梁 喬

（1.遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧 沈陽(yáng) 110164；2.遼寧省動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究院，遼寧 沈陽(yáng) 110164）

豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由尼多病毒目、動(dòng)脈炎病毒科、動(dòng)脈炎病毒屬的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起豬的一種高度接觸性傳染病[1]，又稱藍(lán)耳病，通常性的預(yù)防主要是通過(guò)強(qiáng)制性或常規(guī)性的免疫接種。PRRSV是已知的能夠迅速變異的RNA病毒[2]，變異后能夠產(chǎn)生一系列的具有廣泛表型和基因型特征的菌株，并且，病毒感染機(jī)體后在宿主體內(nèi)進(jìn)行耐受性復(fù)制從而造成持續(xù)性感染狀態(tài)，具體要靠機(jī)體的免疫狀態(tài)和毒株的毒性強(qiáng)弱來(lái)判斷，一般急性病毒血癥階段持續(xù)幾個(gè)星期，慢性感染的淋巴組織可以持續(xù)幾個(gè)月[3]。加上能夠親嗜巨嗜細(xì)胞、具有較強(qiáng)的基因變異性、抗體依賴性增強(qiáng)作用[4-5]等這些生物學(xué)特征的存在，使疫苗接種的廣泛保護(hù)性免疫反應(yīng)更是難以實(shí)現(xiàn)。通過(guò)本試驗(yàn)?zāi)軌蚓C合評(píng)價(jià)免疫后抗體水平情況，以期對(duì)該病的防控提供基礎(chǔ)性依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本采集隨機(jī)采集遼寧地區(qū)14個(gè)市外觀健康豬血清2 260份，經(jīng)過(guò)了解采集血清樣本的養(yǎng)殖場(chǎng)全部免疫接種過(guò)PRRS疫苗。

1.1.2 主要儀器及試劑洗板機(jī)購(gòu)自匯松科技發(fā)展有限公司，酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)有限公司，自動(dòng)分液器購(gòu)自Thermo Multidrop；豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自愛(ài)德士元亨生物科技。

1.2 方法采集的血液樣本靜置于室溫內(nèi)，待血液凝固后（大約30 min）放置于離心機(jī)中3 000 r/min離心5 min，離心后用移液器吸取上清液放入1.5 mL離心管中，采用間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征的免疫抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，具體操作步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率地區(qū)不同，抗體陽(yáng)性率不同，對(duì)遼寧地區(qū)不同地區(qū)的豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè)，包括丹東、撫順、本溪等共14個(gè)市，結(jié)果為表1。結(jié)果表明，2016年1～12月間PRRSV抗體平均陽(yáng)性率能夠達(dá)到95.13%，其中各個(gè)地區(qū)的PRRSV抗體平均陽(yáng)性率均達(dá)到85%以上，陽(yáng)性率最高的本溪市，陽(yáng)性率為100%，陽(yáng)性率最低的是營(yíng)口市，陽(yáng)性率為85.93%。

2.2 遼寧地區(qū)不同季度豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率季度不同，抗體陽(yáng)性率不同，對(duì)遼寧地區(qū)不同季度的豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè)，包括一季度（1月1日～3月31日）、二季度（4月1日～6月31日）、三季度（7月1日～9月31日）、四季度（10月1日～12月31日），統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表2。結(jié)果表明，2016年遼寧地區(qū)四個(gè)季度的豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率均達(dá)到92%以上，其中第二季度和第四季度陽(yáng)性率略高，第一季度和第三季度陽(yáng)性率略低。

2.3 遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率生長(zhǎng)時(shí)期不同，抗體陽(yáng)性率不同，對(duì)遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期豬血清樣本進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè)，其中包括哺乳仔豬（0～21 d）、斷奶仔豬（21～35 d）、育肥豬（35 d以上）、經(jīng)產(chǎn)母豬、后備母豬及種公豬，統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表3。結(jié)果表明，斷奶仔豬的抗體陽(yáng)性率最高，為97.45%，哺乳仔豬最低，為89.65%。

表1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 1The positive rates of PRRSV antibody in different areas in Liaoning

表2 遼寧地區(qū)不同季度PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 2The positive rates of PRRSV antibodyin different quarters of a year in Liaoning

表3 遼寧地區(qū)不同生長(zhǎng)時(shí)期PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 3The positive rates of PRRSV antibody in different age stages in Liaoning

2.4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率養(yǎng)殖類型不同，抗體陽(yáng)性率不同，對(duì)遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清樣品進(jìn)行PRRSV的抗體檢測(cè)，包括種場(chǎng)、商品代場(chǎng)戶、散養(yǎng)戶，統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表4。結(jié)果表明，三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽(yáng)性率無(wú)明顯差異，都在95%左右。

表4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 4The positive rates of PRRSV antibody in different breeding types in Liaoning

2.5 遼寧地區(qū)不同品系豬血清中PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率 品系不同，抗體陽(yáng)性率不同，通過(guò)ELISA檢測(cè)方法對(duì)遼寧地區(qū)不同品系豬血清樣本進(jìn)行PRRSV抗體檢測(cè)，包括長(zhǎng)白、大白、杜洛克、二元、三元，統(tǒng)計(jì)結(jié)果為表5。結(jié)果表明，長(zhǎng)白豬群血清PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率最高，為97.60%，三元雜交豬群PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率最低，為74.32%。

表5 遼寧地區(qū)不同品系PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率Table 5The positive rates of PRRSV antibody in different strains of Liaoning

3 討論

對(duì)遼寧地區(qū)共14個(gè)市的豬血清樣本總計(jì)2 260份進(jìn)行檢測(cè)，且已知均免疫過(guò)PRRSV疫苗，豬群中PRRSV免疫抗體平均陽(yáng)性率為95.13%（2 150/2 260），由14個(gè)市豬群PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率可知，PRRSV抗體陽(yáng)性率處于85.93%～100%之間，說(shuō)明不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率亦不同，總體來(lái)講各個(gè)地區(qū)免疫效果較理想，免疫抗體合格率均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（≥70%）。由不同季度豬血清PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn)，冬季的抗體陽(yáng)性率最高，為97.93%，2016年春季的抗體陽(yáng)性率最低，為92.67%，總體來(lái)說(shuō)夏季和冬季的抗體陽(yáng)性率要高于春季和秋季，說(shuō)明溫度適宜適合PRRSV的流行和傳播。

由不同生長(zhǎng)時(shí)期PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn)，各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的豬血清抗體陽(yáng)性率均在90%以上，哺乳仔豬相對(duì)其他時(shí)期的來(lái)說(shuō)抗體陽(yáng)性率較低，為89.65%，陽(yáng)性率低的原因之一可能是哺乳仔豬接受疫苗免疫后產(chǎn)生的免疫抗體和抗原發(fā)生一定的中和效應(yīng)，不能激發(fā)有效的集中免疫應(yīng)答，因此對(duì)免疫效果產(chǎn)生一定影響。

由不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn)，種場(chǎng)、商品代場(chǎng)戶、散養(yǎng)戶PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率分別為95.22%、95.56%、94.12%，三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽(yáng)性率無(wú)明顯差異，說(shuō)明養(yǎng)殖類型對(duì)免疫抗體陽(yáng)性率的高低幾乎無(wú)影響。

根據(jù)不同品系PRRSV的免疫抗體陽(yáng)性率可見(jiàn)，長(zhǎng)白、大白、杜洛克、二元、三元豬血清中免疫抗體陽(yáng)性率分別為97.60%、97.07%、91.41%、95.64%、74.32%，三元的PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率明顯低于其他品系的豬群，可能是由于多個(gè)品種雜交后機(jī)體對(duì)PRRSV疫苗有一定的抵御作用。

市場(chǎng)上商品化的疫苗分為滅活苗和弱毒苗，由于滅火苗抗體產(chǎn)生較慢、帶毒時(shí)間較長(zhǎng)并且容易促進(jìn)和加強(qiáng)病毒的感染，因此，弱毒苗的使用更為普遍[6]。雖然現(xiàn)在能夠通過(guò)接種疫苗這種途徑來(lái)對(duì)病原菌的宿主、環(huán)境、相關(guān)因素等實(shí)行控制，但一些接種疫苗的動(dòng)物仍然可能受到感染[7]，據(jù)認(rèn)為，局限性的疫苗失效性可能歸因于病毒的遺傳和抗原多樣性。然而，有研究強(qiáng)調(diào)在使用PRRSV疫苗接種疫苗后，免疫反應(yīng)的發(fā)展和保護(hù)之間存在高度的個(gè)體差異[8]，這說(shuō)明需要更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)疫苗的有效性。據(jù)報(bào)道，機(jī)體處于不同抗體水平時(shí)接種弱毒疫苗帶毒時(shí)間亦不同[9]，因此，定期做好血清學(xué)監(jiān)測(cè)，特別是疫苗免疫前根據(jù)機(jī)體的抗體水平選擇適宜的時(shí)間進(jìn)行免疫能更好地阻斷免疫細(xì)胞內(nèi)野毒的感染。