孫曉蒙，孫國(guó)君*，張文舉，陳 剛，孫 浩

(1.石河子大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院, 新疆 石河子 832000；2.第四師76團(tuán)，新疆 昭蘇 835600)

硒是谷胱甘肽過氧化物酶系(GSH-Px)的活性中心，GSH-Px不僅可以清除脂質(zhì)過氧化物，還能減輕細(xì)胞膜多不飽和脂肪酸的氧化，從而保護(hù)膜結(jié)構(gòu)與功能的完整性。銅、鋅是超氧化物歧化酶(SOD)系統(tǒng)的重要組成成分，超氧化物歧化酶是生物體內(nèi)的重要抗氧化酶之一。因而機(jī)體內(nèi)硒、銅、鋅水平影響著動(dòng)物的抗氧化性能。

邵凱等[1]對(duì)中國(guó)北方放牧綿羊硒的營(yíng)養(yǎng)狀況調(diào)查表明，放牧綿羊均存在硒供給不足的現(xiàn)象，在夏季和秋季表現(xiàn)最為明顯。新疆伊犁牧區(qū)為缺硒嚴(yán)重地區(qū)，夏牧場(chǎng)放牧綿羊血液中硒元素含量低于正常值73.9%[2]。不同品種綿羊血清銅、鋅含量及抗氧化酶活力不同[3-4]，不同補(bǔ)硒方法補(bǔ)飼效果不一。本試驗(yàn)旨在通過對(duì)放牧育成母羊補(bǔ)硒，探討其對(duì)綿羊血清微量元素硒、銅、鋅含量及抗氧化性能的影響，以期為昭蘇牧區(qū)放牧綿羊生產(chǎn)提供科學(xué)的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

試驗(yàn)于2016年9月25日至10月25日，在新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第四師七十六團(tuán)優(yōu)質(zhì)細(xì)毛羊繁育基地秋季牧場(chǎng)進(jìn)行。牧場(chǎng)位于新疆伊犁昭蘇盆地西緣，平均海拔1 800 m。秋季牧場(chǎng)為山地草甸類植被，主要成分為禾本科牧草和豆科牧草。其中禾本科牧草主要包括鴨茅、圓柱披堿草、鵝觀草、假樣牧草、無芒雀麥、早熟禾等；豆科牧草包括野豌豆、牧草屬豌豆等；其它有紫花鳶尾、蓬子菜、委陵菜、草原老鸛草等。

1.2 方 法

1.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理 采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取體質(zhì)健康、年齡(7～8月齡)及體重(36.43±1.90) kg相近的新疆細(xì)毛羊育成母羊40只，隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組20只。試驗(yàn)組育成母羊一次性注射亞硒酸鈉溶液(0.05 mg/kg)，對(duì)照組不做處理，試驗(yàn)期30 d。育成母羊全天放牧飼養(yǎng)，早上8：00出牧，晚上8：00歸牧。

1.2.2 樣品采集及處理 育成母羊在試驗(yàn)前和補(bǔ)硒后30 d，清晨空腹于頸靜脈采血。3 000 r/min離心10 min，分離血清保存于-20 ℃冰箱中。

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定方法 血清微量元素硒含量采用氫化物-發(fā)生原子熒光法測(cè)定，測(cè)定儀器為北京海光AFS-230型雙道原子熒光光度計(jì)；血清微量元素銅、鋅含量采用ICP-AES法測(cè)定，測(cè)定儀器為美國(guó)熱電iCAP6000電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀。

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、銅鋅超氧化物歧化酶(CuIn-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量采用試劑盒法測(cè)定，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，測(cè)定儀器為Thermo酶標(biāo)儀(型號(hào)Multiskan FC)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 17軟件進(jìn)行One-Way ANOVA 方差分析，并用 Duncan 法進(jìn)行多重比較，以P<0.05 為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 補(bǔ)硒對(duì)育成母羊血清硒、銅、鋅含量的影響

由表1可見，試驗(yàn)前，試驗(yàn)組與對(duì)照組育成母羊血清中硒、銅、鋅含量差異不顯著(P>0.05)。注射亞硒酸鈉30 d后，試驗(yàn)組育成母羊與對(duì)照組相比，血清硒含量明顯提高，差異極顯著(P<0.01)；血清銅、鋅含量無顯著差異(P>0.05)。

表1 補(bǔ)硒對(duì)育成母羊血清硒、銅、鋅含量的影響Table 1 Effects of selenium supplementation on serum Se,Cu and Zn contents in growing ewes

注：同一指標(biāo)同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)為不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)；不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)；小寫字母相同或沒有者表示差異不顯著(P>0.05)。下同。

Note: For the same index, values with different lowercase superscripts show significant difference (P<0.05), different capital superscripts show extreme difference (P<0.01); values with same or no superscripts show insignificant difference(P>0.05). The same below．

2.2 補(bǔ)硒對(duì)育成母羊血清中抗氧化指標(biāo)的影響

由表2可知，試驗(yàn)前，試驗(yàn)組與對(duì)照組育成母羊血清中谷胱甘肽過氧化物酶、總超氧化物歧化酶、銅鋅超氧化物歧化酶活性活性及丙二醛含量差異不顯著(P>0.05)。注射亞硒酸鈉30 d后，試驗(yàn)組育成母羊與對(duì)照組相比，血清谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著提高(P<0.01)；總超氧化物歧化酶及銅鋅超氧化物歧化酶活性試驗(yàn)組高于對(duì)照組育成母羊(P<0.05)；丙二醛含量試驗(yàn)組低于對(duì)照組育成母羊，差異極顯著(P<0.01)。

表2 補(bǔ)硒對(duì)育成母羊抗氧化性能的影響Table 2 Effects of selenium supplementation on antioxidant status in growing ewes

3 討 論

一般認(rèn)為，隨飼料或添加劑進(jìn)入體內(nèi)的硒可迅速被反芻動(dòng)物吸收進(jìn)入血液。王燕燕等[5]報(bào)道，給肉羊肌肉注射亞硒酸鈉后，硒水平當(dāng)天就有所上升，第二天便可達(dá)到顯著水平，且體內(nèi)硒也可保持較長(zhǎng)時(shí)間，50 d內(nèi)無需補(bǔ)充。本試驗(yàn)表明，注射亞硒酸鈉30 d后，血清硒濃度增加并顯著高于對(duì)照組。研究表明，給綿羊注射硒對(duì)血液銅、鋅含量無顯著影響，硒與銅、鋅之間沒有頡頏作用[6-7]，本試驗(yàn)結(jié)果與其一致。但在動(dòng)物飼料中添加硒發(fā)現(xiàn)，硒與銅、鋅，銅與鋅之間存在頡頏關(guān)系[8]。這是由于補(bǔ)硒方法不同所致，硒、銅、鋅三者之間的頡頏關(guān)系發(fā)生在消化道內(nèi)的吸收階段，而注射硒避免了三者間的相互影響。據(jù)資料報(bào)道，放牧羊血清中硒、銅、鋅含量正常值分別為0.06～0.2 μg/mL、0.7～1.3 μg/mL和0.8～1.2 μg/mL[9]，本次試驗(yàn)新疆細(xì)毛羊育成母羊血清鋅含量在正常值范圍，而血清硒、銅含量處于正常值下限，所以應(yīng)考慮硒、銅的補(bǔ)充。

GSH-Px、SOD是機(jī)體抗過氧化能力的重要指標(biāo)。當(dāng)動(dòng)物硒缺乏時(shí)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體中GSH-Px活性減弱，致使組織內(nèi)產(chǎn)生的超氧陰離子(O2-)和H2O2不能及時(shí)清除，從而導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化增強(qiáng)，機(jī)體活性氧自由基水平和MDA含量顯著升高。給羔羊補(bǔ)硒GSH-Px、SOD活性增強(qiáng)、MDA含量顯著下降[10-11]。本試驗(yàn)也表明，給育成母羊補(bǔ)硒顯著提高了GSH-Px、T-SOD和CuZn-SOD的活力，MDA含量顯著降低。

T-SOD可反映機(jī)體抗氧化酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)對(duì)外來刺激的代償能力以及機(jī)體自由基代謝的狀態(tài)，血清CuZn-SOD活性受機(jī)體所吸收銅水平的影響；MDA是自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧化作用的最終分解產(chǎn)物，其含量可間接反映機(jī)體的脂質(zhì)過氧化水平。本試驗(yàn)表明，補(bǔ)硒雖然沒有影響血清中銅、鋅含量，但CuZn-SOD活力顯著提高。申小云等[12]研究發(fā)現(xiàn)，GSH-Px活力與CuZn-SOD活力呈顯著正相關(guān)，GSH-Px和CuZn-SOD活力與MDA含量呈顯著負(fù)相關(guān)。導(dǎo)致這種現(xiàn)象的原因，張捷等[13]認(rèn)為，由于機(jī)體內(nèi)抗氧化和氧化處于動(dòng)態(tài)平衡中，當(dāng)機(jī)體內(nèi)GSH-Px活力增強(qiáng)時(shí)，血清CuZn-SOD 和T-SOD得到節(jié)省所致。

4 結(jié) 論

給育成母羊注射亞硒酸鈉(0.05 mg/kg)，可提高血清中硒濃度，使育成母羊機(jī)體內(nèi)的抗氧化能力得到顯著改善，但對(duì)血清銅、鋅濃度無顯著影響。在新疆昭蘇牧區(qū)，對(duì)秋季放牧綿羊需要補(bǔ)充微量元素硒和銅。

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