDR的測(cè)定，選用光纖實(shí)時(shí)測(cè)定系統(tǒng)，在測(cè)定過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)觀測(cè)藥物的溶出情況，對(duì)于快速溶出的藥物，能夠在短時(shí)間內(nèi)更精確地測(cè)出溶出量的變化。結(jié)果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質(zhì)中，藥物的IDR分別達(dá)到 25.27、23.48、25.58和27.30 mg/（cm2·min），在不同的介質(zhì)中略有差異，水>pH 6.8>pH 1.2>pH 4.5，4種介質(zhì)中IDR均>1 mg/（cm2·min），表明藥物的溶出一般不會(huì)成為吸收的限速過(guò)程。另外，本試驗(yàn)還制備了50 mg規(guī)格的片劑，進(jìn)行了體外溶出試驗(yàn)。制備片劑選用常用輔料，輔料用量均在常規(guī)范圍內(nèi)，采用直接壓片方法，未對(duì)處方工藝進(jìn)行加快或減慢溶出的設(shè)計(jì)。體外溶出結(jié)果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質(zhì)中，藥物均能較快地溶出，30 min內(nèi)溶出>85%，且4條曲線差異較小，第二點(diǎn)起RSD<10%，溶出速率水>pH 6.8>pH 1.2>pH 4.5，與IDR順序相同，表明在本試驗(yàn)中，IDR能夠反映在常規(guī)的處方工藝下制備的片劑的體外溶出行為。IDR能夠動(dòng)態(tài)地反映藥物從固體狀態(tài)溶出的過(guò)程，比溶解度試驗(yàn)?zāi)軌蛱峁└嗟男畔?，在處方前研究階段能夠在一定程度上預(yù)測(cè)藥物的溶出行為，為藥物的劑型選擇和處方設(shè)計(jì)提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1] Li S， Wong S， Sethia S， et al. Investigation of solubility and dissolution of a free base and two different salt forms as a function of pH[J]. Pharm Res， 2005， 22（4）： 628-635.

[2] Zakeri-Milani P， Barzegar-Jalali M， Azimi M， et al. Biopharmaceutical classification of drugs using intrinsic dissolution rate （IDR） and rat intestinal permeability[J]. Eur J Pharm Biopharm， 2009， 73（1）： 102-106.

[3] Shekunov B， Montgomery ER. Theoretical analysis of srug sissolution： I. Solubility and intrinsic dissolution rate[J]. J Pharm Sci， 2016， 105（9）： 2685-2697.

[4] ？ehi？ S， Betz G， ？eherzada Had？idedi？， et al. Investigation of intrinsic dissolution behavior of different carbamazepine samples[J]. Inter J Pharm， 2010， 386（1-2）： 77.

[5] 耿晶， 張字城， 張海波， 等. 光纖傳感過(guò)程分析測(cè)定蒜氨酸固有溶出速率[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2014， 49（10）： 1475-1478.

[6] Currow D， Temel JS， Abernethy A， et al. ROMANA 3： a phase 3 safety extension study of anamorelin in advanced nonsmall-cell lung cancer （NSCLC） patients with cachexia[J]. Ann Oncol， 2017， 28（8）： 1949-1956.

[7] Garcia JM. Therapeutic potential of anamorelin， a novel， oral ghrelin mimetic， in patients with cancer-related cachexia： a multicenter， randomized， double-blind， crossover， pilot study[J]. Support Care Cance， 2013， 21（1）： 129-137.