何志剛 伍遠(yuǎn)安* 王冬武 徐永福, 李金龍 陳建國(guó)

（1.湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所，湖南長(zhǎng)沙，410153；2.南縣豐年生態(tài)黑斑青蛙養(yǎng)殖有限公司，湖南益陽(yáng)，413200）

日益嚴(yán)重的環(huán)境污染與當(dāng)前黑斑蛙種群數(shù)量急劇銳減有密切關(guān)系。不僅殘留的除草劑和殺蟲劑對(duì)黑斑蛙造成毒害，重金屬污染對(duì)黑斑蛙造成的毒害亦極為嚴(yán)重。鑒于黑斑蛙等蛙類獨(dú)特的生活史和各發(fā)育階段的皮膚均具高滲透性，重金屬極易進(jìn)入其體內(nèi)，進(jìn)而對(duì)該類動(dòng)物造成毒害這一特點(diǎn)，學(xué)界普遍認(rèn)為黑斑蛙等蛙類胚胎及幼體的存活狀況能夠敏感地反映水質(zhì)，可用于評(píng)價(jià)和控制工業(yè)排放物，是監(jiān)測(cè)水質(zhì)的適宜前哨物種之一。黑斑蛙由于其皮膚的高滲透性、水陸兩棲等生物學(xué)特性，對(duì)環(huán)境污染極其敏感，其種群的變化與環(huán)境污染物有密切的關(guān)系。黑斑蛙皮膚具有滲透水分和交換氣體的能力，其卵膜也具有半滲透性。黑斑蛙蝌蚪生活在水環(huán)境中，化學(xué)污染物可以通過水中積累對(duì)其產(chǎn)生脅迫。植物性水環(huán)境致使水生植物對(duì)污染物的富集放大作用通過食物鏈對(duì)黑斑蛙的正常發(fā)育和生存產(chǎn)生了很大作用。水環(huán)境周圍的一些小型動(dòng)物通過食物鏈積累污染物，變態(tài)后的黑斑蛙多數(shù)食用這些動(dòng)物，通過食物鏈進(jìn)一步放大致使中毒。

稻田是黑斑蛙長(zhǎng)期自然生存的環(huán)境之一，稻田重金屬污染對(duì)黑斑蛙的早期發(fā)育具有明顯的影響。這種影響主要表現(xiàn)為能使處于孵化期和開口期的胚胎致死（致死率隨濃度的升高而升高）以及影響蝌蚪的正常發(fā)育（發(fā)育緩慢及畸形）。隨著我國(guó)化工業(yè)的迅猛發(fā)展，化工業(yè)廢料所造成的環(huán)境污染也愈來愈嚴(yán)重。某些廢料中含有大量的重金屬離子，如果對(duì)這些廢料不加處理直接排入水中，將會(huì)對(duì)包括黑斑蛙在內(nèi)的所有水生生物產(chǎn)生影響。這不僅不利于漁業(yè)發(fā)展，并且重金屬離子通過生物鏈的級(jí)聯(lián)放大作用逐級(jí)傳遞并逐漸累積，將會(huì)對(duì)終極消費(fèi)者人類產(chǎn)生極大的危害。

一、重金屬的毒性機(jī)理

動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育本身需要礦物元素 （如Cu2+、Zn2+、Mn2+等），過量吸收重金屬才會(huì)有害。重金屬的毒性機(jī)理較為復(fù)雜，已提出的毒性機(jī)理包括離子及分子模擬、干擾細(xì)胞黏附和通信、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、遺傳毒性（DNA損傷）、細(xì)胞周期紊亂等。目前 Cd2+、Pb2+、Cu2+等重金屬對(duì)蛙蟾類的毒害，多是從氧化應(yīng)激角度開展的研究，過量的重金屬能導(dǎo)致體內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧自由基，這些活性氧自由基可以引起DNA單鏈或雙鏈的斷裂、生物大分子和脂質(zhì)過氧化、膜脂質(zhì)過氧化及酶失活等，引起機(jī)體氧化應(yīng)激，進(jìn)而引起一系列生理生化代謝紊亂，導(dǎo)致傷害發(fā)生，甚至死亡。另外，許多重金屬能與蛋白質(zhì)、酶、谷胱甘肽等中所含的SH基團(tuán)發(fā)生作用，形成牢固的硫醇基，從而使一些物質(zhì)的功能受到抑制，破壞細(xì)胞的基本代謝。重金屬進(jìn)入蛙體后，同時(shí)或先后作用于神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟和腎臟等“要害”器官，即產(chǎn)生多系統(tǒng)性、多器官性的毒害作用。

目前重金屬污染對(duì)黑斑蛙毒性影響的研究多是采用急性毒性試驗(yàn)，雖然短期毒理測(cè)試較快、簡(jiǎn)便、費(fèi)用低，但忽略了重金屬的積累特性及其毒性的累積效應(yīng)。暴露時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有重要影響，短期暴露可能忽略了重要的生態(tài)毒理學(xué)現(xiàn)象，很可能過高或過低估計(jì)了重金屬的生態(tài)毒性。因此，有必要多從亞急性或慢性毒性角度來進(jìn)一步研究重金屬對(duì)蛙蟾類毒性的影響。由于工業(yè)廢水多呈不連續(xù)排放，自然界中重金屬污染物的存在也可能是斷斷續(xù)續(xù)的，研究水中重金屬被 “清除”后，染毒動(dòng)物的恢復(fù)情況亦極為重要。稻田環(huán)境中常有多種重金屬同時(shí)存在的情況，而多種重金屬共存時(shí)其聯(lián)合毒性機(jī)理非常復(fù)雜，不能簡(jiǎn)單地由各單一重金屬毒性相加來判斷毒物的綜合毒性。

黑斑蛙皮膚是毒物進(jìn)入蛙體的主要途徑。研究實(shí)驗(yàn)中，除了胚胎及蝌蚪都直接浸于毒液中，多數(shù)學(xué)者將黑斑蛙成體也浸置于毒液中，讓毒物自然滲入動(dòng)物體內(nèi)，無論在時(shí)間上還是劑量上，更接近毒物實(shí)際進(jìn)入過程；也有學(xué)者采用將毒物注射入動(dòng)物腹腔或皮下的方法，雖然劑量容易控制，但蛙體生理生化反應(yīng)可能偏激。

黑斑蛙重金屬致死劑量，絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者選擇的指標(biāo)是LC50（半致死劑量），但有些學(xué)者則采用分別觀測(cè)和統(tǒng)計(jì)LC10、LC50和LC90這樣更全面更準(zhǔn)確的指標(biāo)。

二、重金屬對(duì)黑斑蛙的毒害效應(yīng)

當(dāng)?shù)咎镏心撤N或某幾種重金屬達(dá)到或超過一定濃度時(shí)，即會(huì)不同程度地對(duì)黑斑蛙胚胎、蝌蚪及蛙體造成多方面的毒害。除了造成死亡率上升外，還表現(xiàn)在以下若干方面。

重金屬能增加卵膠膜的通透性，使胚胎能從外界獲得更多的氧氣而加快發(fā)育速度，進(jìn)而縮短胚胎出膜時(shí)間。不同重金屬透過卵膠膜進(jìn)入胚胎內(nèi)積累的量或?qū)ε咛サ亩拘源笮〔灰辉斐刹煌瑵舛扔绊懗瞿ぢ市Ч煌?/p>

重金屬會(huì)不同程度地抑制蝌蚪發(fā)育，這很可能是重金屬抑制甲狀腺激素通路造成的，也有可能是重金屬抑制紅細(xì)胞的生成，造成供氧不足，能量利用率降低，代謝損耗增加，從而導(dǎo)致蝌蚪生長(zhǎng)延緩。另外，體內(nèi)積累大量重金屬后，可能使動(dòng)物的攝食量減少，最終導(dǎo)致個(gè)體生長(zhǎng)緩慢，變態(tài)延遲。

重金屬造成蝌蚪畸形主要表現(xiàn)為尾部異常彎折，這可能與尾部神經(jīng)最易遭受重金屬毒害有關(guān)。重金屬不僅對(duì)蛙心臟、眼、中樞神經(jīng)、骨骼產(chǎn)生致畸作用，精子生成、發(fā)育和活化受到抑制或精子出現(xiàn)畸形。

對(duì)染毒后蝌蚪、蛙蟾成體器官形態(tài)或組織顯微結(jié)構(gòu)觀察發(fā)現(xiàn)，肝臟和腎臟組織結(jié)構(gòu)受損，精巢血管受損，心肌、脊髓和腦結(jié)構(gòu)受損。

由于尾部畸形，加上神經(jīng)系統(tǒng)受損，蝌蚪對(duì)外界刺激反應(yīng)的靈敏度及游泳運(yùn)動(dòng)能力下降。游泳能力的下降，進(jìn)而導(dǎo)致蝌蚪反捕食能力降低。黑斑蛙受到低濃度重金屬影響后雖能完成變態(tài)，但登陸幼蛙體形偏小或體重較小。這不僅造成黑斑蛙生存率下降，性成熟率也降低，同時(shí)較小的體形會(huì)降低生殖適合度，進(jìn)而影響種群動(dòng)態(tài)。

三、重金屬對(duì)黑斑蛙的毒害影響

人類各種各樣的生產(chǎn)活動(dòng)，如污水灌溉、重金屬制品以及化肥使用等造成的重金屬污染一直是引人關(guān)注的環(huán)境問題。重金屬離子具有很強(qiáng)的富集性，很難在環(huán)境中降解，且超過一定濃度后對(duì)黑斑蛙都有害，可以與蛋白質(zhì)及各種酶發(fā)生強(qiáng)烈的相互作用，使其失去活性，也可在某些器官中富集，造成黑斑蛙的急性中毒、亞急性中毒和慢性中毒等。

目前稻田研究較多的重金屬為鉛 （Pb2+）、鎘（Cd2+）、銅（Cu2+）、鋅（Zn2+）、硒（Se2+）、鋁（Al3+）、鉻（Cr3+）和汞（Hg2+）。在稻田實(shí)際種植環(huán)境中，污物中的重金屬主要也是這幾種。其中，研究最多，對(duì)黑斑蛙蝌蚪的毒性大小為 Hg2+＞Cu2+＞Cd2+＞Cr3+＞Pb2+。

隨著廢水的排放，水域污染日益嚴(yán)重。其中鉛是最常見的重金屬之一，當(dāng)鉛離子濃度超過國(guó)家規(guī)定的農(nóng)田水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，就會(huì)對(duì)水生生物產(chǎn)生一定的毒害作用，進(jìn)而對(duì)位于食物鏈上層的哺乳動(dòng)物造成毒害。鉛是生物體許多酶的抑制劑，其毒性機(jī)理主要是抑制血紅素的合成，通過皮膚、消化道、呼吸道進(jìn)入體內(nèi)與多種器官結(jié)合，從而影響神經(jīng)遞質(zhì)的代謝并產(chǎn)生多系統(tǒng)性、多器官性的毒害作用。鉛對(duì)胚胎期的毒性于孵化期和開口期表現(xiàn)顯著，能影響黑斑蛙胚胎期和蝌蚪期的生存率，對(duì)蝌蚪的生長(zhǎng)發(fā)育具有明顯的抑制作用。均導(dǎo)致蝌蚪頭部泡狀膨大、“S”型尾和形體較小。

汪美貞等（2012）以三種酶活性為指標(biāo)，進(jìn)行了長(zhǎng)期鉛暴露對(duì)雄性黑斑蛙生殖毒性的研究，隨著鉛染毒劑量的增加，Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活性被誘導(dǎo)，Ca2+-Mg2+-ATP酶活性被抑制，當(dāng)Ca2+-Mg2+-ATP酶的抑制程度超過前兩種酶的代償機(jī)制時(shí)，會(huì)抑制精子的發(fā)生，進(jìn)而導(dǎo)致雄性生殖毒性；如細(xì)胞受損，精子總數(shù)受到影響，以及生精細(xì)胞受損，精子質(zhì)量受到影響。施蔡雷等（2010）報(bào)道黑斑蛙精巢MDA含量隨鉛、鎘暴露濃度的升高而明顯增加，且呈明顯的濃度-效應(yīng)關(guān)系。說明低水平鉛、鎘的長(zhǎng)期暴露對(duì)黑斑蛙精巢具有一定的損傷作用。GSH-Px活性對(duì)鉛、鎘暴露響應(yīng)最敏感，是指示鉛、鎘暴露的優(yōu)選生物標(biāo)志物。

賈秀英等（2009）報(bào)道隨鉛染毒劑量的升高，黑斑蛙精子數(shù)量下降，精子畸形率呈劑量依賴性增加，精子活動(dòng)率呈劑量依賴性降低，血清中T水平明顯下降，E2水平則明顯升高，且均呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。鉛暴露對(duì)黑斑蛙精巢有明顯的毒性作用。低水平鉛的長(zhǎng)期暴露可干擾生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)，造成生殖功能紊亂，從而對(duì)精巢組織造成一定的損害作用。黑斑蛙肝臟 CAT對(duì)水環(huán)境中鎘和鉛等重金屬反應(yīng)靈敏，可以用其指示低劑量重金屬的早期污染。

重金屬鎘（Cd）是典型的工業(yè)毒物和環(huán)境污染物，對(duì)機(jī)體具有多器官和組織毒性。精巢是鎘作用的重要靶器官，對(duì)生殖功能具有較大的影響。鎘能促進(jìn)活性氧自由基的產(chǎn)生，使機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。鎘是環(huán)境中普遍存在的、具有代表性的重金屬，是一種生物非必需的有毒元素，可在有機(jī)體內(nèi)與生物成分結(jié)合為金屬絡(luò)合物或金屬螯合物，從而導(dǎo)致酶失活或者使生物活性分子的生理功能受到抑制，從而影響酶的活性、鈣和磷的代謝、生長(zhǎng)激素的分泌等，并具有明顯的致突變、致畸和致癌作用。

3.2.1 鎘對(duì)黑斑蛙精巢影響

研究者在光鏡下觀察精巢組織的顯微結(jié)構(gòu)變化，結(jié)果表明，鎘具有毒性效應(yīng)，可以導(dǎo)致處理后的黑斑蛙精巢組織中的各級(jí)生精細(xì)胞、支持細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞受到損傷。重金屬鎘對(duì)精巢發(fā)育、呼吸及神經(jīng)系統(tǒng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等途徑均有不良影響，被認(rèn)為是造成兩棲動(dòng)物種群數(shù)量急劇下降的重要原因之一。曹慧等（2012）通過對(duì)鎘暴露后的黑斑蛙精巢活性氧自由基（ROS）、蛋白質(zhì)羰基（PCO）以及DNA蛋白質(zhì)交聯(lián)等指標(biāo)的系統(tǒng)分析，研究指出鎘誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生ROS，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)氧化損傷以及DNA損傷，說明精巢組織ROS的產(chǎn)生是鎘致雄性生殖毒害效應(yīng)機(jī)制的重要因素之一。

賈秀英等（2013）研究結(jié)果顯示，鎘可干擾兩棲動(dòng)物精巢組織抗氧化和解毒的能力，從而導(dǎo)致明顯的生殖毒效應(yīng)，黑斑蛙精巢中乙氧基異酚惡唑脫乙基酶、紅霉素 N-脫甲基酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶活性的響應(yīng)可用來評(píng)價(jià)環(huán)境中低水平Cd的污染效應(yīng)。鎘可引起黑斑蛙精子數(shù)量減少和精子畸形率增加，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系；亞急性鎘暴露對(duì)黑斑蛙精巢有明顯的毒性作用，其機(jī)制與鎘致黑斑蛙精巢組織標(biāo)志酶活力的降低和精巢脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)。

3.2.2 鎘對(duì)黑斑蛙遺傳影響

賈秀英等（2011）采用慧星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其精巢細(xì)胞 DNA損傷，報(bào)道指出ROS水平、MDA含量以及精巢細(xì)胞尾長(zhǎng)和尾相與鎘暴露濃度之間均呈濃度-效應(yīng)關(guān)系。研究者得出鎘引起兩棲動(dòng)物黑斑蛙雄性生殖毒性的主要機(jī)制是誘導(dǎo)產(chǎn)生自由基并導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化損傷作用增強(qiáng)及DNA損傷。

3.2.2 鎘對(duì)黑斑蛙肝腎影響

賈秀英等（2006）研究了在不同濃度鎘(10～40 mg/L)中暴露30d黑斑蛙臟器組織的亞慢性毒性效應(yīng)。結(jié)果表明，當(dāng)鎘暴露濃度＞30mg/L時(shí)，黑斑蛙的肝臟指數(shù)顯著減少。黑斑蛙肝臟、腎臟和心臟Na+-K+-ATPase活性隨著Cd2+濃度的升高而降低，表現(xiàn)出明顯的濃度-效應(yīng)關(guān)系。酶活性的變化在一定程度上反映了鎘對(duì)黑斑蛙的損傷作用。黑斑蛙在較低濃度鎘的30d長(zhǎng)期暴露下，肝、腎組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著升高，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生氧化損傷。在鎘長(zhǎng)期暴露下，細(xì)胞膜過氧化增強(qiáng)是鎘傷害機(jī)體的主要原因，而GSH含量、SOD活性的升高則可能是機(jī)體抗過氧化的機(jī)理之一。

徐敬明等（2005）研究表明鎘在黑斑蛙器官組織的積累具有選擇性，主要積累在腸和肝臟中，其次是皮膚、肌肉，而骨骼中沒有積累。動(dòng)物體的肝臟作為重要的解毒器官，使其成為重金屬蓄積的重要靶器官，致使鎘在黑斑蛙的肝臟得以大量積累。兩棲類的皮膚濕潤(rùn)裸露，滲透性強(qiáng)，進(jìn)行皮膚呼吸，因此對(duì)鎘的積累作用明顯。

賈秀英等（2010）報(bào)道黑斑蛙肝臟中鎘的積累量、GSH（還原型谷胱甘肽）和MT（金屬硫蛋白）含量均隨著鎘暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著升高，具有明顯的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。鎘可對(duì)黑斑蛙肝臟造成氧化損傷，而GSH、MT含量的升高則可能是機(jī)體抗氧化損傷的機(jī)理之一。研究者指出低濃度鎘的長(zhǎng)期暴露可引起黑斑蛙肝蛋白質(zhì)氧化損傷和 DNA損傷，誘導(dǎo)產(chǎn)生大量自由基可能是導(dǎo)致蛋白質(zhì)和DNA產(chǎn)生損傷的主要機(jī)制之一。鎘對(duì)兩棲動(dòng)物具有蛋白質(zhì)氧化損傷作用和遺傳毒性作用，說明機(jī)體中過量的自由基堆積而引起組織蛋白質(zhì)氧化損傷，可能是鎘對(duì)黑斑蛙肝蛋白毒理作用的主要機(jī)制之一。

銅是生命必需的微量元素，作為氧化還原催化劑或氧的載體參與生物體內(nèi)多種酶的組成，但超過一定濃度就會(huì)產(chǎn)生毒性效應(yīng)，例如，水中的銅一旦被黑斑蛙蝌蚪的鰓截留，將隨血液迅速轉(zhuǎn)移到其他器官中，并主要積累在肝部，當(dāng)儲(chǔ)存超過一定量后，可以使血液中的血紅蛋白變性、乳酸脫氫酶等巰基酶活性受抑制，從而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒性作用。張曼華（2009）報(bào)道銅離子使黑斑蛙蝌蚪紅細(xì)胞核異常率明顯提高，其平均紅細(xì)胞核異常率達(dá)到0.22%。銅離子一定的處理時(shí)間和質(zhì)量濃度下對(duì)蛙蝌蚪紅細(xì)胞有顯著的誘突變作用。

鉻是動(dòng)物有機(jī)體必需的微量元素之一，對(duì)動(dòng)物新陳代謝等生命活動(dòng)具有較大的作用，參與動(dòng)物體內(nèi)的糖、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝，有降低血糖的作用，如果動(dòng)物體內(nèi)鉻（Cr6+）含量過高，就會(huì)在細(xì)胞內(nèi)還原為Cr3+而構(gòu)成致癌物質(zhì)。

鉻是許多合金中的重要金屬，其化合物在工業(yè)生產(chǎn)中可通過多種途徑進(jìn)入環(huán)境中，已成為環(huán)境污染中毒性最大的重金屬之一。生理pH下，鉻通常以鉻酸鹽的形式存在，被吸收后主要富集于腎臟、肝臟等，尤其是腎臟。Cr6+對(duì)環(huán)境生物具有較強(qiáng)的毒性，可嚴(yán)重影響動(dòng)物中樞神經(jīng)、骨骼和眼的分化，引起睪丸萎縮和附睪精子減少、細(xì)胞 DNA損傷以及誘發(fā)肺癌的發(fā)生。王坤英等（2007）結(jié)合單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)，使用12.5umol/L以上的重鉻酸鉀（K2Cr2O7）溶液對(duì)黑斑蛙外周血細(xì)胞具有明顯的DNA鏈斷裂損傷誘導(dǎo)效應(yīng)，重鉻酸鉀對(duì)黑斑蛙胚胎發(fā)育的影響不明顯，高濃度組重鉻酸鉀對(duì)黑斑蛙蝌蚪的生長(zhǎng)發(fā)育則具有明顯的抑制作用。

汞在自然界主要以金屬汞、無機(jī)汞和有機(jī)汞化合物的形式存在，一般沉積在水體的底質(zhì)中，一旦進(jìn)入身體后，Hg2+能與蛋白質(zhì)、酶類或谷胱甘肽中所含的-SH發(fā)生作用，形成牢固的硫醇基，從而使這些酶類的活性受到抑制，破壞細(xì)胞的基本功能和代謝，因此，對(duì)水生生物的危害和影響極為嚴(yán)重。汪學(xué)英等（2001）報(bào)道各重金屬離子對(duì)黑斑蛙胚胎的毒性順序?yàn)椋?Hg2+＞Cu2+＞Cd2+＞Pb2+＞Cr6+，并對(duì)其原因進(jìn)行了初步分析；各重金屬離子對(duì)蝌蚪期毒性大小依次為 Hg2+＞Cu2+＞Cd2+＞Cr6+＞Pb2+。

鋅是污染重金屬之一。閆華超等（2007）不同質(zhì)量濃度的鋅離子對(duì)黑斑蛙蝌蚪的最終出膜率沒有顯著影響。鋅離子濃度越大，毒性效應(yīng)越強(qiáng)，致畸率越高?；冾愋椭饕憩F(xiàn)為：尾部呈泡狀膨大、尾部呈“S”型、頭部呈泡狀膨大、個(gè)體形態(tài)較小。鋅處理組黑斑蛙蝌蚪相比對(duì)照組死亡率明顯增加，而且濃度越高死亡率越高。

硒具有重要營(yíng)養(yǎng)功能，也是高毒性的非金屬元素，過量常會(huì)危害動(dòng)物機(jī)體的生理機(jī)能，其中以無機(jī)硒（如硒化氫、亞硒酸鈉等）毒性較大。早期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證明，過量的硒酸鹽和亞硒酸鹽能夠產(chǎn)生很強(qiáng)的生理毒性和遺傳毒性。祝文興等（2010）研究指出不同質(zhì)量濃度的硒酸鈉（1.25～20 mg/L）和亞硒酸鈉（0.25～4 mg/L）染毒處理7d后，黑斑蛙蝌蚪紅細(xì)胞的微核細(xì)胞率，隨染毒劑質(zhì)量濃度的升高呈先增大后減小的趨勢(shì)，核異常細(xì)胞率、總核異常細(xì)胞率均隨染毒劑質(zhì)量濃度的升高而增大。亞硒酸鈉的毒害作用明顯強(qiáng)于硒酸鈉，對(duì)黑斑蛙蝌蚪紅細(xì)胞均存在較強(qiáng)的細(xì)胞遺傳毒性。

四、總結(jié)

重金屬對(duì)黑斑蛙研究?jī)?nèi)容多限于對(duì)LC50、畸形率等的測(cè)定或統(tǒng)計(jì)，以及對(duì)重金屬脅迫下抗氧化水平的影響；對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析多是描述性的，而從深層次的等位酶角度、基因角度開展實(shí)驗(yàn)和分析重金屬毒害的研究很少，對(duì)體內(nèi)一些重要物質(zhì)（如 MT）的代謝及重金屬在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)、積累及排出機(jī)制等研究較少，黑斑蛙對(duì)重金屬敏感性不同的機(jī)理和不同重金屬相互之間的 “協(xié)同”或“拮抗”機(jī)理的研究有待加強(qiáng)。

參考文獻(xiàn)（略）