近年來(lái)，生物醫(yī)學(xué)和醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室面臨越來(lái)越多的常規(guī)、專(zhuān)業(yè)的血液診斷測(cè)試?，F(xiàn)代的儀器已能夠自動(dòng)裝載血液樣本，并程序化進(jìn)行測(cè)試。臨床檢驗(yàn)中檢測(cè)很多需要以血清成分作為分析樣本，多數(shù)情況需要及時(shí)分離血清,以避免纖維蛋白和溶血的影響。如何快速、簡(jiǎn)單地分離血清, 是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中迫切需要解決的問(wèn)題[1]。傳統(tǒng)的血清分離方法是將凝固后的血液在高速離心條件下，使血清與血細(xì)胞分離，但初步分離后的血液組分常規(guī)放置條件下會(huì)相互擴(kuò)散，且需進(jìn)行樣本轉(zhuǎn)移。采用血液分離膠是目前解決這個(gè)問(wèn)題的最好方法。但在實(shí)際應(yīng)用中，常遇到血液分離膠采血管分離效果不佳的情況，例如：采血管中出現(xiàn)分離膠碎片或油滴漂浮在血清表面或懸浮于血清中；分離膠還會(huì)對(duì)某些檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生一定的干擾[2，3]。

目前,血液分離膠的制備方法在我國(guó)較少文獻(xiàn)及專(zhuān)利報(bào)道,某些大醫(yī)院使用的分離膠都是國(guó)外產(chǎn)品。國(guó)外專(zhuān)利報(bào)道的血液分離膠的主要成份為聚酯_硅石粉和聚苯乙烯- 苯甲醛衍生物,存在著制備復(fù)雜和成本較高等缺點(diǎn), 為此筆者進(jìn)行了充分論證，選用天然橡膠為主要原料進(jìn)行血液分離膠的制備研究[4，5]。

一、材料與方法

(一)研究對(duì)象

研究防老化血液分離膠在采血管中粘度、密度及溶血率的變化，研究防老化分離膠制備的采血管與無(wú)添加劑管、日本積水血液分離膠制備的采血管臨床生化24項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果的一致性。

(二)儀器與試劑

貝克曼CX7、CX9 全自動(dòng)生化分析儀及其原裝配套試劑。

電子分析天平FA2104 上海恒平科學(xué)儀器有限公司

旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)NDJ-5S(N) 上海上天精密儀器有限公司

無(wú)添加劑采血管 批號(hào)：150706 福州長(zhǎng)庚醫(yī)療器械有限公司

防老化血液分離膠 批號(hào)：D160128 福州長(zhǎng)庚醫(yī)療器械有限公司

日本積水血液分離膠 批號(hào)：150705 福州長(zhǎng)庚醫(yī)療器械有限公司

獻(xiàn)血者血液

(三)采血管制備

按照實(shí)驗(yàn)要求通過(guò)“預(yù)置添加劑→添加劑干燥→預(yù)置真空→貼標(biāo)標(biāo)識(shí)”工序制備防老化血液分離膠采血管300支、日本積水血液分離膠采血管50支。生產(chǎn)過(guò)程各工序控制能力經(jīng)過(guò)確認(rèn)(各工序控制能力Cpk[6]均達(dá)到A+級(jí))，采血管產(chǎn)品質(zhì)量要求通過(guò)歐盟標(biāo)準(zhǔn)(EN14820-2004)[7]和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(YY0314-2007)[8]全項(xiàng)目檢測(cè)。

(四)檢測(cè)方法

1.粘度：取防老化血液分離膠20克，使用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)檢測(cè)粘度，檢測(cè)50次，記錄產(chǎn)品粘度；產(chǎn)品常溫保存24個(gè)月后再次取20克防老化血液分離膠檢測(cè)粘度，檢測(cè)50次。

2.密度：取防老化血液分離膠采血管50支，根據(jù)重量與體積測(cè)產(chǎn)品密度；常溫保存24個(gè)月后取同批產(chǎn)品50支再次根據(jù)重量與體積測(cè)產(chǎn)品密度。

3.溶血率：取防老化血液分離膠采血管50支，按《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法》[9]中“溶血試驗(yàn)”要求測(cè)定產(chǎn)品溶血率；常溫保存24個(gè)月后取同批產(chǎn)品50支再次檢測(cè)產(chǎn)品溶血率。

4.生化檢測(cè)：取防老化血液分離膠制備的采血管(試驗(yàn)組)和無(wú)添加劑采血管(對(duì)照組1)、日本積水血液分離膠制備的采血管(對(duì)照組2)各50支，并一一對(duì)應(yīng)，按靜脈采血法要求每組抽取同一獻(xiàn)血者血液進(jìn)行臨床常規(guī)生化24項(xiàng)(BUN、CRE、UA、TP、ALB、ALT、AST、ALP、r-GT、CFA、TB、DB、CK、CK-MB、LDH、HBDH、CHO、TG、P、GLU、K、NA、CL、CA)檢測(cè)。

(五)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P﹤0.01表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異顯著；P>0.05表明差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié) 果

(一)實(shí)驗(yàn)組防老化血液分離膠粘度為20.78±0.91KPa·s，對(duì)照組為20.82±0.94KPa·s(t =0.131，P>0.05)。

(二)實(shí)驗(yàn)組防老化血液分離膠密度為1.047±0.002g/cm3，對(duì)照組為1.048±0.002 g/cm3(t =1.520，P>0.05)。

(三)實(shí)驗(yàn)組防老化血液分離溶血率為4.67%±0.71%，對(duì)照組為4.69%±1.01%(t =0.069，P>0.05)。

1.組采血管血液生化24項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1 2組采血管血液生化24項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

由表1可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組1相比較24項(xiàng)生化指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P﹥0.05)。

表2 2組采血管血液生化24項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

由表1可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組2相比較24項(xiàng)生化指標(biāo)均無(wú)顯著性差異(P﹥0.05)。

三、討 論

血液分離膠的制備方法在我國(guó)的文獻(xiàn)及專(zhuān)利報(bào)道都比較少，1991年中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所和大連臨床檢驗(yàn)中心，在國(guó)內(nèi)首次研制出國(guó)產(chǎn)的血液分離膠[10]。這種分離膠結(jié)構(gòu)中含有大量氫鍵，氫鍵鍵能低，易斷裂，業(yè)內(nèi)認(rèn)為血液分離膠具有觸變性，在離心力的作用下，血液分離膠中網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的氫鍵會(huì)發(fā)生斷裂，變成粘度較低的溶膠，從而和血清/血漿、血細(xì)胞才能形成按密度從低到高排列的三個(gè)分層。離心力消失后，血液分離膠又隨著氫鍵的重新形成從粘度較低的溶膠狀態(tài)恢復(fù)為粘度較高的半固體狀，在血清/血漿與血細(xì)胞之間形成隔層。這種分離膠在投入臨床應(yīng)用后，證明完全能夠滿足使用要求；但現(xiàn)今適用的分離膠的有效期較短。2011年-2012年間國(guó)內(nèi)多家分離膠生產(chǎn)企業(yè)研發(fā)出耐γ-射線血液分離膠。雖然其延長(zhǎng)了保存時(shí)間，但是一致性差，有些還有濃重的刺激性氣味。

1973年美國(guó)PECTON公司以硅油和硅石為原料制成凝膠并裝入玻璃試管中投放市場(chǎng)，1982年日本積水化學(xué)工業(yè)及其同行用塑料試管代替玻璃試管實(shí)現(xiàn)商品化；其血液分離膠制備技術(shù)成熟，各項(xiàng)性能滿足臨床應(yīng)用要求，且產(chǎn)品有效期長(zhǎng)。但據(jù)國(guó)外專(zhuān)利報(bào)道的血液分離膠的主要成份為聚酯-硅石粉和聚苯乙烯-苯甲醛衍生物，存在著制備復(fù)雜和成本較高等缺點(diǎn)。

防老化血液分離膠選擇最合適的天然橡膠主料，比重調(diào)節(jié)劑，粘度調(diào)節(jié)劑，防老化劑作為組分。天然橡膠是由異戊二烯組成的線型高分子，是各種長(zhǎng)度不一的聚異戊二烯混合物，具有較好的疏水性能和加工性能。其配制的血液分離膠具有封閉隔離效果好的特點(diǎn)[11,12]；并通過(guò)調(diào)節(jié)比重調(diào)度劑，粘度調(diào)節(jié)劑的組成比例，最終制備出粘度在18±8Kpa·S，密度在1.045～1.050 g/cm3的防老化血液分離膠。

實(shí)驗(yàn)制備采血管，各工序過(guò)程控制能力Cpk均達(dá)到A+級(jí)，產(chǎn)品質(zhì)量符合歐盟EN14820-2004)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(YY0314-2007)要求，確保了實(shí)驗(yàn)的順利實(shí)施。防老化血液分離膠在采血管中的常溫保存24個(gè)月粘度、密度、溶血率性能均符合要求；且其在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用與無(wú)添加劑管及著名品牌日本積水血液分離膠均無(wú)顯著差異[13，14，15]，表明防老化血液分離膠采血管在臨床檢測(cè)中應(yīng)用可行。

通訊作者：鐘德優(yōu)

【參考文獻(xiàn)】

[1]張利萍，羅嘯秋，白洪強(qiáng).血液分離膠制備研究現(xiàn)狀及展望[J].化工新型材料, 2013，41(2)：7-8+26.

[2]趙立飛，徐建華，解傳芬等.臨床應(yīng)用采血管需注意的問(wèn)題[J].臨床檢驗(yàn)雜志, 2012，(7)：543-545.

[3]郭新勝，周位強(qiáng).分離膠真空采血管在臨床上的應(yīng)用進(jìn)展[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2007，22(2)：123-124.

[4]Kazunori M, Hirshi S, Kazumi S. Blood Separation Compostion,EP.537. 507(1993)

[5]楊小鋼，鄧兆群，邱方城等.血液分離膠的制備研究[J].湖北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2000，21(2)：117-118.

[6]柴 永.正確地認(rèn)識(shí)和使用過(guò)程能力指數(shù)Cp和Cpk[J].中國(guó)質(zhì)量,2007,(2)：77-82.

[7]EN14820-2004, Single-use containers for human venous blood specimen collection.[S]

[8]YY0314-2007, 一次性使用人體靜脈血樣采集容器[S]

[9]GB/T14233.2-2007, 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 第2部分：生物學(xué)試驗(yàn)方法[S]

[10]王永安，吉本秋雄，徐維家等.血清分離膠促凝采血管的理論基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用[J].中國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2003，4(3)：3-4.

[11]王曉琳.臨床檢驗(yàn)中血液分離膠采血試管的應(yīng)用效果分析[J].中國(guó)農(nóng)村衛(wèi)生, 2015，(4)：31-32.

[12]梁文龍，謝會(huì)娟，王鳳華.血液分離膠采血試管在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果觀察[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)旬刊, 2014，24(2)：1157

[13]范小斌，謝紅東.血液葡萄糖在分離膠血液采集管中的穩(wěn)定性觀察[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn), 2004，22(1)：25-26+28.

[14]張韶斌，張旭，何國(guó)堅(jiān)等.血清分離膠真空采血管與普通促凝干燥管使用結(jié)果比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2008，5(7)：392-393.

[15]楊滿文.分析臨床檢驗(yàn)中血液分離膠采血試管的應(yīng)用效果[J]. 中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)旬刊, 2016，26(19)：153-154