王健楠 王立忠 習(xí)瑾昆 李永樂

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院心內(nèi)科，天津 300050)

原發(fā)性高血壓為一種環(huán)境因素和遺傳因素相互作用的疾病，是腎衰竭、腦卒中和冠心病的危險(xiǎn)因素。臨床上高血壓的治療藥物有多種，但不同患者對不同降壓藥的反應(yīng)不同，因此合理選擇降壓藥具有重要意義〔1，2〕。分子遺傳學(xué)的發(fā)展為從基因水平研究疾病的易感因素和藥物反應(yīng)差別提供了技術(shù)和理論支持，對高血壓患者進(jìn)行基因多態(tài)性研究可以為高血壓的預(yù)防、診斷和治療提供依據(jù)〔3，4〕。內(nèi)皮素是縮血管物質(zhì)〔5，6〕，本文對內(nèi)皮素-2基因多態(tài)性與老年原發(fā)性高血壓發(fā)生及降壓治療效果的關(guān)系進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院2011年1月至2016年12月診治的漢族老年原發(fā)性高血壓患者200人作為高血壓組，健康體檢老年人200例作為對照組。高血壓組年齡(71.23±8.32)歲，男127例，女73例；對照組年齡(70.03±6.57)歲，男114人，女86人，高血壓組和對照組性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。高血壓組高血壓家族史高于對照組(P<0.05)，體重指數(shù)、總膽固醇和三酰甘油水平均高于對照組(P<0.05)。見表1。高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)：至少3次非同日未服降壓藥的情況下收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg。排除標(biāo)準(zhǔn)：相互之間有血緣關(guān)系者，冠心病者，繼發(fā)性高血壓者，糖尿病者，肝腎功能異常者，惡性腫瘤者，拒絕參與者。

表1 高血壓組和對照組臨床資料比較

1.2方法

1.2.1高血壓患者降壓治療 高血壓患者給予非洛地平(5 mg，1次/d)口服治療2個(gè)月。

1.2.2內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型檢測 對照組于體檢時(shí)抽取外周靜脈血3 ml于抗凝管中，高血壓組于高血壓診斷時(shí)和高血壓常規(guī)治療2個(gè)月后抽取外周靜脈血3 ml于抗凝管中，采用基因芯片技術(shù)測定內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型。具體步驟：將擴(kuò)增液分裝，將各離心管中加入血液，并混勻，加入紅細(xì)胞裂解液，震蕩后離心，抽提裂解細(xì)胞，加入擴(kuò)增液進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增條件為50℃ 5 min，94℃ 5 min，94℃ 25 s、56℃ 25 s、72℃ 25 s共40個(gè)循環(huán)，72℃延伸5 min。擴(kuò)增后加入雜交液進(jìn)行雜交，雜交后用蒸餾水把芯片清洗干凈，烘干，采用基因芯片分析軟件對芯片基因型進(jìn)行分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件，基因多態(tài)性遺傳平衡檢驗(yàn)及率的比較采用χ2檢驗(yàn)，均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，高血壓影響因素分析采用多因素二分類Logistic分析。

2 結(jié) 果

2.1高血壓組和對照組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型基因多態(tài)性遺傳平衡檢驗(yàn) 經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，兩組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡(P>0.05)，可見，高血壓組和對照組樣本具有群體代表性。

2.2高血壓組和對照組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型比較 高血壓組和對照組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，高血壓組GG基因型〔157例(78.5%)〕顯著高于對照組〔113例(56.5%)，P<0.05〕，AA基因型〔4例(2.0%)〕和AG基因型〔39例(19.5%)〕顯著低于對照組〔14例(7.0%)，73例(36.5%)，均P<0.05〕。

2.3高血壓組和對照組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)等位基因頻率比較 高血壓組和對照組內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)等位基因頻率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，高血壓組G等位基因頻率〔353例(88.3%)〕顯著高于對照組〔299例(74.8%)，P<0.05〕，A等位基因頻率〔47例(11.8%)〕顯著低于對照組〔101例(25.3%)，P<0.05〕。

2.4高血壓相關(guān)因素的二分類Logistic回歸分析 將體重指數(shù)、總膽固醇、三酰甘油、內(nèi)皮素-2基因多態(tài)性作為自變量，有無高血壓作為因變量進(jìn)行二分類Logistic回歸分析，結(jié)果顯示：體重指數(shù)、總膽固醇和內(nèi)皮素-2基因多態(tài)性與高血壓的發(fā)生有關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 高血壓相關(guān)因素的二分類Logistic回歸分析

2.5高血壓患者治療前后血壓變化情況 200例高血壓患者治療后收縮壓〔(133.26±9.67)mmHg〕和舒張壓〔(82.14±7.68)mmHg〕均明顯低于治療前〔收縮壓(153.24±10.32)mmHg,舒張壓(98.67±8.53)mmHg，P<0.05〕。

2.6內(nèi)皮素-2基因多態(tài)性對高血壓降壓治療效果的影響 不同內(nèi)皮素-2基因型患者治療后血壓下降值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中GG基因型收縮壓〔(18.32±5.64)mmHg〕和舒張壓下降值〔(15.42±5.12)mmHg〕明顯高于AA基因型〔(8.56±3.24)mmHg,(6.45±3.02)mmHg〕和AG基因型〔(13.21±4.35)mmHg,(12.13±4.64)mmHg，P<0.05〕，AG基因型收縮壓和舒張壓下降值明顯高于AA基因型(均P<0.05)。

3 討 論

內(nèi)皮素為一種活性多肽，由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成，內(nèi)皮素通過和血管平滑肌細(xì)胞上的相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮內(nèi)皮素加壓作用和血管收縮作用，促進(jìn)血管平滑肌增殖，具有非常強(qiáng)的縮血管作用。內(nèi)皮素收縮血管的機(jī)制可能為通過細(xì)胞內(nèi)存儲鈣離子釋放或鈣離子通道開放引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平增加，從而引起血管收縮。內(nèi)皮素可增加血管對5-羥色胺、去甲腎上腺素等縮血管物質(zhì)的縮血管反應(yīng)而增加外周血管阻力，從而引起血壓升高〔7,8〕。內(nèi)皮素-1的基因多態(tài)性和血壓水平的關(guān)系已被研究證實(shí)〔9～11〕，A985G基因多態(tài)性是內(nèi)皮素-2基因多態(tài)性研究比較多的基因位點(diǎn)〔12,13〕。本文對內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)和漢族老年原發(fā)性高血壓患者的關(guān)系進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)老年原發(fā)性高血壓具有家族聚集性，內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因多態(tài)性和高血壓的發(fā)生關(guān)系密切，考慮內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因多態(tài)性是老年原發(fā)性高血壓的易感因素。

血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的內(nèi)皮素在原發(fā)性高血壓的發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用，內(nèi)皮素和一氧化氮共同參與維持血壓穩(wěn)定和調(diào)節(jié)血管張力，如果內(nèi)皮素和一氧化氮比例失調(diào)可引起左心室肥厚、原發(fā)性高血壓、心力衰竭等。非洛地平為選擇性鈣離子拮抗劑，對小動脈平滑肌細(xì)胞鈣內(nèi)流具有抑制作用〔14〕。本結(jié)果發(fā)現(xiàn)，內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)基因多態(tài)性和老年原發(fā)性高血壓的降壓效果有關(guān)，非洛地平對內(nèi)皮素-2基因A985G位點(diǎn)GG基因型患者的效果較其他基因型好。

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