洪澤淳，熊含鴻，劉瑩瑩，簡德威，梁旭霞

（廣東省食品檢驗所，廣東廣州510435）

有機(jī)磷農(nóng)藥屬磷酸酯類或硫代磷酸酯類化合物，是當(dāng)前我國使用量最大的農(nóng)藥，具有品種多、藥效高、用途廣的特點，被廣泛地用于農(nóng)業(yè)、林業(yè)中病蟲害的防治。因農(nóng)藥使用不當(dāng)，使用量增大，導(dǎo)致有機(jī)磷農(nóng)藥殘留超標(biāo)引起食品中毒的事件時有發(fā)生，對人類身體健康造成潛在的危害[1]。世界各國家或地區(qū)都對這類農(nóng)藥在食品中的殘留量制定了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留檢測技術(shù)也一直備受關(guān)注。

近年來，農(nóng)藥殘留的現(xiàn)場快速檢測技術(shù)發(fā)展迅速，如酶抑制法[2-8]、酶聯(lián)免疫法[9-13]和生物傳感器法[14-16]等，但快速檢測方法適用范圍相對較狹窄，存在易出現(xiàn)假陽性，重現(xiàn)性差，難以定量檢測等缺點。而傳統(tǒng)檢測方法，如氣相色譜法[18-22]、高效液相色譜法[23]、氣/液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[24-25]等，具有靈敏度高、重復(fù)性好、更精準(zhǔn)、適用范圍更廣的優(yōu)點，在農(nóng)殘檢測的實際應(yīng)用中占據(jù)十分重要的地位。

在測定含水率較高的農(nóng)產(chǎn)品中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時，目前國內(nèi)多采用農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留測定》，但該方法存在前處理復(fù)雜，消耗大量有機(jī)溶劑，農(nóng)藥分組多次檢測，每組農(nóng)藥種類單一，雙柱分析繁瑣，廣泛使用的農(nóng)藥品種無法一次性檢測殘留量的問題。本研究在充分試驗的基礎(chǔ)上，采用氣相色譜-火焰光度檢測器（gas chromatograph-flame photometric detector，GC-FPD）單柱法同時測定韭菜中的16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，方法簡單、快捷、準(zhǔn)確、適合大批量樣品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測定，應(yīng)用推廣性較強(qiáng)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890B型氣相色譜儀（帶火焰光度檢測器）：安捷倫科技（中國）有限公司；Reeko AutoEVA-60型氮吹儀：睿科儀器有限公司；IKA T25數(shù)顯型均質(zhì)機(jī)、IKA Vortex Genius3型漩渦混勻器：艾卡（廣州）儀器設(shè)備有限公司；Thermo ST8型離心機(jī)：賽默飛世爾科技公司。

乙腈（色譜純）：默克股份兩合公司；丙酮（色譜純）：天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠；氯化鈉（分析純）：廣州化學(xué)試劑廠。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液：敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、滅線磷、治螟磷、氧樂果、久效磷、樂果、甲基毒死蜱、馬拉硫磷、倍硫磷、殺撲磷、甲基硫環(huán)磷、硫環(huán)磷、三唑磷、磷胺，濃度均為100 μg/mL：北京曼哈格生物科技有限公司。

標(biāo)準(zhǔn)使用液配制：16種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液用丙酮稀釋配置成5.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用時用丙酮稀釋成0、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.3 樣品前處理

提?。悍Q取勻漿后的韭菜試樣10 g（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入20.0 mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min后，加入2 g氯化鈉，漩渦混勻1 min，6 000 r/min離心5 min，上清液待凈化。

凈化：吸取4.00 mL乙腈層溶液，40℃水浴氮吹近干，用丙酮定容至2.0 mL，混勻后用0.2 μm濾膜過濾于樣品瓶，供上機(jī)測定。

1.4 色譜條件

色譜柱：DB-17毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm×1 μm）；檢測器溫度：250 ℃；尾吹氣：N2；尾吹流量：60 mL/min；氫氣流量：75 mL/min；空氣流量：100 mL/min；進(jìn)樣模式：不分流；進(jìn)樣口溫度：220℃；載氣：N2；吹掃流量：3.0 mL/min；線速：53.15 cm/s；流量：15.0 mL/min；色譜柱流量：6 mL/min；色譜柱溫度：100℃；溫度程序：150℃（2 min）-2℃/min-190℃（2 min）-7℃/min-250℃（12.5 min）；進(jìn)樣量：1.0 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性范圍及檢出限

16種有機(jī)磷農(nóng)殘在本試驗條件下分離結(jié)果如圖1所示。16種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)工作液，按1.4進(jìn)行氣相色譜分析，以進(jìn)樣濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰而積（Y）為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，以3倍信噪比（S/N）計算檢出限（limit of detection，LOD），如表1所示。

圖1 16種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig.1 Determination of 16 organophosphorus standard samples

表1 16種有機(jī)磷農(nóng)藥的保留時間、線性方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限Table 1 Retention time，linear equations，correlation coefficients and limits of detection of 16 organophosphorus pesticides

結(jié)果表明，16種有機(jī)磷農(nóng)藥在 0.05 μg/mL～1.00 μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于等于0.996 76，檢出限在0.005 mg/kg～0.03 mg/kg之間，滿足相關(guān)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)中對韭菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留限量及分析方法的要求。

2.2 加標(biāo)樣品的回收率和精密度

在韭菜空白陰性樣品中，添加0.05、0.20、0.70 mg/kg 3水平的有機(jī)磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，同時制備平行樣品，按照1.3進(jìn)行樣品前處理和測定后進(jìn)行加標(biāo)回收率和精密度計算，結(jié)果見表2。

由表2可見，16種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均回收率為77.0%～107.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.3%～3.2%，說明該方法準(zhǔn)確可靠。

表2 樣品中3個水平加標(biāo)下16種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率（n=3）和精密度（n=7）Table 2 The recoveries and precisions（RSDs，n=7）of 16 organophosphorus pesticides spiked at three levels in a sample

2.3 實際樣品的測定

利用本方法對市場上購買的3個韭菜樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果見表3。

表3 韭菜樣品測定結(jié)果Table 3 The determination results of leek samples

試驗顯示有2個韭菜樣品檢出農(nóng)藥殘留，但未超過GB2763-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中對韭菜最大殘留限量的規(guī)定。

3 結(jié)論

果蔬中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分布往往不均勻，這就需要加大取樣量，使得樣品才能具有代表性，但是果蔬中含有大量的色素，如取樣量過大，處理起來就較為困難。本試驗取10 g樣品進(jìn)行試驗測定韭菜中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，在0.05 mg/kg～1.0 mg/kg濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.996 76～0.999 86，加標(biāo)回收率在77.0%～107.0%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%，最低檢出限為0.005 mg/kg～0.03 mg/kg。試驗所建立的16種有機(jī)磷農(nóng)藥的快速同時檢測氣相色譜法，具有溶劑用量少、操作簡單、效率高等特點，但目前其專一性、適用性等方面還需進(jìn)行深入研究，從而為農(nóng)產(chǎn)品中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留快速同時檢測技術(shù)的發(fā)展提供有效的理論基礎(chǔ)和技術(shù)支持。

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