何舒懷，馬永征，費(fèi)永俊

（長江大學(xué)楠木種質(zhì)資源評價及創(chuàng)新中心，湖北荊州434025）

廣東潤楠（Machilus kwangtungensis Yang）屬樟科潤楠屬常綠喬木，為我國特有種，產(chǎn)自廣東省、廣西省、湖南省南部及貴州省南部，生長于山地、山谷的闊葉混交疏林中或水邊［1］，樹干通直，樹形優(yōu)美，被馮志堅等評價為Ⅰ級具有高觀賞性的樟科樹種［2］。廣東潤楠不僅具有較廣的生態(tài)適應(yīng)性、較高的景觀觀賞性及環(huán)境功能，且具有較高的經(jīng)濟(jì)價值，能夠反映大氣的污染情況，尤其是對酸性硫化物、毒性氟化物具有特殊的靈敏度［3］。隨著“金絲楠木”的興起，有關(guān)潤楠屬植物的研究日益增多，對廣東潤楠的研究主要涉及資源分布、人工培植等［4］。本試驗通過研究低溫脅迫下噴施不同濃度水楊酸（SA）對廣東潤楠生理指標(biāo)及抗寒性的影響，以期為廣東潤楠進(jìn)一步向北地區(qū)推廣提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

廣東潤楠1年生實生苗，2016年1月種植于長江大學(xué)西校區(qū)盆景園內(nèi)。

1.2 材料處理

2016年7月取長勢一致且無病蟲害的廣東潤楠1年生苗，置于溫室內(nèi)常規(guī)管理1個月；將試驗材料分為4組，每隔2 d分別噴施 SA 1、5、10 mmol／L各 1次，以噴清水為對照（CK），處理3次；最后1次試劑處理48 h后，將每組材料分別放入0、5℃人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48 h，常溫恢復(fù)生長24 h后（2016年8月12日）取葉片進(jìn)行相關(guān)測定。

1.3 測定內(nèi)容和方法

測定廣東潤楠葉片的葉綠素 a、葉綠素b、葉綠素 a＋b（葉綠素總含量）、類胡蘿卜素、丙二醛（MDA）含量及相對電導(dǎo)率［5］；分別采用考馬斯亮藍(lán)G－250法、氮藍(lán)四唑法測定葉片的可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性［6］。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2007軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計處理與制圖；采用SPSS 19.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行差異性與相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源SA對廣東潤楠幼苗葉片光合色素含量的影響

由圖1可知，5℃條件下，噴施SA處理的廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素含量有明顯增加，其中，濃度為1 mmol／L SA處理時，廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素含量增量相對最大，其含量分別較對照增加 84.41%、86.70%、84.91%、81.65%，且與對照相比差異顯著（P＜0.05）；0℃條件下，濃度為1 mmol／L SA處理的廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素含量與CK相比顯著下降（P＜0.05），而其他SA濃度處理的則較CK顯著上升（P＜0.05），其中，濃度為10 mmol／L SA處理的漲幅相對最大，效果相對最好。

2.2 外源SA對廣東潤楠幼苗葉片MDA含量的影響

由圖2可知，5℃條件下，經(jīng)不同濃度SA處理的廣東潤楠葉片MDA含量都有不同程度的增加，其中，SA濃度為5 mmol／L時，葉片中的 MDA含量相對最大，較 CK增加32.26%，且與CK差異顯著（P＜0.05）；0℃條件下，經(jīng)濃度為1、5 mmol／L的SA處理，廣東潤楠葉片中的MDA含量較CK顯著下降（P＜0.05），而 SA濃度為10 mmol／L時，葉片中的MDA含量較CK明顯增加。

2.3 外源SA對廣東潤楠幼苗葉片SOD活性的影響

由圖3可知，5℃條件下，SA處理的廣東潤楠幼苗葉片SOD活性與 CK相比差異不顯著（P＞0.05），1、5 mmol／L SA處理的SOD活性低于CK，10 mmol／L SA處理的SOD活性明顯高于CK；0℃條件下，不同濃度SA處理的葉片SOD活性都有一定的降低，且隨SA使用濃度的升高，廣東潤楠葉片SOD活性呈先降后升趨勢，其中1、5 mmol／L SA處理的SOD活性與CK相比差異顯著（P＜0.05）。

2.4 外源SA對廣東潤楠幼苗葉片可溶性蛋白含量的影響

由圖4可知，5℃條件下，經(jīng)SA處理的廣東潤楠葉片可溶性蛋白含量均低于CK，但與CK相比差異不顯著（P＞005），其中，SA處理濃度為1 mmol／L時，廣東潤楠葉片中的可溶性蛋白含量相對最低；0℃條件下，隨SA使用濃度的增加，廣東潤楠葉片中的可溶性蛋白含量呈逐漸升高趨勢，但相互間差異不顯著（P＞0.05），其中SA濃度為10 mmol／L時的蛋白質(zhì)含量相對最高。

2.5 外源SA對廣東潤楠幼苗葉片相對電導(dǎo)率的影響

由圖5可知，5℃條件下，隨SA使用濃度的增加，廣東潤楠幼苗葉片的相對電導(dǎo)率呈先增后減趨勢，且其相對電導(dǎo)率均低于CK，其中SA濃度為1mmol／L處理時的相對電導(dǎo)率最低；0℃條件下，SA處理的葉片相對電導(dǎo)率均高于CK，其中10 mmol／L SA處理的葉片相對電導(dǎo)率相對最大，且顯著高于CK（P＜0.05）。

2.6 外源SA處理的廣東潤楠各抗寒性生理指標(biāo)間的相關(guān)性

由表1可見，SA處理的廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素含量兩兩之間呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）；MDA含量與 SOD活性呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），MDA含量與電導(dǎo)率呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）；SOD活性與葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素、可溶性蛋白含量呈負(fù)相關(guān)但不顯著（P＞0.05），SOD活性與相對電導(dǎo)率之間呈不顯著正相關(guān)（P＞0.05）。

表1 SA處理的廣東潤楠葉片各生理指標(biāo)間的相關(guān)性分析

2.7 對噴施外源SA的廣東潤楠抗寒性綜合評價

由表2可見，5℃條件下，SA處理的隸屬函數(shù)加權(quán)值都高于CK，廣東潤楠經(jīng)1 mmol／L SA處理的隸屬函數(shù)加權(quán)值相對最大；0℃條件下，經(jīng)10 mmol／L SA處理的隸屬函數(shù)加權(quán)值相對最大，CK的加權(quán)值相對較小。0℃條件下10 mmol／L SA處理的隸屬函數(shù)加權(quán)值排首位，高于5℃條件下1mmol／L SA處理的隸屬函數(shù)加權(quán)值；0℃條件下CK的隸屬函數(shù)加權(quán)值低于5℃條件下CK的隸屬函數(shù)加權(quán)值。說明噴施SA可在一定程度上提高廣東潤楠的抗寒性，其中以10 mmol／L SA處理效果相對最好。

表2 噴施外源SA的廣東潤楠抗寒指標(biāo)隸屬函數(shù)評價

3 結(jié)論與討論

通過水楊酸（SA）處理的廣東潤楠，其葉片光合色素含量多有不同程度的上升，且不同使用濃度的增幅不同，說明外源SA能夠在一定程度上保護(hù)葉綠素及類胡蘿卜素不受低溫脅迫的影響，通過增加其含量以提高光合作用，從而保障植物安全度過脅迫期；這與Stevens等的研究結(jié)果［7］相同。隨溫度的降低，噴清水（CK）的廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b、類胡蘿卜素含量均有一定的增加，與劉國華等的研究結(jié)論［8］相反，而何開躍等研究發(fā)現(xiàn)，隨低溫脅迫時間的增加，福建柏葉綠素含量呈先上升后下降的趨勢［9］，這說明不同植物在低溫脅迫下有相似但不盡相同的適應(yīng)方式［10］。在0℃條件下，低濃度（1 mmol／L）SA處理的廣東潤楠葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a＋b類胡蘿卜素含量均低于CK，可能是低濃度SA具有與高濃度SA相類似的抑制作用［11］。

有研究表明，隨溫度的降低，MDA含量上升［9］。本試驗結(jié)果表明，經(jīng)過不同濃度的SA處理，5、0℃條件下的葉片MDA含量或增或減，表明SA處理的廣東潤楠抗寒性在不同溫度條件下效果有所不同，最佳使用濃度與脅迫溫度有關(guān)；0℃條件下，濃度為1、5mmol／LSA處理的廣東潤楠MDA含量有顯著降低（P＜0.05），表明外源SA可降低低溫脅迫對植株的傷害；隨溫度的降低，廣東潤楠葉片的相對電導(dǎo)率下降，表明0℃時廣東潤楠的自我調(diào)節(jié)機(jī)制已不能抵抗低溫脅迫的侵害，而通過適宜濃度的SA處理，相對電導(dǎo)率有一定程度的升高，這與方小平等的研究結(jié)論［17］有所不同。SOD是清除超氧陰離子過程中的重要抗氧化物質(zhì)，當(dāng)植株受到低溫脅迫時，植物通過提升SOD活性的自我調(diào)節(jié)機(jī)制以達(dá)到保護(hù)植株的目的［12］，通過外源SA處理可以減少低溫脅迫產(chǎn)生的不利損傷，以致植株感知較弱的脅迫信息，從而使SOD活性降低。本試驗表明，隨溫度下降，CK的可溶性蛋白含量有所降低，這與李斌等研究結(jié)論［13］不一致，而與劉西平等的試驗結(jié)果［14］吻合，相關(guān)機(jī)理有待進(jìn)一步研究；5℃條件下，SA處理的可溶性蛋白含量均低于CK，表明植物體內(nèi)蛋白代謝對低溫的響應(yīng)速度可能存在差異，或可能是植物體內(nèi)一些蛋白合成酶活性受短暫抑制而使蛋白合成減少；0℃條件下，SA處理的可溶性蛋白含量均高于CK，且隨SA使用濃度的增加，可溶性蛋白含量增大，這與高洪波等的研究結(jié)論［15－16］相一致。

通過對廣東潤楠抗寒指標(biāo)的相關(guān)性分析可知，光合色素（葉綠素、類胡蘿卜素）與抗寒性呈正相關(guān)，外源SA處理可使植株的光合色素含量增多，從而導(dǎo)致植株受到低溫脅迫的危害降低；SOD活性的降低導(dǎo)致與SOD活性呈極顯著正相關(guān)的MDA含量下降。比較分析SA處理后廣東潤楠抗寒生理指標(biāo)的隸屬函數(shù)加權(quán)值可知，當(dāng)外源SA濃度為10 mmol／L時，廣東潤楠的抗寒性相對最強(qiáng)。

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