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        花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主寄生力測(cè)定

        2018-07-07 01:20:58路紀(jì)芳蔡靜蕓展茂魁唐艷龍司徒春南
        生物災(zāi)害科學(xué) 2018年2期
        關(guān)鍵詞:差異

        路紀(jì)芳 ,蔡靜蕓 ,趙 斌 ,展茂魁 * ,唐艷龍 ,王 健 ,司徒春南

        (1. 貴州省遵義市林業(yè)科學(xué)研究所,貴州 遵義 563000;2. 遵義師范學(xué)院,貴州 遵義 563000)

        花絨寄甲(Dastarcus helophoroidesFaimaire),又名花絨穴甲、花絨堅(jiān)甲、木蜂寄甲和縊翅寄甲,同物異名D. longulusSharp,是 天牛類昆蟲的重要寄生性天敵。原 隸屬鞘翅目( Coleoptera)堅(jiān) 甲科( Colydiidae),后獨(dú)立出來成為穴甲科(Bothrideridae)昆蟲[1-4]。 2004 年,楊忠岐[5]認(rèn) 為這種甲蟲為寄生性昆蟲,故將其中文名改為更能反映其生物學(xué)習(xí)性的名稱——花絨寄甲。

        花絨寄甲是我國(guó)重大林業(yè)害蟲——天牛的主要天敵[4],針對(duì)其生物學(xué)特性、防治技術(shù)國(guó)內(nèi)外已經(jīng)進(jìn)行了大量研究。張彥龍等[6]研 究了花絨寄甲對(duì)松褐天牛越冬后幼蟲或蛹的控制作用以及在林間大規(guī)模防治的技術(shù)方法,結(jié)果表明花絨寄甲是松褐天牛老熟幼蟲和蛹的高效天敵。近幾年,就花絨寄甲室內(nèi)人工繁育技術(shù)許多研究者也進(jìn)行了一些研究,目前已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了其室內(nèi)人工飼養(yǎng)[7], 但花絨寄甲幼蟲對(duì)替代寄主的寄生率較低,大大增加生產(chǎn)成本,這也是影響花絨寄甲實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)的關(guān)鍵問題。為了提高替代寄主的利用率,筆者研究了花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主的寄生力,確定了花絨寄甲初孵幼蟲的最佳接蟲時(shí)間,為進(jìn)一步完善人工繁育花絨寄甲技術(shù)提供必要的依據(jù)和技術(shù)支持。

        1 材料和方法

        1.1 供試蟲源

        試驗(yàn)選取室內(nèi)新羽化的健康花絨寄甲成蟲 300 頭,隨機(jī)放入帶有蓋子的塑料培養(yǎng)盒內(nèi),蓋子四周各留1 個(gè)透氣孔(φ= 5 mm),每盒放入成蟲 30頭,共 10盒。培養(yǎng)盒內(nèi)放入水管和飼料供成蟲補(bǔ)充水分和營(yíng)養(yǎng),在盒子的中間放置一塊墊有產(chǎn)卵基質(zhì)的松木塊,待 成蟲放入后將培養(yǎng)盒放在恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)( 溫度25 ℃,濕度 60%,無(wú)光照)飼養(yǎng)。

        1.2 試驗(yàn)方法

        當(dāng)培養(yǎng)室內(nèi)的花絨寄甲成蟲開始大量產(chǎn)卵后,每天 08:00 把產(chǎn)有卵粒的基質(zhì)(卵卡)取出,并更換新的產(chǎn)卵基質(zhì)。連續(xù)取卵卡10 d,將取出的卵卡放入干凈的培養(yǎng)盒內(nèi)(第一天取出的卵卡丟掉不要),蓋上盒蓋并標(biāo)注產(chǎn)卵日期,將培養(yǎng)盒放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)(溫度 25 ℃,濕度 80%)培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)箱內(nèi)的卵卡開始孵化后,每天 08:00 把同一天孵化的幼蟲放入同一個(gè)培養(yǎng)盒內(nèi),盒內(nèi)放置一個(gè)裝有濕海綿的培養(yǎng)皿,蓋上蓋子,并在盒子上標(biāo)記日期。從卵孵化出來當(dāng)天 08:00 的幼蟲到第二天 08:00 的幼蟲,定義為 1 日齡幼蟲,第二天 08:00 的幼蟲到第三天 08:00的幼蟲,定義為 2日齡幼蟲……直到幼蟲全部死亡。

        挑選大小一致、健康程度相似的新鮮大麥蟲蛹作為替代寄主,供花絨寄甲初孵幼蟲接種。培養(yǎng)箱內(nèi)的卵開始孵化后,每天08:00 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)把不同日齡的初孵幼蟲接種在新鮮蛹腹部,每頭蛹上接 10 頭健康活躍的幼蟲。接種后的蛹放在平底離心管內(nèi),管口塞上脫脂棉,同一個(gè)處理放在同一個(gè)培養(yǎng)盒內(nèi),然后置于培養(yǎng)箱(溫度為 25 ℃,濕度為 60%)內(nèi)培養(yǎng)。每個(gè)處理 30個(gè)重復(fù)。

        替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d,每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內(nèi)幼蟲的生長(zhǎng)情況,并記錄存活幼蟲數(shù)量。接種45 d后,成蟲羽化,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)掏出每個(gè)試管內(nèi)羽化成蟲并記錄成蟲數(shù)量,如果試管內(nèi)有繭未羽化出成蟲,撥開繭看里面蟲體的狀態(tài)并做記錄。

        1.3 數(shù)據(jù)分析

        替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d,每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內(nèi)幼蟲的生長(zhǎng)情況,分別用數(shù)字 1,2,3,4,5 表示接種后5,10,15 d,化蛹期,羽化期,用i表示觀察的時(shí)間,i= 1,2,3,4,5,Li表示某時(shí)期寄主體表幼蟲或繭和成蟲的數(shù)量,D表示存活率,某個(gè)記錄時(shí)間i的存活率為:

        i=1 時(shí),Di=Li/10

        i=2,3,4,5 時(shí),Di=Li/Li-1

        本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)采用 SPSS16.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,不同處理間的均值差異采用 LSD 法多重比較。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲在替代寄主上的出蟲率

        一般情況下,在溫度為 25 ℃,濕度為 60%的培養(yǎng)箱內(nèi)花絨寄甲初孵幼蟲接種在寄主體表 45 d,成功寄生的幼蟲就會(huì)羽化為成蟲。結(jié)果表明,2 日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數(shù)最大,為 4.60 頭,最小的為 5 日齡幼蟲,2.43頭。且 1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異(df=4,149,S<0.001,F(xiàn)=4.96),而 1日齡、2日齡、3 日齡和 4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無(wú)差異(df=3,119,S=0.500,F(xiàn)=0.794)( 圖 1)。

        2.2 花絨寄甲初孵幼蟲在替代寄主上的存活

        試驗(yàn)測(cè)定了同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5,10,15 d、化蛹期和羽化期的存活率,結(jié)果表明初孵幼蟲接種后 5,1 0,1 5 d、化蛹期和羽化期的存活率均呈顯著差異(1日齡:df=4,149,F(xiàn)=46.843,S=0.000;2 日齡:d f=4,149,F(xiàn)=13.006,S=0.000;3 日齡:d f=4,149,F(xiàn)=15.080,S=0.000;4 日齡:d f=4,149,F(xiàn)=28.935,S=0.000;5 日齡:d f=4,149,F(xiàn)=30.707,S=0.000),且各日齡初孵幼蟲接種后5 d 的存活率均為最低,分別為50.67%、55.67%、48.33%、48.00%和 33.00%(圖 2) 。這表明花絨寄甲幼蟲接種到替代寄主后前 5 日是影響出蟲率的關(guān)鍵時(shí)期。

        試驗(yàn)還測(cè)定了不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5,10,15 d和蛹期的死亡率,結(jié)果表明不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異(df=4,149,F(xiàn)=7.536,S=0.000),而其它時(shí)間均無(wú)差異(df=4,149,F(xiàn)=0.093,S=0.985;df=4,149,F(xiàn)=0.414,S=0.799;df=4,149,F(xiàn)=0.527,S=0.716;df=4,149,F(xiàn)=0.998,S=0.411)。

        圖2 初孵幼蟲接種后不同時(shí)間在替代寄主體表存活率

        3 結(jié)論與討論

        花絨寄甲是大型天牛類林木蛀干害蟲最為有效的天敵昆蟲,已引起我國(guó)林業(yè)科研工作者的關(guān)注,并就如何利用該天敵昆蟲做了大量的研究和實(shí)踐工作[3]。 研究表明,花絨寄甲初孵幼蟲依靠發(fā)達(dá)的胸足迅速爬行尋找寄主,找到寄主后,在寄主幼蟲的節(jié)間咬食,咬破表皮后將頭部插入寄主體內(nèi),取食體內(nèi)物質(zhì)[1,8]。 因此在人工飼養(yǎng)過程中,明確幼蟲的最佳接種時(shí)間是有效提高寄生力的關(guān)鍵。本研究為了明確花絨寄甲幼蟲的最佳接種時(shí)間,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定了前 5 日齡花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主的寄生率,試驗(yàn)結(jié)果表明,2日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數(shù)最大,為 4.60 頭,最小的為5 日齡幼蟲,2.43 頭。且1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和 5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異,而1 日齡、2 日齡、3日齡和4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無(wú)差異。該研究結(jié)果說明在室內(nèi)進(jìn)行花絨寄甲人工繁育時(shí),可在幼蟲孵化后 2日和3 日進(jìn)行接種,以提高產(chǎn)量。

        本研究還測(cè)定了初孵幼蟲接種到替代寄主體表后不同時(shí)間的死亡率,結(jié)果表明,對(duì)于同日齡花絨寄甲初孵幼蟲,各日齡初孵幼蟲接種后5 d的死亡率均為最高,分別為 49.33%、44.33%、51.67%、52.00%和67.00%,且各日齡初孵幼蟲接種后 5,10,15 d和蛹期死亡率之間均呈顯著差異;不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲,初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異,而其它均無(wú)差異。該結(jié)果可為花絨寄甲的規(guī)模化繁育生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

        本研究中采用花絨寄甲前 5日齡初孵幼蟲進(jìn)行試驗(yàn),因?yàn)樵囼?yàn)中,在溫度為 25 ℃,濕度為 60%的培養(yǎng)箱內(nèi),無(wú)食物和水分供給的情況下,幼蟲存活第 4日活動(dòng)力就有所減弱,第 5日大量幼蟲已經(jīng)死亡,第6 日基本沒有存活的幼蟲。在文獻(xiàn)中尚沒有查到相關(guān)報(bào)道,接下來會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。

        [1]秦錫祥, 高瑞桐.花絨堅(jiān)甲生物學(xué)特性及應(yīng)用研究[J]. 昆蟲知識(shí), 1988, 25(2): 109-112.

        [2]王希蒙, 任國(guó)棟, 馬峰. 花絨穴甲的分類地位及應(yīng)用前景[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 1996, 5(2): 75-78.

        [8]王小東, 黃煥華, 許再福, 等. 花絨堅(jiān)甲的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特性研究初報(bào)[J]. 昆蟲天敵, 2004,26(2): 60-65.

        [3]魏建榮, 楊忠岐, 馬建海, 等. 花絨寄甲研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)森林病蟲, 2007, 26(3): 23-25.

        [4]楊李, 董廣平. 花絨寄甲應(yīng)用研究綜述[J]. 四川林業(yè)科技, 2012, 33(6): 76-78.

        [5]楊忠岐. 利用天敵昆蟲控制我國(guó)重大林木害蟲研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)生物防治, 2004, 20(4): 221-227.

        [6]張彥龍, 楊忠岐, 張翌楠, 等. 利用花絨寄甲防治越冬后松褐天牛試驗(yàn)[J].林業(yè)科學(xué), 2014, 50(3): 92-98.

        [7]姜嫄. 松褐天牛的天敵: 花絨寄甲繁殖生物學(xué)研究[D]. 哈爾濱: 東北林業(yè)大學(xué), 2012.

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