孫光明　董雪玉　廖秀冬　張麗陽　郭艷麗*　呂　林*　羅緒剛

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學動物科學技術(shù)學院，蘭州 730070；2．中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所礦物元素營養(yǎng)研究室，北京 100193)

吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone，PQQ)是20世紀60年代人類繼煙酰胺[煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)]和核黃素[黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、黃素單核苷酸(FMN)]后發(fā)現(xiàn)的又一種氧化還原酶的輔酶[1]，PQQ廣泛存在于動植物體內(nèi)，但動物自身不能合成，主要依靠腸道微生物合成和外源攝入獲取，PQQ被動物攝入后，在小腸被吸收，經(jīng)腎臟排出。外源PQQ對維持動物機體正常生理功能至關(guān)重要。研究發(fā)現(xiàn)，PQQ具有促進機體生長和提高細菌對毒性及輻射的耐受性[2-3]、抗氧化應激[4]、防治肝損傷[5]、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[6]等功能。目前PQQ已被歸入B族維生素，是機體必需的一種營養(yǎng)因子，在生產(chǎn)和應用中的主要形式是吡咯喹啉醌二鈉(pyrroloquinoline quinone disodium salt，PQQ·Na2)[7]。Ghirmay[8]在肉仔雞飼糧中添加0～0.8 mg/kg PQQ·Na2時發(fā)現(xiàn)，飼糧添加0.2 mg/kg PQQ·Na2可以提高肉仔雞飼料轉(zhuǎn)化效率、42日齡屠宰性能、血漿抗氧化能力并降低血漿脂質(zhì)過氧化物含量；飼糧添加0.1 mg/kg PQQ·Na2可提高血漿溶菌酶活性。孫麗敏[9]在蛋雞飼糧中添加0、0.08、0.80和1.60 mg/kg PQQ·Na2時發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加適量PQQ·Na2(0.80 mg/kg)可提高產(chǎn)蛋率，增強產(chǎn)蛋雞和雞蛋抗氧化能力，有降低雞蛋膽固醇含量的趨勢。但是，目前PQQ·Na2的研究大多集中在改善動物生長性能和提高抗氧化能力等方面，關(guān)于PQQ·Na2的安全性評價主要集中在大鼠和人上[10-11]，對肉仔雞的安全性評價尚未見報道。本研究通過測定肉仔雞生長性能、血液生理和血漿生化指標、器官指數(shù)和組織結(jié)構(gòu)變化，以評價玉米-豆粕型飼糧中PQQ·Na2添加水平對1～21日齡和22～49日齡肉仔雞的影響，為確定PQQ·Na2在肉仔雞飼糧中最高添加水平的安全系數(shù)提供科學依據(jù)，以確保其在肉仔雞生產(chǎn)中的安全應用。

1　材料與方法

1.1　試驗材料

PQQ·Na2產(chǎn)品由上海優(yōu)佰福生物科技有限公司提供，其中PQQ·Na2有效含量達到99%以上。試驗飼糧中添加的PQQ·Na2為0.1%的預混劑產(chǎn)品。

1.2　試驗設(shè)計

試驗采用單因子完全隨機設(shè)計。從北京華都肉雞公司購買300只健康商品代1日齡愛拔益加(AA)肉仔雞(公母各占1/2)，從中按體重和性別選取240只，隨機分為4個組，每組6個重復(籠)，每個重復10只雞(公母各占1/2)。

根據(jù)本實驗室前期PQQ·Na2對肉仔雞的生物學有效性評價研究結(jié)果，得到肉仔雞玉米-豆粕型飼糧中PQQ·Na2的適宜添加水平為0.1～0.5 mg/kg，將0.1 mg/kg看作是肉仔雞飼糧中PQQ·Na2的最低有效推薦添加水平，以及根據(jù)農(nóng)業(yè)部頒布的《飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價試驗指南(試行)》中的有關(guān)規(guī)定，共設(shè)置4個組，即不添加PQQ·Na2的對照組、PQQ·Na2最高有效添加水平組(為最低有效推薦添加水平的3倍)以及分別為最高有效添加水平組5和10倍的2個PQQ·Na2高水平添加組，即4個組的飼糧PQQ·Na2添加水平分別為0、0.3、1.5和3.0 mg/kg。試驗期為49 d，分為2個階段：1～21日齡和22～49日齡。

1.3　試驗飼糧

參照NRC(1994)[12]家禽營養(yǎng)需要量中肉仔雞營養(yǎng)建議量配制試驗雞1～21日齡和22～49日齡的玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1，并按上述試驗設(shè)計分別在各階段基礎(chǔ)飼糧中通過調(diào)整玉米淀粉的用量而配制4種試驗飼糧。各組試驗飼糧均以粉料形式喂給試驗雞只。

1.4　飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)管理和常規(guī)免疫按《AA肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊》進行。雞只自由采食和飲水。試驗期每天觀察記錄雞只健康狀況，如有雞只死亡，立即解剖，觀察分析病理死因，并結(jié)料。分別于試驗期第21和49天以重復(籠)為單元稱雞空腹體重和剩料量，計算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、料重比(F/G)。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items含量 Content1^21日齡 1 to 21 days of age22^49日齡 22 to 49 days of age蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.90 0.72 鈣 Ca1.00 0.90 非植酸磷 NPP0.45 0.35

1)飼料級 Feed grade。

2)微量成分為每千克飼糧提供 Micronutrients provided the following per kilogram of diets：1～21日齡 1 to 21 days of age，VA 15 000 IU， VD34 500 IU，VE 24 IU，VK33 mg，VB13 mg，VB29.6 mg，VB63 mg，VB120.018 mg，泛酸鈣 pantothenic acid calcium 15 mg，煙酸 niacin 39 mg，葉酸 folic acid 1.5 mg，生物素 biotin 0.15 mg，氯化膽堿 choline chloride 700 mg，Zn (as zinc sulfate) 60 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Mn (as manganese sulfate) 110 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 40 mg，I (as potassium iodide) 0.35 mg，Se (as sodium selenite) 0.15 mg，金霉素 chlorotetracycline 50 mg；22～49日齡 22 to 49 days of age，VA 10 000 IU，VD33 000 IU，VE 16 IU，VK32 mg，VB12 mg，VB26.4 mg，VB62 mg，VB120.012 mg，泛酸鈣 pantothenic acid calcium 10mg，煙酸 niacin 26 mg，葉酸 folic acid 1 mg，生物素 biotin 0.1 mg，氯化膽堿 choline chloride 500 mg，Cu (as copper sulfate) 8 mg，Mn (as manganese sulfate) 80 mg，F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 30 mg，Zn(as zinc sulfate)40 mg，I (as potassium iodide) 0.35 mg，Se (as sodium selenite) 0.15 mg。

3)粗蛋白質(zhì)和鈣為實測值，其余營養(yǎng)水平為計算值。CP and Ca were measured values, while the other nutrient levels were calculated values.

1.5　樣品采集與制備

于飼料配制前采集玉米、豆粕飼料原料樣品，分析粗蛋白質(zhì)和鈣含量，使配制的飼糧中上述關(guān)鍵營養(yǎng)素含量與飼糧配方值盡可能接近，并在配制飼糧時現(xiàn)場采集樣品，四分法縮小樣品量后粉碎過200目篩，置于自封袋中低溫干燥保存，以備分析飼糧粗蛋白質(zhì)和鈣含量。

分別于試驗雞的21和49日齡時，所有雞只禁食而不禁水過夜后，次日08:00分別稱雞只空腹個體活重，從每個重復籠中按籠平均體重選取2只雞(公母各1只)，翅靜脈采血10～15 mL。其中，取第1份抗凝血測定血液常規(guī)生理指標；取第2份抗凝血于3 000 r/min離心10 min，分離血漿并分裝，于-20 ℃凍存，以備分析血漿生化指標。各重復籠2只雞的全血或血漿按同等比例合并為1個樣品進行分析。

于上述第49日齡雞只采血結(jié)束后，將所有采血雞只屠宰，摘取胸腺、法氏囊、脾臟、胰臟、心臟、肺臟、肝臟、腎臟、腺胃和肌胃，另取出十二指腸、空腸和回腸擠出其中內(nèi)容物，分別稱重，計算臟器指數(shù)；測量十二指腸、空腸、回腸長度，計算小腸各段長度指數(shù)；同時觀察記錄各個臟器的形態(tài)變化。

臟器指數(shù)(%)=(器官重量/活體體重)×100；
小腸各段長度指數(shù)(%)=(小腸各段長度/
小腸總長度)×100。

各器官稱重后，每個組從其中3個重復(籠)各取1只公雞、另3個重復(籠)各取1只母雞的部分肝臟、腎臟、心臟、肺臟和脾臟，放入裝有4%福爾馬林溶液的棕色瓶中固定，以備制作切片，觀測其組織結(jié)構(gòu)。

1.6　樣品分析

1.6.1飼料原料和飼糧樣品分析

樣品經(jīng)濃硝酸和高氯酸濕法消化后，在IRIS IntrepidⅡ等離子體發(fā)射光譜儀(TE，美國)上測定飼料原料和飼糧中鈣含量；用比色法[13]測定磷酸氫鈣中的總磷含量；飼糧中的粗蛋白質(zhì)含量按凱氏定氮法[14]測定。

1.6.2全血、血漿指標分析

采用KX-21血細胞自動分析儀(SYSMEX，日本)測定血液常規(guī)生理指標(血紅蛋白含量、紅細胞壓積等)；采用TBA-40FR全自動生化分析儀(Toshiba，日本)測定血漿生化指標(谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酸磷酸激酶、堿性磷酸酶活性及尿酸氮、總蛋白、白蛋白、血糖、總膽紅素、肌酐、總膽固醇和甘油三酯含量)。

注意，如果手足干裂只見于一只手或一只腳，伴有輕度瘙癢，有可能是手足癬（手氣、腳氣），可以在上述第二步治療時加用治療腳氣的藥膏。如果手或腳同時出現(xiàn)肥厚、粗糙的皮損，并且還經(jīng)常擴展到手足背，伴有水皰，瘙癢明顯，很有可能是濕疹，這時應配合內(nèi)服抗過敏藥或除濕止癢的中藥，局部加用皮質(zhì)激素類軟膏，療效更明顯。

1.6.3組織結(jié)構(gòu)檢查

按Deng等[15]和Ashraf等[16]報道的方法進行組織結(jié)構(gòu)檢查。主要步驟為：將固定的標本經(jīng)水洗、透明、浸蠟、包埋等處理后，制成5 μm的切片，經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)染色后，在顯微鏡下觀察肝臟、腎臟、心臟、肺臟和脾臟組織結(jié)構(gòu)形態(tài)變化，并用圖像采集系統(tǒng)采集相應組織圖像。

1.7　數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

所有數(shù)據(jù)均采用SAS 9.0[17]軟件中的一般線性模型(GLM)程序進行方差分析，差異顯著者，以最小顯著差異(LSD)法比較各組間的差異顯著性。數(shù)據(jù)以平均值表示，以0.05作為本研究中各項數(shù)據(jù)的差異顯著性檢驗水平。

2　結(jié)果與分析

2.1　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞生長性能的影響

由表2可見，飼糧PQQ·Na2添加水平對1～21日齡、22～49日齡和1～49日齡肉仔雞ADG、ADFI、F/G均無顯著影響(P>0.05)。這表明在本試驗條件下，飼糧添加不同水平PQQ·Na2對肉仔雞的生長性能均無不良影響。

表2　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞生長性能的影響

數(shù)據(jù)表示6個重復籠(n=6)的平均值，每個重復籠10只雞(公母各占1/2)。

Values represent the mean of six replicate cages (n=6) with 10 chicks (half male and half female) per cage.

2.2　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血液生理指標的影響

由表3可見，飼糧PQQ·Na2添加水平對21、49日齡肉仔雞血液血紅蛋白含量、紅細胞壓積、白細胞計數(shù)和紅細胞計數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。這表明在本試驗條件下，飼糧添加不同水平PQQ·Na2對肉仔雞的血液生理指標均無不良影響。

表3　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血液生理指標的影響

數(shù)據(jù)表示5或6個重復籠(n=5或n=6)的平均值，每個重復籠2只雞(公母各1只)。

Values represent the mean of five or six replicate cages (n=5 orn=6) with 2 chicks (one male and one female) per cage.

2.3　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血漿生化指標的影響

由表4可見，飼糧PQQ·Na2添加水平對21、49日齡肉仔雞的各項血漿生化指標均無顯著影響(P>0.05)。這表明在本試驗條件下，飼糧添加不同水平PQQ·Na2對肉仔雞的血漿生化特性均無不良影響。

表4　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血漿生化指標的影響

數(shù)據(jù)表示5或6個重復籠(n=5或n=6)的平均值，每個重復籠2只雞(公母各1只)。

Values represent the mean of five or six replicate cages (n=5 orn=6) with 2 chicks (one male and one female) per cage.

2.4　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞臟器指數(shù)的影響

由表5可見，飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞各臟器指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)，且各臟器外觀未觀測到任何異常變化。這表明在本試驗條件下，飼糧添加不同水平PQQ·Na2不影響肉仔雞內(nèi)臟器官的發(fā)育。

2.5　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞主要臟器組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可見，各組49日齡肉仔雞心臟未見組織學結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為心臟被膜光滑；心肌細胞呈短柱狀，排列緊密、整齊，細胞染色均勻；心肌細胞的潤盤及橫紋間質(zhì)無炎性細胞浸潤；細胞核呈圓形或橢圓形，位于肌細胞的中央。

由圖2可見，各組49日齡肉仔雞肝臟未見組織學結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為肝小葉呈多角棱柱體，結(jié)構(gòu)規(guī)則；肝細胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列，界限清晰，呈均勻的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；肝索和肝竇結(jié)構(gòu)完整清晰。

由圖3可見，各組49日齡肉仔雞脾臟未見組織學結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為脾臟結(jié)構(gòu)清晰完整，脾小結(jié)數(shù)量和直徑未見變化；中央動脈直徑和周圍淋巴鞘厚度未見差異。

由圖4可見，各組49日齡肉仔雞肺臟未見組織學結(jié)構(gòu)變化。各組肺成鮮紅色，表面覆有漿膜；三級支氣管上皮細胞無炎性滲出物，表面微絨毛粗細一致，分布均勻；肺房隔內(nèi)淋巴細胞有形成淋巴小結(jié)；呼吸毛細管徑大小均勻一致，管腔內(nèi)無異物，上皮細胞表面光滑；呼吸毛細管周圍毛細血管豐富。

表5　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞臟器指數(shù)的影響

數(shù)據(jù)表示5或6個重復籠(n=5或n=6)的平均值，每個重復籠2只雞(公母各1只)。

Values represent the mean of five or six replicate cages (n=5 orn=6) with 2 chicks (one male and one female) per cage.

圖1　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞心臟組織結(jié)構(gòu)的影響

圖2　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響

圖3　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞脾臟組織結(jié)構(gòu)的影響

圖4　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞肺臟組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖5可見，各組49日齡肉仔雞腎臟未見組織學結(jié)構(gòu)變化。各組均表現(xiàn)為腎臟皮質(zhì)部腎小球似球體，體積適中，結(jié)構(gòu)正常，腎小球外有腎小囊包繞，囊腔清晰；腎小管上皮細胞結(jié)構(gòu)正常，胞漿均質(zhì)紅染；髓質(zhì)小體的集合管上皮細胞胞漿較均質(zhì)。

以上結(jié)果表明，在本次試驗條件下，飼糧添加PQQ·Na2的各組肉仔雞主要臟器均未觀測到其顯微結(jié)構(gòu)和形態(tài)的組織學結(jié)構(gòu)變化。

圖5　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞腎臟組織結(jié)構(gòu)的影響

3　討　論

3.1　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞生長性能的影響

研究表明，PQQ具有類維生素的作用[18]，其促生長的作用可能與增強生物體生長、發(fā)育信號轉(zhuǎn)導過程中的RSA基因的表達有關(guān)[19]，是動物生長、發(fā)育和繁殖必需的營養(yǎng)因子。張亞男等[7]研究發(fā)現(xiàn)，給肉仔雞提供氧化鴨油、新鮮鴨油和氧化鴨油加0.4 mg/kg PQQ·Na2的3種飼糧，飼糧添加PQQ·Na2有改善氧化鴨油組肉仔雞生長性能的趨勢，但無顯著影響。Wang等[20]在飼糧中添加0～0.4 mg/kg PQQ·Na2，結(jié)果表明飼糧添加PQQ·Na2對肉仔雞前、后期及全期生長性能無顯著影響。Samuel等[21]在肉仔雞飼糧中添加0～0.8 mg/kg PQQ·Na2，得出與Wang等[20]相似結(jié)果。本試驗研究表明，飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞的生長性能均無顯著影響，與前人的研究結(jié)果相似，說明在本試驗條件下，飼糧添加PQQ·Na2對肉仔雞的生長無不良影響。

3.2　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血液生理指標的影響

動物血液中血紅蛋白含量和紅細胞壓積等血液常規(guī)指標可作為衡量機體健康狀況的依據(jù)。本試驗研究結(jié)果表明，飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血紅蛋白含量及紅細胞壓積等血液指標均無顯著影響。王麗云等[22]研究結(jié)果顯示，設(shè)PQQ水平高、中、低3個劑量組，分別用含3.8、7.5、15.0 mg/kg(相當于人體推薦量300倍)受試物給小鼠灌胃給藥90 d，結(jié)果與空白對照組沒有顯著差異，與本試驗結(jié)果相似。這表明在本試驗條件下，飼糧添加PQQ·Na2對肉仔雞血液生理指標無不良影響。

3.3　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞血漿生化指標的影響

血漿總蛋白和白蛋白的含量在一定程度上可以反映機體蛋白質(zhì)的合成和代謝狀況。血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是反映機體肝功能的重要指標，當肝臟受到損傷時，血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性會升高；血漿中肌酸激酶活性能反映出心肌細胞受損的水平；堿性磷酸酶多存在于骨骼及肝臟中，可以將相應底物去磷酸化產(chǎn)生磷酸，然后與鈣結(jié)合沉積于骨骼中，肝臟或成骨細胞出現(xiàn)損傷時，堿性磷酸酶活性會升高[23]。本試驗研究結(jié)果顯示，飼糧PQQ·Na2添加水平對血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶、堿性磷酸酶活性及總蛋白、肌酐、總膽紅素和葡萄糖含量等血漿生化指標均無顯著影響，這與孫麗敏[9]和Wang等[20]研究結(jié)果相似，表明飼糧中添加PQQ·Na2對肉仔雞血漿生化指標均無不良影響。

3.4　飼糧PQQ·Na2添加水平對49日齡肉仔雞臟器指數(shù)的影響

免疫器官指數(shù)和消化器官指數(shù)是反映動物免疫和消化功能的重要參考指標。本試驗研究結(jié)果表明，飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞免疫器官指數(shù)和消化器官指數(shù)均無顯著影響。Samuel等[21]的研究結(jié)果也表明，飼糧PQQ·Na2水平不影響肉仔雞的相關(guān)免疫器官指數(shù)(胸腺、脾臟和法氏囊)和溶菌酶活性。以上結(jié)果表明，飼糧添加PQQ·Na2不影響肉仔雞主要內(nèi)臟器官的發(fā)育。

3.5　飼糧PQQ·Na2添加水平對肉仔雞主要臟器組織結(jié)構(gòu)的影響

臟器的組織結(jié)構(gòu)是反映動物機體新陳代謝的重要指標。在本試驗中，肉仔雞飼糧添加不同水平PQQ·Na2后，未觀測到心臟等主要內(nèi)臟器官組織顯微結(jié)構(gòu)和形態(tài)的組織結(jié)構(gòu)變化。王麗云等[22]通過給小鼠灌服高、中、低(3.8、7.5、15.0 mg/kg)3個水平的PQQ，對照組飼喂普通飼糧，灌胃容積為10 mL/kg體重，發(fā)現(xiàn)小鼠臟器出現(xiàn)輕微變化，但未發(fā)現(xiàn)明顯的組織結(jié)構(gòu)病變。趙芹[24]的研究表明，用濃度為50～400 nmol/L PQQ·Na2處理30周齡海蘭褐蛋雞肝臟細胞，發(fā)現(xiàn)肝臟細胞存活率與正常對照組相比沒有顯著影響，表明50～400 nmol/L PQQ·Na2未能對體外培養(yǎng)的蛋雞原代肝細胞產(chǎn)生毒性作用。這與本試驗結(jié)果基本相似，表明飼糧添加PQQ·Na2不會引起肉仔雞重要組織的結(jié)構(gòu)變化。

本試驗研究結(jié)果顯示，飼糧添加0、0.3、1.5和3.0 mg/kg PQQ·Na2并未對肉仔雞生長性能、血漿生化指標、血液生理指標、免疫器官及主要臟器發(fā)育造成不良影響，因此，建議肉仔雞飼糧中PQQ·Na2的最高有效添加水平為0.3 mg/kg，具有10倍的安全系數(shù)，對肉仔雞飼喂是安全的。有研究表明，PQQ作為一種生長因子，可激活對細胞生長、繁殖和分化有重要作用的轉(zhuǎn)錄蛋白和轉(zhuǎn)錄因子，從而引起細胞生長、分化和存活，達到促進動物體生長的目的[25]。而本試驗結(jié)果表明，飼糧添加PQQ·Na2對肉仔雞的生長性能并沒有產(chǎn)生影響，可能因為動物品種和環(huán)境的差異引起，且動物機體存在一定的耐受性，所以在本試驗的添加水平下，PQQ·Na2未能對肉仔雞各指標產(chǎn)生影響。

4　結(jié)　論

飼糧中添加0～3.0 mg/kg的PQQ·Na2對肉仔雞生長性能、血常規(guī)指標、血漿生化指標和主要臟器發(fā)育均無不良影響，主要內(nèi)臟均未觀測到組織病理學變化，所有雞只均未出現(xiàn)毒性反應。因此，建議肉仔雞飼糧中PQQ·Na2的最高有效添加水平為0.3 mg/kg，具有10倍的安全系數(shù)，對肉仔雞飼喂是安全的。