梁 喬
(1.遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,遼寧 沈陽(yáng) 110164;2.遼寧省動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究院,遼寧 沈陽(yáng) 110164)
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由尼多病毒目、動(dòng)脈炎病毒科、動(dòng)脈炎病毒屬的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起豬的一種高度接觸性傳染病[1],又稱藍(lán)耳病,通常性的預(yù)防主要是通過(guò)強(qiáng)制性或常規(guī)性的免疫接種。PRRSV是已知的能夠迅速變異的RNA病毒[2],變異后能夠產(chǎn)生一系列的具有廣泛表型和基因型特征的菌株,并且,病毒感染機(jī)體后在宿主體內(nèi)進(jìn)行耐受性復(fù)制從而造成持續(xù)性感染狀態(tài),具體要靠機(jī)體的免疫狀態(tài)和毒株的毒性強(qiáng)弱來(lái)判斷,一般急性病毒血癥階段持續(xù)幾個(gè)星期,慢性感染的淋巴組織可以持續(xù)幾個(gè)月[3]。加上能夠親嗜巨嗜細(xì)胞、具有較強(qiáng)的基因變異性、抗體依賴性增強(qiáng)作用[4-5]等這些生物學(xué)特征的存在,使疫苗接種的廣泛保護(hù)性免疫反應(yīng)更是難以實(shí)現(xiàn)。通過(guò)本試驗(yàn)?zāi)軌蚓C合評(píng)價(jià)免疫后抗體水平情況,以期對(duì)該病的防控提供基礎(chǔ)性依據(jù)。
1.1 材料
1.1.1 樣本采集隨機(jī)采集遼寧地區(qū)14個(gè)市外觀健康豬血清2 260份,經(jīng)過(guò)了解采集血清樣本的養(yǎng)殖場(chǎng)全部免疫接種過(guò)PRRS疫苗。
1.1.2 主要儀器及試劑洗板機(jī)購(gòu)自匯松科技發(fā)展有限公司,酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)有限公司,自動(dòng)分液器購(gòu)自Thermo Multidrop;豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自愛(ài)德士元亨生物科技。
1.2 方法采集的血液樣本靜置于室溫內(nèi),待血液凝固后(大約30 min)放置于離心機(jī)中3 000 r/min離心5 min,離心后用移液器吸取上清液放入1.5 mL離心管中,采用間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征的免疫抗體水平進(jìn)行檢測(cè),具體操作步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
2.1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率地區(qū)不同,抗體陽(yáng)性率不同,對(duì)遼寧地區(qū)不同地區(qū)的豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè),包括丹東、撫順、本溪等共14個(gè)市,結(jié)果為表1。結(jié)果表明,2016年1~12月間PRRSV抗體平均陽(yáng)性率能夠達(dá)到95.13%,其中各個(gè)地區(qū)的PRRSV抗體平均陽(yáng)性率均達(dá)到85%以上,陽(yáng)性率最高的本溪市,陽(yáng)性率為100%,陽(yáng)性率最低的是營(yíng)口市,陽(yáng)性率為85.93%。
2.2 遼寧地區(qū)不同季度豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率季度不同,抗體陽(yáng)性率不同,對(duì)遼寧地區(qū)不同季度的豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè),包括一季度(1月1日~3月31日)、二季度(4月1日~6月31日)、三季度(7月1日~9月31日)、四季度(10月1日~12月31日),統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表2。結(jié)果表明,2016年遼寧地區(qū)四個(gè)季度的豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率均達(dá)到92%以上,其中第二季度和第四季度陽(yáng)性率略高,第一季度和第三季度陽(yáng)性率略低。
2.3 遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率生長(zhǎng)時(shí)期不同,抗體陽(yáng)性率不同,對(duì)遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè),其中包括哺乳仔豬(0~21 d)、斷奶仔豬(21~35 d)、育肥豬(35 d以上)、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬及種公豬,統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表3。結(jié)果表明,斷奶仔豬的抗體陽(yáng)性率最高,為97.45%,哺乳仔豬最低,為89.65%。
表1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 1The positive rates of PRRSV antibody in different areas in Liaoning
表2 遼寧地區(qū)不同季度PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 2The positive rates of PRRSV antibodyin different quarters of a year in Liaoning
表3 遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 3The positive rates of PRRSV antibody in different age stages in Liaoning
2.4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率養(yǎng)殖類型不同,抗體陽(yáng)性率不同,對(duì)遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清樣品進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè),包括種場(chǎng)、商品代場(chǎng)戶、散養(yǎng)戶,統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表4。結(jié)果表明,三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽(yáng)性率無(wú)明顯差異,都在95%左右。
表4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 4The positive rates of PRRSV antibody in different breeding types in Liaoning
2.5 遼寧地區(qū)不同品系豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率 品系不同,抗體陽(yáng)性率不同,通過(guò)ELISA檢測(cè)方法對(duì)遼寧地區(qū)不同品系豬血清樣本進(jìn)行PRRSV抗體檢測(cè),包括長(zhǎng)白、大白、杜洛克、二元、三元,統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表5。結(jié)果表明,長(zhǎng)白豬群血清PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率最高,為97.60%,三元雜交豬群PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率最低,為74.32%。
表5 遼寧地區(qū)不同品系PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 5The positive rates of PRRSV antibody in different strains of Liaoning
對(duì)遼寧地區(qū)共14個(gè)市的豬血清樣本總計(jì)2 260份進(jìn)行檢測(cè),且已知均免疫過(guò)PRRSV疫苗,豬群中PRRSV免疫抗體平均陽(yáng)性率為95.13%(2 150/2 260),由14個(gè)市豬群PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率可知,PRRSV抗體陽(yáng)性率處于85.93%~100%之間,說(shuō)明不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率亦不同,總體來(lái)講各個(gè)地區(qū)免疫效果較理想,免疫抗體合格率均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(≥70%)。由不同季度豬血清PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn),冬季的抗體陽(yáng)性率最高,為97.93%,2016年春季的抗體陽(yáng)性率最低,為92.67%,總體來(lái)說(shuō)夏季和冬季的抗體陽(yáng)性率要高于春季和秋季,說(shuō)明溫度適宜適合PRRSV的流行和傳播。
由不同生長(zhǎng)時(shí)期PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn),各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的豬血清抗體陽(yáng)性率均在90%以上,哺乳仔豬相對(duì)其他時(shí)期的來(lái)說(shuō)抗體陽(yáng)性率較低,為89.65%,陽(yáng)性率低的原因之一可能是哺乳仔豬接受疫苗免疫后產(chǎn)生的免疫抗體和抗原發(fā)生一定的中和效應(yīng),不能激發(fā)有效的集中免疫應(yīng)答,因此對(duì)免疫效果產(chǎn)生一定影響。
由不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn),種場(chǎng)、商品代場(chǎng)戶、散養(yǎng)戶PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率分別為95.22%、95.56%、94.12%,三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽(yáng)性率無(wú)明顯差異,說(shuō)明養(yǎng)殖類型對(duì)免疫抗體陽(yáng)性率的高低幾乎無(wú)影響。
根據(jù)不同品系PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn),長(zhǎng)白、大白、杜洛克、二元、三元豬血清中免疫抗體陽(yáng)性率分別為97.60%、97.07%、91.41%、95.64%、74.32%,三元的PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率明顯低于其他品系的豬群,可能是由于多個(gè)品種雜交后機(jī)體對(duì)PRRSV疫苗有一定的抵御作用。
市場(chǎng)上商品化的疫苗分為滅活苗和弱毒苗,由于滅火苗抗體產(chǎn)生較慢、帶毒時(shí)間較長(zhǎng)并且容易促進(jìn)和加強(qiáng)病毒的感染,因此,弱毒苗的使用更為普遍[6]。雖然現(xiàn)在能夠通過(guò)接種疫苗這種途徑來(lái)對(duì)病原菌的宿主、環(huán)境、相關(guān)因素等實(shí)行控制,但一些接種疫苗的動(dòng)物仍然可能受到感染[7],據(jù)認(rèn)為,局限性的疫苗失效性可能歸因于病毒的遺傳和抗原多樣性。然而,有研究強(qiáng)調(diào)在使用PRRSV疫苗接種疫苗后,免疫反應(yīng)的發(fā)展和保護(hù)之間存在高度的個(gè)體差異[8],這說(shuō)明需要更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)疫苗的有效性。據(jù)報(bào)道,機(jī)體處于不同抗體水平時(shí)接種弱毒疫苗帶毒時(shí)間亦不同[9],因此,定期做好血清學(xué)監(jiān)測(cè),特別是疫苗免疫前根據(jù)機(jī)體的抗體水平選擇適宜的時(shí)間進(jìn)行免疫能更好地阻斷免疫細(xì)胞內(nèi)野毒的感染。