王紅平 趙璐 楊雯

【摘要】目的：分析金枝鶴草片對(duì)SD大鼠血液生化學(xué)的影響。方法：取120只健康合格SD大鼠，按性別體重隨機(jī)分為金枝鶴草片低、中、高劑量組（1.375g/kg、2.750g/kg、5.500g/kg）、溶媒對(duì)照組（蒸餾水），每組30只，雌雄各半，連續(xù)經(jīng)口灌胃給藥3個(gè)月，停藥恢復(fù)1個(gè)月，于給藥末期（13周）和恢復(fù)期（17周）分別采用戊巴比妥鈉麻醉，腹主動(dòng)脈采血，放血處死動(dòng)物，對(duì)其進(jìn)行血液生化學(xué)檢查。結(jié)果：相較于對(duì)照組，金枝鶴草片不同劑量組ALB、ALT、AST、CREA、CHOL、CK、GLU、TP、TG、BUN、Cl-和K+出現(xiàn)降低或者升高，但量效關(guān)系不明顯，各項(xiàng)數(shù)值均處于正常生理范圍內(nèi)，其余指標(biāo)未見明顯影響，且停藥一個(gè)月后，大多數(shù)指標(biāo)均有所恢復(fù)；給藥末期，雌性低、中、高組劑量組，雄性中、高劑量組GLU均出現(xiàn)了升高現(xiàn)象，停藥一個(gè)月后，雌性各劑量組均得到有效恢復(fù)，雄性高劑量指標(biāo)有所降低，但仍高于對(duì)照組。結(jié)論：金枝鶴草片超過1.375g/kg時(shí)，可能會(huì)引起大鼠GLU升高，停止用藥后有所恢復(fù)，提示臨床應(yīng)用過程中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)血糖變化情況的監(jiān)控。

【關(guān)鍵詞】金枝鶴草片；大鼠；血液生化學(xué)；影響

【中圖分類號(hào)】 95

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A

【文章編號(hào)】 1672-3783（2018）03-03-047-01

金枝鶴草片為成都復(fù)興醫(yī)院生產(chǎn)的中藥制劑，主藥為仙鶴草、人工牛黃等，具有清熱解毒、托毒排膿、化瘀止痛、收斂止血功效，臨床用于治療肝癌，胃癌，直腸癌等消化道癌癥。本研究的主要目的為通過對(duì)SD大鼠連續(xù)3個(gè)月經(jīng)口灌服金枝鶴草片，并且經(jīng)1個(gè)月停藥恢復(fù)期后，觀察該藥物對(duì)大鼠血液生化學(xué)的影響并進(jìn)行分析，以此來提示臨床需要監(jiān)測(cè)的重點(diǎn)指標(biāo)，為臨床用藥提供科學(xué)合理的參考，總結(jié)如下。

1實(shí)驗(yàn)材料、試劑

1.1供試品和溶媒供試品為成都復(fù)興醫(yī)院提供的金枝鶴草片的原生藥粉，批號(hào)：131101，溶媒為自制蒸餾水，在常溫下進(jìn)行保存。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，SPF級(jí)，由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院&野戰(zhàn)外科研究所醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（渝）2012-0005，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：No0000055。本研究嚴(yán)格遵循本單位有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)與使用的準(zhǔn)則。

1.3主要儀器COBAS INTEGRA 400 Plus型全自動(dòng)生化分析儀，瑞士Roche公司。

1.4主要試劑主要為血液生化學(xué)試劑，均購自德國羅氏診斷有限公司。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1劑量設(shè)計(jì)[1-5]根據(jù)《中藥、天然藥物長期毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，設(shè)置一個(gè)溶媒或賦形劑對(duì)照組、3個(gè)劑量組，通過前期SD大鼠經(jīng)口灌胃金枝鶴草片14天多次給藥毒性實(shí)驗(yàn)預(yù)試結(jié)果：以最大給藥量 5.5g生藥粉/kg.bw無動(dòng)物死亡，未見明顯毒性反應(yīng)。因此將5.5g/kg.bw作為高劑量，是臨床擬用劑量的41.2倍；低劑量設(shè)為1.375g生藥粉/ kg.bw，是高劑量的1/4倍，約為大鼠的等效劑量的1.7倍，是臨床擬用劑量的10.3倍；中劑量設(shè)計(jì)為高劑量的一半，低劑量的2倍，即為2.75g生藥粉/kg.bw，是臨床擬用劑量的20.6倍。

2.2分組適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后，取120只健康合格SD大鼠，雌雄各半，按體重性別隨機(jī)分為4組，分別為金枝鶴草片低、中、高劑量組（1.375g/kg、2.750g/kg、5.500g/kg）、溶媒對(duì)照組（蒸餾水），編號(hào)標(biāo)記，雌雄分籠飼養(yǎng)，每籠5只。

2.3給藥方法連續(xù)經(jīng)口灌胃給藥3個(gè)月（按13周計(jì)），每周給藥6天，給藥時(shí)間為每天9：30到12：00，停藥恢復(fù)1個(gè)月（按4周計(jì)）。

2.4指標(biāo)檢測(cè)于給藥末期13周和恢復(fù)期17周分別對(duì)各組大鼠的血液生化學(xué)指標(biāo)進(jìn)行一次檢測(cè)，分別選取20和10只雌雄各半大鼠采血，檢測(cè)項(xiàng)目：白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、肌酐（CREA）、氯離子濃度（Cl-）、總膽固醇（CHOL）、肌酸激酶（CK）、血糖（GLU）、鉀離子濃度（K+）、鈉離子濃度（Na+）、總膽紅素（TBIL）、總蛋白（TP）、甘油三酯（TG），尿素氮（BUN）。

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析用SPSS 16.0軟件對(duì)各項(xiàng)檢查的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±sD）表示血液生化指標(biāo)，按計(jì)量資料統(tǒng)計(jì)，先選用Decriptives統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，計(jì)算其均值、標(biāo)準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)誤、均值95%的可信區(qū)間、最大值和最小值；其次采用單因素方差分析，方差齊者，采用LSD多重比較檢驗(yàn)；方差不齊者，采用Tamhane T2多重比較檢驗(yàn)。

3結(jié)果

3.1給藥末期血液生化學(xué)指標(biāo)分析給藥末期血液生化學(xué)指標(biāo)，雌性大鼠與對(duì)照組比較，低劑量組AST 和CK降低（P<0.05），CHOL和GLU升高（P<0.05）；中劑量組AST降低（P<0.05）， GLU和BUN升高（P<0.05）；高劑量組GLU升高（P<0.05）。雄性大鼠低劑量組AST和TG降低（P<0.05），Cl--升高（P<0.05）；中劑量組ALB、GLU和TP（P<0.01）升高，AST、CK和K+降低（P<0.01）；高劑量組AST、CK和K+降低（P<0.01），GLU和TP（P<0.05）升高。其余指標(biāo)未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見表1、2：

3.2停藥恢復(fù)期血液生化學(xué)指標(biāo)分析停藥恢復(fù)期血液生化學(xué)指標(biāo)，雌性大鼠與對(duì)照組比較，各劑量組均未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；雄性大鼠中劑量組ALB、ALT、CREA、TP、BUN降低（P<0.05或0.01）；高劑量組GLU和TP升高（P<0.05或0.01）。其余指標(biāo)未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

4討論

金枝鶴草片主藥為仙鶴草，國內(nèi)大量研究報(bào)道仙鶴草具有抗腫瘤、降血糖、抗氧化、抗炎等藥理活性[6-7]，也有文獻(xiàn)表明[8]其降血糖作用無明顯劑量相關(guān)性，而在本試驗(yàn)條件下，血糖出現(xiàn)一定幅度的升高，可能與給藥劑量較高，以及制劑中其他藥物的配伍影響有關(guān)。綜上所述，SD大鼠連續(xù)三個(gè)月灌服金枝鶴草片1.375、2.75和5.5g生藥粉/kg. bw三個(gè)劑量（分別為人臨床日擬用劑量的10.3、20.6、41.2倍），無動(dòng)物死亡，未見嚴(yán)重的毒性反應(yīng)，低劑量組1.375g/kg為安全劑量，若劑量增大，可能會(huì)使血糖升高，停藥后有一定程度的恢復(fù)，提示在臨床應(yīng)用過程中應(yīng)密切觀察血糖的變化，及時(shí)調(diào)整治療方案。

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