周媛 ，朱萌 ，李志賽 ，曲偉杰 ，代飛燕 ，2，肖嘯 ，2

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院，云南 昆明 650031）

小反芻獸疫是小反芻獸疫病毒引起的一種急性高度接觸性傳染病，主要感染小反芻動(dòng)物，綿羊和山羊隨著年齡的增長(zhǎng)感染率增高，幼畜發(fā)病后死亡率極高。該病為烈性傳染病，已被國(guó)際動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為A類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。

羊支原體性肺炎是由絲狀支原體山羊亞種、綿羊肺炎支原體和山羊支原體山羊亞種等支原體引起的高度接觸性傳染病。病羊臨床特征為體溫升高、咳嗽、呼吸急促，懷孕母羊感染該病會(huì)發(fā)生流產(chǎn)。小反芻獸疫和支原體性肺炎在羊發(fā)生應(yīng)激、免疫力下降時(shí)，可引起繼發(fā)、混合感染，導(dǎo)致病情復(fù)雜、免疫失敗及羊的死亡率明顯上升等。

小反芻獸疫和支原體肺炎可采用RT-PCR檢測(cè)方法檢測(cè)。

1 材料

1.1 試驗(yàn)樣品 某羊場(chǎng)的送檢綿羊一只。

1.2 臨床癥狀 送檢綿羊食欲、精神不振，被毛無(wú)光澤，高熱，呼吸困難，流清亮鼻液，口內(nèi)、齒齦出現(xiàn)紅色潰瘍，伴發(fā)腹瀉，最后死亡。

1.3 病理解剖 患羊氣管和支氣管充血、出血，有大量瘀血塊；肺與胸部粘連，呈纖維素性壞死，部分發(fā)生肝變，肺小葉間質(zhì)增寬；瘤胃出血，腸管出血嚴(yán)重；脾臟邊緣腫大，內(nèi)部出血；心包積液，腎臟腫大，表面有出血點(diǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)

采集病死綿羊病料（肺臟1份，鼻腔棉拭紙3份，心臟1份，脾臟1份，血液1份）。經(jīng)模板提取、體系擴(kuò)增、瓊脂凝膠電泳后，對(duì)觀察到的陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

圖1 小反芻獸疫PCR檢測(cè)結(jié)果

2.1 小反芻獸疫PCR檢測(cè)結(jié)果 從圖1可以看出，從右往左，一個(gè)marker，一個(gè)陰性對(duì)照，一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照，五份樣品（按數(shù)字順序依次是心臟，肺，脾及兩份鼻腔分泌物）。陽(yáng)性對(duì)照基因片段為351bp，其中肺臟和鼻腔分泌物呈陽(yáng)性。

2.2 支原體檢測(cè)結(jié)果 從圖2可以看出，兩個(gè)marker，兩個(gè)對(duì)照（其中一個(gè)陽(yáng)性，一個(gè)陰性），三個(gè)樣品（按數(shù)字順序依次為肺，血液，鼻腔分泌物）。陽(yáng)性對(duì)照基因片段為500bp，其中肺和鼻腔分泌物呈陽(yáng)性。

圖2 支原體PCR檢測(cè)結(jié)果

3 診斷

結(jié)合臨床癥狀、病理變化、實(shí)驗(yàn)室診斷，確診本例綿羊?yàn)樾》雌c獸疫和支原體混合感染。