劉 佳 陳 波 施建蓮 張榮平 杜帥帥 江宇凱 張 麗

(1. 昆明醫(yī)科大學海源學院，云南 昆明 650101；2. 昆明醫(yī)科大學科研實驗中心，云南 昆明 650500;3. 昆明醫(yī)科大學藥學院暨云南省天然藥物藥理重點實驗室，云南 昆明 650500;4. 昆明醫(yī)科大學生物醫(yī)學工程中心，云南 昆明 650500；5. 昆明醫(yī)科大學學報編輯部，云南 昆明 650500)

云南地理環(huán)境復雜，氣候條件多樣，素有 “植物王國” 的美譽。賓川縣位于云南省大理州，地處云嶺橫斷山脈邊緣，金沙江南岸云貴高原西南部。賓川縣橙子資源豐富，品種優(yōu)良，尤其盛產賓川臍橙和賓川血橙。橙子不僅營養(yǎng)豐富，還具有解油膩、消積食、止渴、醒酒等多種功效[1]。橙皮中富含的精油，氣味清新怡人，作為天然的食品添加劑與賦香劑，廣泛應用于食品和化妝品中[2]。此外，橙皮精油對DPPH自由基表現(xiàn)出較強的清除作用，具有較強的抗氧化作用[3]，且對多種微生物有較強的抑菌效果[4]。

目前，對蕓香科柑橘屬甜橙和贛南臍橙精油的研究比較多[5-7]，但對賓川臍橙和血橙精油的研究較少。對賓川臍橙的研究僅有對其蔗糖轉運基因的克隆和表達的分析：根據(jù)植物蔗糖轉運蛋白 (SUTs) 基因的保守序列通過RT-PCR的方法從賓川臍橙cDNA文庫中克隆到蔗糖轉運蛋白基因并進行表達分析，并通過HPLC方法對其相關的生理生化指標進行測定，研究結果表明其果肉中蔗糖的含量顯著高于果皮[8]。本研究對云南賓川臍橙和血橙精油的化學成分進行了分析，以期為云南賓川臍橙和血橙的開發(fā)與利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

云南賓川臍橙及血橙樣品 (2016年12月購于賓川臍橙及血橙種植示范基地)；揮發(fā)油測定器；恒溫電熱套；乙醚、無水硫酸鈉 (分析純，國藥集團化學試劑有限公司)；CLARUS600GC-MS型氣相色譜-質譜聯(lián)用儀 (美國Perkin Elmer公司)。

1.2 實驗方法

1.2.1精油的提取

分別取賓川臍橙、賓川血橙果皮1 000 g，分別加于圓底燒瓶中，加入適量蒸餾水，連接上揮發(fā)油測定器與球形冷凝管，以恒溫電熱套加熱，控制電熱套電壓為200 V，溫度控制在100～110 ℃之間，水蒸氣蒸餾法連續(xù)提取8 h。揮發(fā)油測定器收集精油，并用10 mL乙醚沖洗精油測量處，將提取液轉移到分液漏斗中，搖勻后靜置分層，收集乙醚層，加入無水硫酸鈉干燥，低溫回收乙醚后，得到黃色透明液體，即為臍橙精油和血橙精油，用作GC/MS分析[9]。

1.2.2精油成分的分析

色譜條件：毛細管柱DB-5MS (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)；進樣口溫度為250 ℃；載氣：高純氦 (純度 ≥ 99.999%)，流速1.0 mL/min；分流進樣，進樣量為1 μL，分流比30∶1；程序升溫：初始溫度50 ℃，保持5 min，然后每秒2 ℃升至80 ℃，再每秒3 ℃升至230 ℃，保持16 min，最后每秒12 ℃升至250 ℃，保持20 min。

質譜條件：電離方式EI+；離子化電壓70 eV；掃描范圍35～450 amu；離子源溫度230 ℃；傳輸線溫度260 ℃；WILEY、NIST08譜庫進行檢索。

2 結果與分析

2.1 賓川臍橙與血橙精油產率

賓川臍橙精油6.5 mL，產率為0.65% (精油產率=精油體積/橙皮質量 × 100%)；賓川血橙精油6.1 mL，產率為0.61%。賓川臍橙出油率略高于賓川血橙。

2.2 賓川臍橙與血橙精油成分分析

按照GC/MS條件獲得2個精油樣品的總離子流色譜，將總離子流色譜圖的結果與計算機質譜庫匹配，再根據(jù)人工解析確定精油樣品化學組分的名稱，采用峰面積歸一法計算出各組分含量 (見表1)[10]。

表1 賓川臍橙和血橙精油成分分析Table 1 Composition analysis of essential oil from Bingchuan navel orange and blood orange

由表1可知，從賓川臍橙精油中鑒別出10種化學成分，而賓川血橙中鑒別出5種化學成分，且賓川血橙中含有的5種化學成分均存在于賓川臍橙中。賓川臍橙和賓川血橙中的2, 6, 6-三甲基二環(huán)庚烯的含量分別為0.124%和0.144%，月桂烯含量分別為0.847%和0.551%，檸檬烯含量分別為97.067%和98.397%，3, 7-二甲基-1, 6-辛二烯-3-醇-2-氨基苯甲酸酯含量分別為0.837%和0.662%，癸醛含量分別為0.129%和0.247%。賓川臍橙和血橙同屬蕓香科柑橘屬，這可能是2種精油共有的5種成分的含量差異不大的原因。此外，賓川臍橙精油中還含有5種賓川血橙所沒有的化學成分，即：辛醛、(E)-3, 7-二甲基-1, 3, 6-辛三烯、4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-環(huán)己烷-1-醇、α-松油醇、1-異丙基-7-甲基-4-亞甲基-1, 2, 3, 4, 4α, 5, 6, 8α-八氫萘。

3 結論與討論

賓川臍橙和血橙精油主要成分均為檸檬烯。檸檬烯具有令人舒適的檸檬香氣，不僅可以有效去除油垢，還具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤、降血糖等多種藥理作用[11-14]。以檸檬烯為主要成分的市售藥品檸檬烯膠囊，可以用于治療膽囊炎、膽管炎、膽結石和膽道術后綜合征[15]。檸檬烯不僅具有多種藥理活性，而且具有較高的安全性。用途廣泛的δ-檸檬烯已被美國食品醫(yī)藥管理局 (FDA) 列為公認安全物質 (GRAS)。因此，富含檸檬烯的賓川臍橙和血橙是一種十分具有發(fā)展?jié)摿Φ乃幱觅Y源。

賓川臍橙含有的α-松油醇，是蕓香科柑橘屬大部分植物精油所沒有的[16]。α-松油醇廣泛應用于油墨、化工、輕工、醫(yī)藥和電訊工業(yè)中[17]。例如：用作印制鐵皮或玻璃器皿上彩的優(yōu)良溶劑，配制香皂或化妝品，配制檸檬、桃子、樹莓、櫻桃等香精[18]。因此，這不僅為賓川臍橙精油和血橙精油的鑒別提供參考，也為賓川臍橙精油的利用提供了新的思路。

賓川臍橙與血橙源于高原特色農業(yè)的綠色生態(tài)力釋放出的巨大 “紅利”。但橙子取汁后的橙皮除少量用于醫(yī)藥工業(yè)外，大部分被丟棄，橙皮加工率僅10%左右。發(fā)展橙皮加工產業(yè)將大大提高產品附加值，推動貧困地區(qū)脫貧致富。提升綠色農產品的藥用價值和產業(yè)發(fā)展，對云南發(fā)展高原特色現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)，走產出綠色高效、環(huán)境友好的現(xiàn)代農業(yè)發(fā)展道路具有重要意義。

[1] 丁曉波, 張華, 劉世堯, 等. 柑橘果品營養(yǎng)學研究現(xiàn)狀[J]. 園藝學報, 2012, 39(9): 1687-1702.

[2] 王馥, 趙麗平. 橙皮香精油的提取與應用研究[J]. 科技創(chuàng)新導報, 2011(27): 77-77.

[3] 張娟, 陳海燕, 曹艷平. 贛南臍橙皮精油的提取、成分分析及抗氧化性研究[J]. 食品科技, 2016(12): 220-224.

[4] 江慧, 陳英海. 橙皮精油提取工藝及抑菌性能的研究[J]. 化學工程與裝備, 2016(9): 23-26.

[5] 陳紅麗, 郭青云, 鐘八蓮, 等. 甜橙精油分子蒸餾組分的成分分析及其抗菌活性研究[J]. 保鮮與加工, 2017(2): 95-100.

[6] 吳均, 楊德瑩, 李抒桐, 等. 甜橙精油的化學成分、抑菌和抗氧化活性研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2016, 37(14): 148-153.

[7] 張娟, 陳海燕, 曹艷平. 贛南臍橙皮精油的提取、成分分析及抗氧化性研究[J]. 食品科技, 2016(12): 220-224.

[8] 喬璞, 陳秭君, 靳子安, 等. 云南賓川臍橙蔗糖轉運基因的克隆和表達分析[J]. 昆明理工大學學報 (自然科學版), 2015, 40(1): 74-78.

[9] 殷智超, 周海文, 閆秋婷, 等. 橙皮揮發(fā)油的提取及成分分析[J]. 皖西學院學報, 2014, 30(5): 107-108.

[10] 李軍集, 孟忠磊, 黎貴卿. 廣西白玉蘭花和葉片揮發(fā)油化學成分的GC/MS分析[J]. 西南林業(yè)大學學報, 2012, 32(6): 102-106.

[11] 曹甜, 劉曉艷, 丁心, 等. 檸檬烯的研究與應用進展[J]. 農產品加工, 2017(8): 51-54.

[12] 郝靜梅, 盛冉, 孫志高, 等. 檸檬烯抗菌性研究進展[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè), 2017, 43(2): 274-278.

[13] 黃巧娟, 孫志高, 龍勇, 等. D-檸檬烯抗癌機制的研究進展[J]. 食品科學, 2015, 36(7): 240-244.

[14] 靖麗. 柑橘精油的代謝圖譜及其主要成分δ-檸檬烯對糖脂代謝紊亂的防治作用研究[D]. 重慶: 西南大學, 2014.

[15] 馬丹, 潘娜. 旋光度法測定檸檬烯膠囊中檸檬烯的含量[J]. 農業(yè)科技與信息, 2016(25): 44-45.

[16] Gad H A, El-Ahmady S H, Abou-Shoer M I, et al. Application of chemometrics in authentication of herbal medicines: a review[J]. Phytochemical Analysis, 2013, 24(1): 1-24.

[17] Tranchida P Q, Bonaccorsi I, Dugo P, et al. Analysis ofCitrus, essential oils: state of the art and future perspectives. A review[J]. Flavour & Fragrance Journal, 2012, 27(2): 98-123.

[18] Flamini G, Tebano M, Cioni P L. Volatiles emission patterns of different plant organs and pollen ofCitruslimon[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 589(1): 120-124.