王 波 ，劉 剛

隨著社會(huì)現(xiàn)代化程度的飛速發(fā)展，創(chuàng)傷的發(fā)生率逐年升高，其中嚴(yán)重多發(fā)傷更是導(dǎo)致傷病員死亡的主要原因，因而成為創(chuàng)傷研究的熱點(diǎn)之一。嚴(yán)重多發(fā)傷不僅可引起創(chuàng)傷局部組織結(jié)構(gòu)和功能的損害，還可造成遠(yuǎn)隔臟器的繼發(fā)損害，甚至導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征（multiple organ dysfunction syndrome, MODS）。其中，胃腸道是機(jī)體最易受影響的遠(yuǎn)隔器官之一，同時(shí)也是遭受創(chuàng)傷后最早發(fā)生病理生理變化的器官。Wilmore等[1]稱腸道為“外科應(yīng)激條件下的中心器官”；Liaudet等[2]稱之為“多器官衰竭綜合征（multiple organ failure syndrome，MOF）”的動(dòng)力器官。腸道因其在體內(nèi)獨(dú)特的生理環(huán)境及特殊的生理構(gòu)造而參與了幾乎所有危重病的病理生理過(guò)程。

嚴(yán)重多發(fā)傷者常因繼發(fā)的急性胃腸功能損害未及時(shí)糾正而導(dǎo)致不良預(yù)后，因此治療多發(fā)傷的同時(shí)進(jìn)行有效的胃腸道保護(hù)是必要的。嚴(yán)重多發(fā)傷早期胃腸道功能、腸黏膜屏障有無(wú)改變目前尚缺乏充分的研究，本研究擬建立嚴(yán)重多發(fā)傷合并急性胃腸功能損傷（acute gastrointestinal injury，AGI）家兔動(dòng)物模型，通過(guò)觀察腸黏膜組織結(jié)構(gòu)、腸黏膜屏障功能、血清內(nèi)毒素表達(dá)水平、腸道通透性等指標(biāo)的改變，為進(jìn)一步研究腸道微環(huán)境的干預(yù)機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物模型建立

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 家兔50只，雌雄不限，4～6個(gè)月齡，體重（2.2士0.5）kg，由同濟(jì)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供[動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（滬）2014-0026]，標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)2周。動(dòng)物一般情況檢查狀態(tài)良好，體溫、呼吸、心率正常，精神狀態(tài)好，無(wú)腹瀉。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按1～50編號(hào)后，錄入SPSS數(shù)據(jù)庫(kù)，按照20%進(jìn)行隨機(jī)抽樣，所獲得的10只為對(duì)照組，其余40只為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，禁飲6 h。

1.1.2 建模方法 采用自制的重力牽引式小型對(duì)（側(cè)）撞機(jī)模擬交通意外致傷，該對(duì)撞系統(tǒng)包括：后推式驅(qū)動(dòng)、軌道、動(dòng)物固定平臺(tái)、制動(dòng)緩沖裝置及吸能海綿，單軌為對(duì)撞致傷，雙軌為側(cè)撞致傷。1.5%戊巴比妥鈉行耳緣靜脈麻醉（30 mg/kg），用自制無(wú)紡布束縛背心以坐姿固定家兔于小動(dòng)物碰撞臺(tái)車的座椅之上，頭頸、四肢自然外露，保持自然直立坐姿，啟動(dòng)裝置模擬致傷。

1.2 傷情評(píng)估 傷后立即將動(dòng)物送至動(dòng)物檢查室，采用單人B超、X線及計(jì)算機(jī)X線斷層掃描（computed tomograhy，CT）對(duì)動(dòng)物進(jìn)行體檢及創(chuàng)傷嚴(yán)重程度評(píng)分（injury severity score，ISS）[3]評(píng)估。對(duì)照組為正常對(duì)照，除不參與模擬致傷外與實(shí)驗(yàn)組相同。

1.2.1 ISS評(píng)分 按照多發(fā)傷診斷標(biāo)準(zhǔn)（即同一致傷因素同時(shí)或相繼造成1個(gè)以上部位的嚴(yán)重創(chuàng)傷），先評(píng)估胸部、面部、體表、頭頸部、腹部及盆腔、四肢及骨盆等6個(gè)部位的簡(jiǎn)明損傷定級(jí)（abbreviated injury scale，AIS）-90，取AIS-90最高的3個(gè)值，其平方和即為ISS。如1個(gè)或多個(gè)部位AIS-90達(dá)到6分，則ISS自動(dòng)確定為75分。

1.2.2 AGI評(píng)分 AGI診斷參照歐洲危重病學(xué)會(huì)制定的《歐洲危重病醫(yī)學(xué)會(huì)關(guān)于AGI的定義和處理指南（2012）》標(biāo)準(zhǔn)[4]結(jié)合既往研究胃腸功能損傷分為四個(gè)等級(jí)：Ⅰ級(jí)為自限性階段，但進(jìn)展為胃腸功能障礙或衰竭風(fēng)險(xiǎn)較大；Ⅱ級(jí)為通過(guò)臨床治療能夠重建胃腸功能；Ⅲ級(jí)為胃腸功能經(jīng)過(guò)干預(yù)處理后仍不能恢復(fù)；Ⅳ級(jí)為胃腸功能衰竭，并危及生命[5]。為便于觀察，筆者對(duì)所有實(shí)驗(yàn)組及正常對(duì)照組動(dòng)物均在傷后6 h進(jìn)行以下處理：放置胃管（20 cm），聽診、記錄腸鳴音，腹腔穿刺測(cè)壓，并進(jìn)行胃液及大便潛血試驗(yàn)。飲水試驗(yàn):胃管內(nèi)注射等滲鹽水50 ml，閉管30 min后抽吸胃管，根據(jù)胃內(nèi)殘留液判斷胃腸道耐受程度。≤25 ml為一度，得1分；26～50 ml為二度，得2分；51～75 ml為三度，得3分；76～100 ml為四度，得4分。觀察并記錄動(dòng)物的排氣、排便情況，見表1。五項(xiàng)賦分值總和即為最后得分。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組均觀察至傷后12 h，每6 h記錄1次，結(jié)果取平均值進(jìn)行分級(jí)。

表1 急性胃腸功能損傷分級(jí)觀察項(xiàng)目量化賦分表

1.3 腸道微環(huán)境檢測(cè)

1.3.1 血漿二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）水平 采用酶聯(lián)免疫吸附法，分別于傷后4、8、12、24 h按使用說(shuō)明進(jìn)行以下操作：（1）取試劑盒和樣品并解凍30 min；（2）用微量加樣器在含DAO酶標(biāo)板中依次加入標(biāo)準(zhǔn)品，實(shí)驗(yàn)組各加入樣品血漿10 μl；（3）封板膜封板后置37 ℃溫育30 min；（4）每孔加入酶標(biāo)試劑50 μl，重復(fù)封板；（5）洗滌液沖洗5次，靜置30 s/次；（6）每孔內(nèi)加入顯色劑A液、B液各50 μl；（7）37 ℃避光顯色15 min；（8）每孔加終止液50 μl；（9）酶標(biāo)儀上讀取各孔在波長(zhǎng)450 nm處的吸光度（A）值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.2 尿液乳果糖/甘露醇排泄率比值（lactulose excretion rate / mannitol excretion rate，L/M） 通過(guò)檢測(cè)L/M評(píng)估腸黏膜通透性。造模后經(jīng)胃管給予含2 g乳果糖和1 g甘露醇的混合液灌胃，收集各觀察時(shí)相點(diǎn)尿液，取5 ml尿液加入1 ml硫柳汞－20 ℃保存，采用高壓液相色譜法測(cè)定尿中乳果糖和甘露醇含量，經(jīng)樣本色譜分析對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品圖譜求得L/M。

1.3.3 血清內(nèi)毒素表達(dá)水平檢測(cè) 按照時(shí)間分批處理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在超凈臺(tái)無(wú)菌條件下打開腹腔，抽取門靜脈血1 ml，注入內(nèi)毒素檢測(cè)專用采血瓶中，5 000×g離心5 min取血漿，采用鱟試劑比色法，測(cè)定血漿內(nèi)毒素含量。最低測(cè)定限為0.015 EU/ml。

1.3.4 腸道細(xì)菌移位檢測(cè) 按照時(shí)間分批處理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，予耳緣靜脈注射1.5%戊巴比妥鈉（30 mg/kg）麻醉家兔后，75%酒精消毒皮毛，在超凈臺(tái)無(wú)菌條件下打開腹腔，在回盲部到腸系膜根部摘除腸系膜淋巴結(jié)（mesenteric lymph node，MLN），以及適量肝、脾組織（各約0.2 g），以無(wú)菌生理鹽水沖洗干凈，置于無(wú)菌組織勻漿器，加入無(wú)菌生理鹽水1 ml研磨。各取50 μl分別置于腸道需氧培養(yǎng)基、腸道厭氧培養(yǎng)基和腸桿菌科細(xì)菌培養(yǎng)基上，在37 ℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48～72 h，計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落。凡組織勻漿中培養(yǎng)出≥3個(gè)/50 μl菌落即為細(xì)菌移位陽(yáng)性。

1.4 小腸組織蘇木素－伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色 取距回盲部15～20 cm處回腸組織，經(jīng)4%甲醛液固定后，石蠟包埋，切片厚度為4 μm，作常規(guī)HE染色，光鏡下觀察小腸黏膜組織形態(tài)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算處理，計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Newman-Kueuls法；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和率表示，組間比較采用Pearson χ2檢驗(yàn)，對(duì)于多重假設(shè)檢驗(yàn)，為保證P值的可信度，采用Benjamini-Hochberg方法進(jìn)行校正后返回結(jié)果，再進(jìn)行后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料 實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物有4只在造模時(shí)致死，剩余的36只ISS均＞16分，符合嚴(yán)重多發(fā)傷診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中顱腦損傷合并肝脾損傷8只，四肢骨折合并脾臟損傷4只，肋骨骨折合并肺臟損傷、胸腔積液10只，硬膜外血腫、腦挫裂傷合并骨盆及四肢骨折9只，多部位骨折5只。實(shí)驗(yàn)組在造模成功后，隨著觀察時(shí)間推移，相繼出現(xiàn)腸鳴音減弱、腹內(nèi)壓升高，大便或胃液潛血試驗(yàn)由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，甚至出現(xiàn)便血、嘔血，飲水后出現(xiàn)嚴(yán)重腹脹、嘔吐，部分動(dòng)物開始出現(xiàn)肛門不規(guī)律排氣、排便甚至停止排氣、排便等病理生理變化。傷后12 h實(shí)驗(yàn)組AGI分級(jí)，其中Ⅰ級(jí)18只（0～5分），Ⅱ級(jí)11只（6～10分），Ⅲ級(jí)5只（11～15分），Ⅳ級(jí)2只（16～20分）。

2.2 血漿DAO水平及L/M 造模后，實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)DAO、L/M水平均高于對(duì)照組，且隨著時(shí)間推移，DAO、L/M水平相應(yīng)升高；（1）與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組4 h DAO及L/M顯著升高（t=3.359，P＜0.05；t=3.333，P＜0.05）；（2）與4 h比較，實(shí)驗(yàn)組8 h DAO及L/M顯著升高（t=4.374，P＜0.05；t=3.094，P＜0.05）；（3）與8 h比較，實(shí)驗(yàn)組12 h的DAO及L/M顯著升高（t=4.374，P＜0.05；t=4.154，P＜0.05）;（4）與12 h比較，實(shí)驗(yàn)組24 h DAO及L/M顯著升高（t=2.327，P＜0.05；t=3.551，P＜0.05，表 2）。

表2 對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組造模后各時(shí)間點(diǎn)血漿DAO水平及L/M比較（±s）

表2 對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組造模后各時(shí)間點(diǎn)血漿DAO水平及L/M比較（±s）

注：對(duì)照組，未造模家兔；實(shí)驗(yàn)組，采用自制的重力牽引式小型對(duì)（側(cè)）撞機(jī)進(jìn)行模擬交通意外致傷家兔；DAO，二胺氧化酶；L/M，乳果糖/甘露醇排泄率比值；與對(duì)照組比較，①P＜0.05；與4 h比較，②P＜0.05；與8 h比較，③P＜0.05；與12 h比較，④P＜0.05

項(xiàng)目 對(duì)照組（n=10）實(shí)驗(yàn)組4 h（n=10） 8 h（n=10） 12 h（n=8） 24 h（n=8）DAO（μmol/ml） 0.643±0.155 0.902±0.188① 1.387±0.296② 1.917±0.323③ 2.414±0.496④L/M（%） 0.380±0.060 0.590±0.190① 1.070±0.430② 2.280±0.790③ 3.350±0.320④

2.3 血漿內(nèi)毒素的含量 對(duì)照組動(dòng)物血漿內(nèi)毒素含量低于本實(shí)驗(yàn)所用試劑盒能測(cè)定的最低值0.015 EU/ml，記為陰性（－）；實(shí)驗(yàn)組造模后血漿內(nèi)毒素含量在造模后4、8、12、24 h分別為（0.024±0.001）EU/ml、（0.105±0.014）EU/ml、（0.478±0.042）EU/ml、（0.937±0.032）EU/ml，四組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2280.050，P＜0.05）；進(jìn)一步兩兩比較：與4 h比較，8、12、24 h血漿內(nèi)毒素含量升高（q=9.930，P＜0.05；q=52.480，P＜0.05；q=105.530，P＜0.05）；與8 h比較，12、24 h血漿內(nèi)毒素含量升高（q=13.120，P＜0.05；q=96.170，P＜0.05）；與12 h比較，24 h血漿內(nèi)毒素含量升高（q=50.530，P＜0.05）。

2.4 腸道菌群移位情況比較 對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)組傷后4 h培養(yǎng)均未出現(xiàn)肝、脾和MLN細(xì)菌陽(yáng)性；實(shí)驗(yàn)組傷后8、12、24 h臟器細(xì)菌移位率分別為27.78%、33.33%和60.61%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=26.920，P＜0.05）。對(duì)檢出的細(xì)菌進(jìn)行菌種鑒定，均為革蘭陰性細(xì)菌，見表3。

2.5 腸黏膜病理改變 對(duì)照組小腸腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，腸上皮細(xì)胞緊密連接，絨毛呈高柱狀上皮，刷狀緣整齊，黏膜無(wú)水腫，可見少許炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（圖1A）。實(shí)驗(yàn)組8 h時(shí)，腸黏膜上皮細(xì)胞空泡化明顯，少量的腸上皮細(xì)胞脫落，絨毛水腫（圖1B）。實(shí)驗(yàn)組12 h時(shí)，絨毛間質(zhì)血管擴(kuò)張，腸上皮細(xì)胞大量脫落，固有層淋巴細(xì)胞增多（圖1C）。實(shí)驗(yàn)組24 h時(shí)，腸黏膜組織較前更加疏松，上皮層下間隙水腫，炎性細(xì)胞彌散性浸潤(rùn)，數(shù)量比正常小腸黏膜增多（圖1D）。

圖1 對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組造模后各時(shí)間點(diǎn)腸黏膜病理組織變化（HE，×200）

3 討 論

在災(zāi)難醫(yī)學(xué)中，嚴(yán)重多發(fā)傷是一種常見且威脅搶救成功率的急危重癥。嚴(yán)重多發(fā)傷在治療過(guò)程中常伴有多種并發(fā)癥：心肺功能不全、腎功能不全、感染性休克、消化道出血等多臟器功能衰竭。而機(jī)體為了保護(hù)心、腦等重要器官，使全身血液重新分配，胃腸道血流明顯減少，導(dǎo)致組織缺血、缺氧，所以胃腸道是最易受累的器官之一。本研究通過(guò)成功建造嚴(yán)重多發(fā)傷合并AGI的家兔模型，從而進(jìn)一步應(yīng)用于腸道微環(huán)境的研究，發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重多發(fā)傷早期腸黏膜通透性的改變可能是內(nèi)毒素入侵和腸道細(xì)菌移位的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。

表3 造模后各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組MLN、肝、脾樣本細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果比較

研究表明，嚴(yán)重多發(fā)傷早期即可出現(xiàn)AGI，其預(yù)后也與胃腸功能的恢復(fù)密切相關(guān)[6]，但其內(nèi)在機(jī)制尚不明確。而AGI早期多伴隨腸黏膜屏障功能的損害，主要涉及腸道機(jī)械、化學(xué)、微生物和免疫屏障[7,8]。正常情況下，循環(huán)中DAO含量極少，若腸黏膜細(xì)胞缺血壞死，DAO隨壞死細(xì)胞脫落進(jìn)入腸腔或釋放入血，導(dǎo)致腸黏膜組織中DAO下降，腸腔內(nèi)、腸系膜淋巴結(jié)及循環(huán)中DAO水平上升[9]。本研究發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組血漿DAO水平及L/M在傷后4～24 h內(nèi)即出現(xiàn)不同程度升高，表明DAO可能是一種具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶，其活性變化可作為反映早期腸黏膜屏障功能及早期腸道通透性損害的檢測(cè)指標(biāo)之一。嚴(yán)重多發(fā)傷早期，腸黏膜屏障遭到破壞，出現(xiàn)局灶性的細(xì)胞缺失，腸黏膜萎縮細(xì)胞間隙增大，或腸黏膜細(xì)胞間的緊密連接部不完整，乳果糖吸收增加；而經(jīng)細(xì)胞途徑吸收的甘露醇變化不明顯，導(dǎo)致L/M比值呈逐漸增高趨勢(shì)[10]。

內(nèi)毒素的主要化學(xué)成分是革蘭陰性菌細(xì)胞壁外部的脂多糖，主要由類脂A、核心多糖和特異多糖3部分組成。當(dāng)腸黏膜屏障受到損害時(shí)，腸道內(nèi)毒素被釋放進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，從而引起內(nèi)毒素血癥[11]。相關(guān)臨床研究表明，循環(huán)中內(nèi)毒素水平可作為腸黏膜免疫屏障崩潰的標(biāo)志，可間接反映腸黏膜通透性[12,13]。本研究發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組家兔血漿內(nèi)毒素含量較對(duì)照組顯著升高，并且隨著時(shí)間的發(fā)展，血漿內(nèi)毒素水平呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)，符合上述研究結(jié)論。

嚴(yán)重多發(fā)傷時(shí)常因繼發(fā)的AGI未及時(shí)糾正而導(dǎo)致預(yù)后不良，但其腸道微環(huán)境改變的機(jī)制尚不明確。目前對(duì)腸道微環(huán)境改變研究最多的是腸道細(xì)菌移位，研究表明，人體腸道內(nèi)細(xì)菌量達(dá)l011～l012個(gè)，其中厭氧菌約占98%以上[14]。腸道屬于體內(nèi)最大的“儲(chǔ)菌庫(kù)”和“內(nèi)毒素庫(kù)”，獨(dú)特的體內(nèi)生理環(huán)境成為其參與全身炎性反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）和MODS病理生理過(guò)程的重要因素，因此腸道被稱為“MODS的原動(dòng)力”[15-17]，其功能一旦受損，通透性就會(huì)增加，細(xì)菌和內(nèi)毒素就會(huì)發(fā)生移位，進(jìn)而介導(dǎo)釋放多種炎性介質(zhì)，導(dǎo)致腸道及其他內(nèi)臟器官功能損傷的加重。本研究通過(guò)對(duì)MLN、肝臟和脾臟細(xì)菌移位檢測(cè)進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，正常對(duì)照組未出現(xiàn)肝、脾和MLN培養(yǎng)陽(yáng)性，實(shí)驗(yàn)組在傷后4 h也未出現(xiàn)臟器細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，在8、12、24 h臟器細(xì)菌移位率分別為27.78%、33.33%和60.61%。各臟器樣本中細(xì)菌移位陽(yáng)性樣本共檢出44個(gè)，對(duì)檢出的細(xì)菌進(jìn)行菌種鑒定，均為革蘭陰性細(xì)菌。按菌落數(shù)統(tǒng)計(jì)，其中大腸桿菌22株，腸球菌18株，變形桿菌1株，假單孢菌4株，肺炎克雷伯菌5株，實(shí)驗(yàn)組在傷后8 h才出現(xiàn)淋巴結(jié)細(xì)菌轉(zhuǎn)移及侵犯，約24 h達(dá)高峰。由于觀察時(shí)間側(cè)重于早期發(fā)現(xiàn)，所以未進(jìn)行進(jìn)一步的觀察。結(jié)果提示，嚴(yán)重多發(fā)傷早期，約傷后8 h開始即存在腸道細(xì)菌移位，這可能與傷后腸黏膜屏障功能損害、腸內(nèi)微生態(tài)改變、腸動(dòng)力下降等因素有關(guān)。另外，臨床研究發(fā)現(xiàn)，引起腹腔感染、肝功能損害最常見的細(xì)菌大多屬于移位細(xì)菌及耐藥菌，尤其以大腸桿菌及其他腸桿菌類最為常見[18]。因此，嚴(yán)重多發(fā)傷早期重視腸黏膜通透性的防治，早期開始提高機(jī)體免疫能力，使之足以對(duì)腸道正常菌群移位造成的進(jìn)一步感染有所抵御，可能對(duì)早期腸道損傷及其他臟器功能損傷有著積極作用。

腸黏膜屏障是腸道防御機(jī)制中最重要的環(huán)節(jié)，其中機(jī)械屏障是根本。腸道機(jī)械屏障由腸黏膜表面的黏液層、腸上皮層本身及其緊密連接、黏膜下固有層、菌膜等組成。嚴(yán)重多發(fā)傷等應(yīng)激狀態(tài)下，其結(jié)構(gòu)完整性和連續(xù)性被破壞，致使機(jī)械屏障作用減弱。本研究對(duì)照組家兔腸黏膜的光鏡觀察發(fā)現(xiàn)：腸黏膜絨毛排列整齊，上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整；實(shí)驗(yàn)組家兔腸黏膜組織結(jié)構(gòu)紊亂、破壞。從形態(tài)學(xué)角度來(lái)看，嚴(yán)重多發(fā)傷早期對(duì)腸道腸黏膜屏障具有一定的損害，這一結(jié)果與腸黏膜通透性指標(biāo)[19]（DAO水平、L/M比值）改變相一致。

總之，本研究成功建立了嚴(yán)重多發(fā)傷合并AGI的動(dòng)物模型，并應(yīng)用于腸道微環(huán)境的研究。發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重多發(fā)傷早期腸道微環(huán)境改變的主要特點(diǎn)是腸黏膜通透性改變及腸道正常菌群移位，傷后8 h即可觀察到腸黏膜功能的損害及腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化。DAO、L/M比值及內(nèi)毒素水平的變化與損傷早期腸黏膜通透性改變密切相關(guān)[20]；腸道細(xì)菌移位則可能與腸道動(dòng)力改變密切相關(guān)。而損傷后腸道微環(huán)境的改變是早期AGI的主要原因之一。故臨床早期要重視對(duì)腸道通透性的防治和對(duì)移位菌群的干預(yù)。由于本研究觀察時(shí)間點(diǎn)側(cè)重于早期，故損傷后期的研究略顯不足。同時(shí)，本研究尚未對(duì)腸道動(dòng)力對(duì)菌群移位的影響及腸黏膜通透性與AGI分級(jí)的關(guān)系深入研究，若能進(jìn)一步研究其相關(guān)性，則可為進(jìn)一步研究腸道微環(huán)境的干預(yù)機(jī)制奠定一定的理論基礎(chǔ)。最后，腸黏膜通透性的改變可能與局部炎性因子釋放有關(guān)，細(xì)菌脂多糖是最有可能的刺激因素，研究細(xì)菌脂多糖及其相關(guān)信號(hào)通道改變可能對(duì)進(jìn)一步明確其發(fā)病機(jī)制有重要意義。