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        有機磷農(nóng)藥殘留快速定量光電檢測系統(tǒng)的設(shè)計

        2018-06-29 04:59:00陳如清錢蘇翔王慶泉
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年11期
        關(guān)鍵詞:單片機信號檢測

        陳如清, 錢蘇翔, 王慶泉

        (嘉興學(xué)院機電工程學(xué)院,浙江嘉興 314001)

        農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)過程越來越依賴農(nóng)藥和抗生素等外源物質(zhì)。農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)中的用量在我國一直居高不下,農(nóng)藥的不合理使用或濫用導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留含量不同程度超標(biāo),威脅到消費者的食用安全[1]。有機磷農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用最廣泛的殺蟲劑[2]。現(xiàn)有農(nóng)藥殘留檢測方法主要有生物測定法、理化檢測法及快速檢測法3類[3-4]。其中,活體檢測法對生物的要求較高,檢測結(jié)果難以確定具體農(nóng)藥品種;理化檢測法檢測精度高,但存在檢測耗時長且操作過程繁瑣,難以滿足實時檢測需求;快速檢驗法目前發(fā)展較快,但也存在檢測成本高和檢測靈敏度低等缺陷[5]。因此,探索一種簡單有效、快速準(zhǔn)確的農(nóng)藥殘留定量檢測方法對解決農(nóng)藥殘留問題極其重要。

        光電檢測技術(shù)是光電信息技術(shù)的主要技術(shù)之一,可實現(xiàn)多類物理參數(shù)測量、微弱光測量、紅外及激光測量、光掃描與跟蹤測量、圖像測量等。作為一項應(yīng)用范圍較廣且快速可靠的技術(shù),具有檢測靈敏度高、取樣量少、快速、簡便,可在惡劣環(huán)境下進行在線、連續(xù)監(jiān)測等優(yōu)點,在農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用成為當(dāng)今熱點之一。光電檢測技術(shù)在農(nóng)藥檢測中的應(yīng)用,主要集中在直接光譜分析技術(shù)與熒光分析法方面。將化學(xué)發(fā)光方法與光電檢測技術(shù)相融合實現(xiàn)農(nóng)藥殘留的快速定量檢測的研究還比較少[6]。本研究結(jié)合化學(xué)發(fā)光法和光電檢測技術(shù),研發(fā)一套快速定量光電檢測系統(tǒng)對農(nóng)藥殘留物進行檢測,并進行理論研究與試驗驗證。

        1 有機磷農(nóng)藥殘留檢測原理

        酶抑制檢測法是一種常用的農(nóng)藥殘留檢測方法,基于昆蟲毒理學(xué)原理,可在較短時間內(nèi)完成有機磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的檢測。與傳統(tǒng)方法比較,具有檢測成本低、效率高及易實現(xiàn)等優(yōu)點,適合農(nóng)藥殘留實時快速檢測。其基本原理為:正常情況下,酶催化乙酰膽堿水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)而產(chǎn)生黃色物質(zhì);在有機磷類農(nóng)藥存在的情況下,作為酶的抑制劑會與乙酰膽堿爭奪酶功能部位,使膽堿酯酶的正常功能遭到破壞,從而抑制了乙酰膽堿的水解與顯色,抑制率與農(nóng)藥濃度呈正相關(guān)。有機磷農(nóng)藥的存在會影響顯色體系反應(yīng)速度(可用吸光度值隨時間的變化率R表示)。設(shè)R0、Rt分別為空白樣品液(即沒有農(nóng)藥)和樣品液(可能有農(nóng)藥)的吸光度隨時間變化曲線的斜率值,則抑制率T可表示為:

        (1)

        利用乙酰膽酯酶測定農(nóng)藥殘留時,當(dāng)農(nóng)藥殘留量為0時,抑制率T為0,溶液顯黃色;當(dāng)農(nóng)藥殘留量不為0時,測定溶液顯不同程度的淡黃色。抑制率T與農(nóng)藥殘留量呈正相關(guān),可用來表示農(nóng)藥的濃度。從光電檢測角度分析,顯色體系或化學(xué)發(fā)光體系的吸光度C′與抑制率T或有機磷濃度呈負相關(guān),即:

        C′=-0.01T+1.161 3。

        (2)

        通過檢測抑制前后的光強(即在412 nm處測定吸光度隨時間的變化值),計算出抑制率,推斷是否含有有機磷農(nóng)藥,或定量分析有機磷農(nóng)藥的殘留量大小。根據(jù)光電效應(yīng)理論,當(dāng)光輻射入射到光電探測器表面時,光電材料會產(chǎn)生感生電動勢。光電器件在功率相同而波長不同的入射光輻射下,其響應(yīng)不同,即光電效應(yīng)所產(chǎn)生的電動勢不同。光電探測器如光電二極管在波長為λ的單色光照射下,輸出電壓U(λ)與入射的單色光輻射通量φ(λ)之間關(guān)系如(3)式所示。其中S(λ) 為光譜靈敏度。通過光電探測器檢測顯色體系或化學(xué)發(fā)光體系抑制前后的光強,可換算成農(nóng)藥殘留C大小。

        U(λ)=S(λ)×φ(λ)。

        (3)

        綜上所述,有機磷農(nóng)藥殘留檢測原理為:乙酰膽堿酯酶對魯米諾-過氧化氫化學(xué)發(fā)光體系有催化作用[7]。研究表明有機磷農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶有很強的抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥殘留的濃度呈正相關(guān),在一定濃度范圍內(nèi),有機磷農(nóng)藥與乙酰膽堿酯酶的活性之間存在一定的線性關(guān)系。即經(jīng)過有機磷農(nóng)藥的抑制,會導(dǎo)致魯米諾-過氧化氫-乙酰膽堿酯酶體系的化學(xué)發(fā)光強度一定程度降低。通過檢測抑制前后的光強,計算出抑制率,推斷是否含有有機磷農(nóng)藥,或定量分析有機磷農(nóng)藥的殘留量大小。研究分析表明,農(nóng)藥殘留濃度與發(fā)光強度成比例關(guān)系。按照國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,農(nóng)殘抑制率不應(yīng)超過50%,大于或等于這個數(shù)值則屬超標(biāo)。

        2 硬件系統(tǒng)設(shè)計

        2.1 光電檢測系統(tǒng)總體方案設(shè)計

        基于光強型直接測量原理設(shè)計光電檢測系統(tǒng),即將攜帶被檢測物理信息的光強,投射到光電探測器上轉(zhuǎn)換為電信號,經(jīng)放大后直接采集數(shù)據(jù)。整套光電檢測系統(tǒng)包括密封容器(光源部分,內(nèi)置發(fā)光物質(zhì)與農(nóng)藥混合物)、光電探測器(光電二極管)、微弱信號前置放大電路(含電流電壓轉(zhuǎn)換電路及信號放大電路)、濾波電路、主放大電路、A/D轉(zhuǎn)換電路、單片機控制系統(tǒng)和顯示輸出電路等模塊(圖1)。

        2.2 農(nóng)藥殘留信號檢測模塊

        由化學(xué)發(fā)光原理可知,魯米諾在堿性溶液中被過氧化氫氧化后處于激發(fā)態(tài),從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時發(fā)出最大波長為425 nm的光。綜合光電探測器的響應(yīng)率、光譜響應(yīng)及穩(wěn)定性等性能指標(biāo)和器件的工作電壓、暗電流等特性參數(shù),選擇PN結(jié)硅光電二極管(VTB5051B) 作為農(nóng)藥殘留檢測用光電探測器,其光譜響應(yīng)范圍為330~720 nm,與發(fā)光體系發(fā)光波長匹配。光電二極管具有暗電流小、線性度好及噪聲低等優(yōu)點,適宜于精密儀器儀表的光電變換場合。圖2為光電變換電路,輸入輸出關(guān)系為:

        V1=Isc×Rf=S×P×Rf。

        (4)

        式中:V1為輸出電壓,Isc表示硅光電二極管在光照下產(chǎn)生的光電流;Rf為反饋電阻,通常取值為上百MΩ,以獲得更高的電壓輸出;S為光電二極管的靈敏度;P為入射光功率,與被測農(nóng)藥殘留濃度相關(guān)。

        2.3 微弱信號放大電路

        采用化學(xué)發(fā)光法檢測農(nóng)藥殘留濃度時,一方面光電二極管接收到的光信號十分微弱,另一方面由于檢測過程不能處于絕對黑暗環(huán)境,光信號檢測易受到環(huán)境光等多種噪聲干擾[8-9]。噪聲信號經(jīng)光電轉(zhuǎn)換后也同步放大。為精準(zhǔn)測出待測光信號,需對光電變換電路進一步處理。

        通常微弱光信號通過光電探測器轉(zhuǎn)換成光電流后,其波動范圍為從pA級到mA級不等。較大的動態(tài)范圍不利于信號檢測,使用普通線性放大器難以有效實現(xiàn)信號放大[10]。另一方面,為適應(yīng)輸入信號較大的動態(tài)變化,在后續(xù)設(shè)計模數(shù)轉(zhuǎn)換電路時選用的A/D轉(zhuǎn)換器位數(shù)也需相應(yīng)增加。為解決上述問題,考慮到對數(shù)放大電路的輸出與輸入的對數(shù)成線性關(guān)系,可對輸入信號的動態(tài)范圍進行一定程度壓縮,允許輸入信號有較大波動。按照對數(shù)特性,通過對數(shù)變換可將混合信號中的噪聲信號壓縮、微弱有用信號放大,把有用信號從強噪聲背景中提取弱信號。與此同時,較寬動態(tài)變化范圍的輸入信號經(jīng)過對數(shù)壓縮處理,采用較低位數(shù)A/D轉(zhuǎn)換器就可以實現(xiàn)對信號的最大不失真變換。圖3為基于分立元件所設(shè)計的對數(shù)放大電路,采用2個特性相同的晶體管組成互補對稱電路,可消減晶體管的反向飽和電流對運算關(guān)系造成的影響。

        電路的輸入輸出關(guān)系如式(5)所示,其中參考電壓Vref為5 V;晶體管電壓VT=kT/q,k=1.38×10-23J/(kW·h),q為電子電荷量,T為絕對溫度??梢钥闯鰷囟茸兓瘯T產(chǎn)生影響,從而引起運放電路輸出電壓V2的波動。為保持輸入輸出關(guān)系穩(wěn)定,電路設(shè)計時引入1個正溫度系數(shù)的熱敏電阻RT,其溫度變化系數(shù)與晶體管PN結(jié)的變化一致,較大程度實現(xiàn)對VT的抵消補償,克服由于溫度變化而產(chǎn)生的負面影響。

        (5)

        2.4 濾波電路

        為提高檢測電路的信噪比,對從對數(shù)放大器輸出的電壓V2采用帶通濾波器對其進行濾波處理。為保證農(nóng)藥殘留的檢測精度,設(shè)計了一種“壓控電壓源二階帶通濾波”電路(圖4),去除環(huán)境噪聲和通過前置放大器引入的噪聲信號。

        2.5 主放大電路

        微弱電信號經(jīng)過前面光電轉(zhuǎn)換、對數(shù)放大和直流濾波后,為更好地滿足采樣電壓要求,還需對直流電壓信號的幅值做進一步放大處理,放大電路如圖5所示。

        2.6 信號分析處理電路

        圖6為后續(xù)信號分析與處理電路,主要包括A/D轉(zhuǎn)換電路、單片機系統(tǒng)、顯示與報警電路。按照測量需求,設(shè)計時選擇TLC1543芯片U6作為A/D轉(zhuǎn)換器,具有高速度(10 μs轉(zhuǎn)換時間)、高精度(10位分辨率,最大±1 LSB不可調(diào)整誤差)和低噪聲等優(yōu)點,能滿足本檢測系統(tǒng)實際要求。微處理器的選擇直接影響到檢測系統(tǒng)的性能,基于單片機的控制系統(tǒng)適合中低速數(shù)據(jù)的采集和處理。選用功能全面且性價比高的AT89C51單片機作為控制器,完全滿足本系統(tǒng)的要求。檢測結(jié)果顯示器件選用較為通用的LCD1602液晶顯示器。此外,單片機的P1.5口外接蜂鳴器報警電路,當(dāng)農(nóng)藥殘留濃度檢測結(jié)果超過設(shè)定閾值時,啟動蜂鳴器報警。此外,為方便用戶進行閾值設(shè)置,設(shè)計了按鍵B2、B3、B4分別對應(yīng)為閾值設(shè)置鍵和閾值加減鍵,分別與單片機P3.2、P3.3、P3.4的3個引腳相連接。

        3 軟件系統(tǒng)設(shè)計

        有機磷農(nóng)藥殘留光電檢測系統(tǒng)軟件部分結(jié)構(gòu)如圖7所示。整個軟件系統(tǒng)包括4個任務(wù)模塊,即按鍵輸入、農(nóng)藥殘留濃度信號采集、測量數(shù)據(jù)分析與處理、液晶顯示與輸出報警等。

        (1)按鍵輸入。本系統(tǒng)的鍵盤主要使用4個獨立按鍵,B1為復(fù)位鍵,B2、B3、B4分別對應(yīng)為閾值設(shè)置和閾值加減鍵。通過軟件程序查詢相應(yīng)引腳電平的高低情況,就可以判斷是否按下了按鍵以及是哪個鍵按下,并執(zhí)行對應(yīng)鍵的子程序。

        (2)農(nóng)藥殘留濃度信號采集。在系統(tǒng)初始化完成以后,光電檢測電路將農(nóng)藥殘留濃度信息轉(zhuǎn)化為1個模擬直流電壓信號,經(jīng)過A/D轉(zhuǎn)換模塊,單片機系統(tǒng)獲得代表農(nóng)藥殘留濃度的數(shù)據(jù)。

        (3)測量數(shù)據(jù)分析與處理。理論分析表明,農(nóng)藥殘留在一定的濃度范圍內(nèi),濃度與電壓(即光強)成線性關(guān)系。試驗時將配制好的不同濃度農(nóng)藥溶液注入密封容器,測出相應(yīng)的電壓。單片機將采集到的直流電壓轉(zhuǎn)化為農(nóng)藥濃度,顯示并存儲數(shù)據(jù)。

        (4)液晶顯示與輸出報警。主要將處理好的農(nóng)藥濃度數(shù)據(jù)通過液晶顯示器顯示輸出。通過鍵盤設(shè)置閾值,若農(nóng)藥殘留濃度高于設(shè)定值,啟動報警電路發(fā)出報警信號。

        4 試驗驗證

        基于上述方案,在實驗室開發(fā)了農(nóng)藥殘留檢測試驗平臺并進行試驗驗證。試驗過程中將魯米諾工作液(0.25 mmol/L)和過氧化氫工作液(濃度為10 μg/g)混合,配成魯米諾-過氧化氫發(fā)光體系試驗試劑。選用農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛采用的有機磷農(nóng)藥敵百蟲,配制不同濃度的敵百蟲工作液(0.06~0.40 mg/L不等)。將不同濃度的敵百蟲工作液添加至裝有發(fā)光體系試驗試劑的石英杯中,測量光強前后變化情況。

        根據(jù)已測數(shù)據(jù),用最小二乘法進行擬合處理,在農(nóng)藥濃度為0.14~0.34 mg/L區(qū)間內(nèi),輸出電壓對應(yīng)為881.1~232.3 mV(表1),呈現(xiàn)明顯的線性關(guān)系,擬合后的輸入輸出關(guān)系如式(6)所示。其中U為輸出電壓,C為農(nóng)藥濃度。光電檢測系統(tǒng)最低能檢測到的農(nóng)藥濃度為0.06 mg/L,可達到食品衛(wèi)生農(nóng)藥含量國家標(biāo)準(zhǔn)(即小于0.10 mg/L)。

        U=-3.236 9C+1.334 6。

        (6)

        表1 農(nóng)藥濃度與輸出電壓

        5 結(jié)論與展望

        本研究以敵百蟲農(nóng)藥為對象,進行了有機磷農(nóng)藥快速定量檢測方法研究。理論分析與試驗驗證表明,融合化學(xué)發(fā)光法和光電檢測技術(shù)開發(fā)的農(nóng)藥殘留快速檢測系統(tǒng)能有效檢測農(nóng)藥殘留濃度,具有較高的性價比。主要優(yōu)勢在于:(1)將化學(xué)發(fā)光法和光電檢測技術(shù)相結(jié)合,可有效彌補傳統(tǒng)檢測方法存在的樣品預(yù)處理過程繁瑣、耗時復(fù)雜及消耗試劑等不足,有利于實現(xiàn)農(nóng)藥殘留的快速實時高精度檢測;(2)研究一種針對微弱光信號的智能檢測方法。將單片機控制系統(tǒng)與微弱光檢測電路結(jié)合在一起,搭建了一套集微弱光電信號放大、采集和傳輸為一體的智能檢測系統(tǒng),實現(xiàn)數(shù)字化處理;(3)硬件系統(tǒng)設(shè)計時省去了檢測光源的設(shè)計,有效簡化了系統(tǒng)硬件結(jié)構(gòu)及設(shè)計復(fù)雜度。

        此后階段應(yīng)進一步完善試驗結(jié)果的誤差分析與數(shù)據(jù)處理,建立完備的農(nóng)藥殘留濃度與光強(電壓)的數(shù)學(xué)模型。在此基礎(chǔ)上對所設(shè)計的農(nóng)藥殘留檢測系統(tǒng)進行可行性分析與工程適用性評價。試驗系統(tǒng)的研制,將為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的快速檢測提供一種精準(zhǔn)高效的光電檢測解決方案,并為開發(fā)新的農(nóng)藥殘留檢測儀器提供一種新思路。檢測系統(tǒng)可直接服務(wù)于科研和農(nóng)業(yè)等相關(guān)領(lǐng)域,也可廣泛用于各級食品安全監(jiān)測部門、農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)批發(fā)基地及環(huán)境保護等領(lǐng)域的農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測,具有廣泛的應(yīng)用前景和潛在的經(jīng)濟效益。

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