謝付靜，陳大力，楊亞培，劉洪波△

(1.山東省聊城市人民醫(yī)院兒科 252000；2.山東省濰坊市益都中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 262500；3.山東省聊城市人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室 252000)

人巨細(xì)胞病毒(HCMV)屬于雙鏈DNA皰疹病毒，成人大多屬于隱性感染，嬰幼兒由于免疫系統(tǒng)不完善，常出現(xiàn)明顯癥狀，嚴(yán)重者可出現(xiàn)多臟器損害[1]。大多數(shù)巨細(xì)胞病毒(CMV)感染的患兒因黃疸持續(xù)不退或黃疸持續(xù)加重前來(lái)就診[2]，可見肝臟是CMV感染的主要靶器官[3-4]。本研究選用對(duì)早期診斷價(jià)值較大的CMV-IgM及CMV-DNA這兩項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行篩查，擬探討單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)這兩項(xiàng)指標(biāo)對(duì)嬰幼兒巨細(xì)胞病毒肝炎的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 將聊城市人民醫(yī)院兒科2013年1月至2017年1月確診的巨細(xì)胞病毒肝炎患兒122例作為病例組，其中男71例，女51例，年齡1 d到3歲，無(wú)其他影響CMV-IgM及CMV-DNA的并發(fā)癥。另取同期健康查體兒童186例作為對(duì)照組，其中男90例，女96例，年齡1個(gè)月至3歲，查體兒童無(wú)感染癥狀。兩組之間性別及年齡的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究由聊城市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)且患兒家屬知情同意。

1.2儀器與試劑 CMV-IgM采用意大利索靈化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑檢測(cè)，CMV-DNA采用ABI Prism 7500實(shí)時(shí)熒光PCR儀檢測(cè)，試劑由上海之江生物科技公司提供。上述檢測(cè)均嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3方法 清晨空腹抽取兩組嬰幼兒靜脈血3 mL，放入促凝管，混勻后靜置半小時(shí)，室溫3 000 r/min離心10 min進(jìn)行CMV-IgM及CMV-DNA檢測(cè)；另外留取兩組嬰幼兒中段晨尿10 mL進(jìn)行尿液CMV-DNA檢測(cè)。CMV-IgM>22 U/mL為陽(yáng)性，CMV-DNA>1 000 copies/mL為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

2.1兩組CMV-IgM、CMV-DNA比較 CMV-IgM與CMV-DNA任意一項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性加上具備肝臟損傷癥狀判定為肝炎確診陽(yáng)性。病例組與對(duì)照組比較，CMV-IgM與CMV-DNA陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 病例組與對(duì)照組CMV-IgM、CMV-DNA比較[n(%)]

2.2不同年齡分組巨細(xì)胞病毒肝炎患兒CMV-IgM、CMV-DNA比較 將患兒組根據(jù)年齡分為4組，分別為1 d至6個(gè)月(53例)，6個(gè)月至小于1歲(39例)，1～<2歲(18例)，2～3歲(12例)。不同年齡分組巨細(xì)胞病毒肝炎患兒CMV-IgM、CMV-DNA的總陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3不同癥狀巨細(xì)胞病毒肝炎患兒CMV-IgM、CMV-DNA 本研究122例患兒中黃疸82例、大便色淺36例、肝脾腫大60例、 發(fā)熱咳嗽37例、先天畸形及發(fā)育不良7例。根據(jù)上述癥狀將患兒分組進(jìn)行CMV-IgM與CMV-DNA的檢測(cè)，各組總陽(yáng)性率之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表2 不同年齡組患兒CMV-IgM、CMV-DNA檢測(cè)[n(%)]

表3 不同癥狀巨細(xì)胞病毒肝炎患兒CMV-IgM、CMV-DNA檢測(cè)[n(%)]

2.4CMV-IgM、CMV-DNA單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線分析 CMV-DNA曲線下面積為0.406，CMV-IgM曲線下面積為0.665，聯(lián)合檢測(cè)兩項(xiàng)指標(biāo)的曲線下面積為0.872，見圖1、表4。

圖1 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)CMV-IgM與CMV-DNA的ROC曲線

3 討 論

嬰幼兒病毒性肝炎的病原體多種多樣，常見的有乙型肝炎病毒、CMV、EB病毒、柯薩奇病毒等，如何明確病原體對(duì)診斷及治療至關(guān)重要[5]。嬰幼兒CMV感染與傳播主要通過(guò)胎盤、產(chǎn)道、母乳，根據(jù)感染的時(shí)間可分為先天性、圍生期及獲得性感染。肝臟是CMV最常侵犯的靶器官[6]，感染人體后可分為4種臨床類型：亞臨床、無(wú)黃疸、黃疸及淤膽型。其中以黃疸型肝炎最為多見[7]，臨床表現(xiàn)為黃疸持續(xù)不退或退而復(fù)現(xiàn)，肝脾腫大質(zhì)地硬，部分伴有陶土樣淺色便。有研究[8]表明：CMV也可侵犯其他器官如肺臟、神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致患兒肺炎、先天發(fā)育異常等，個(gè)別患兒甚至出現(xiàn)多臟器綜合征。本研究收集了CMV感染肝炎患兒(臨床表現(xiàn)多為黃疸、肝脾腫大、肝功能受損)122 例及健康兒童186例進(jìn)行CMV-IgM及CMV-DNA檢測(cè)，結(jié)果顯示:病例組與對(duì)照組CMV-IgM、CMV-DNA的陽(yáng)性率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，這種結(jié)果說(shuō)明在病毒感染早期CMV-IgM與CMV-DNA對(duì)疾病的鑒別診斷起到了重要作用，對(duì)疾病的早期診斷幫助甚大。

CMV感染人體后，由于患兒的年齡及免疫狀態(tài)不同，首發(fā)癥狀也不盡相同，容易導(dǎo)致誤診和漏診，國(guó)內(nèi)學(xué)者黃玉玲[9]根據(jù)患兒的年齡進(jìn)行了細(xì)致的分組，結(jié)果顯示0～6個(gè)月組的感染率最高。鄺輝等[10]同樣發(fā)現(xiàn)1～6個(gè)月組的感染率最高，此外該學(xué)者根據(jù)患兒的癥狀和體征進(jìn)行了分組，結(jié)果表明以肝功異常、黃疸、肺炎最常見，其他還包括先天畸形、營(yíng)養(yǎng)不良等。從表2可見1 d至6個(gè)月患兒組為CMV-IgM及CMV-DNA陽(yáng)性率最高的組，同時(shí)也是CMV篩查指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)總陽(yáng)性率最高的組，總陽(yáng)性率在各組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，這和以上兩位學(xué)者的研究相符。由表3可見在以臨床特征的分組中，黃疸組為各指標(biāo)陽(yáng)性率及總陽(yáng)性率最高的組，聯(lián)合檢測(cè)兩項(xiàng)指標(biāo)的總陽(yáng)性率在各組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。朱艷萍等[11]的研究指出聯(lián)合檢測(cè)尿CMV-DNA與血CMV-IgM診斷價(jià)值最大。本研究表明聯(lián)合檢測(cè)CMV-IgM與CMV-DNA的曲線下面積最大為0.872，靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值分別為71.8%、66.7%、82.2%、75.6%，均高于各單項(xiàng)檢測(cè)，上述數(shù)值與各單項(xiàng)檢測(cè)之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說(shuō)明聯(lián)合CMV-IgM與CMV-DNA比單項(xiàng)篩查的意義更大，選用指標(biāo)的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝炎患兒的篩查效率更高。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)CMV-IgM與CMV-DNA可以很好地篩選出嬰幼兒肝炎中的CMV病毒感染，對(duì)于患兒的早期診斷、早期治療、預(yù)防并發(fā)癥意義重大。本研究采用的化學(xué)發(fā)光法測(cè)定CMV-IgM也比傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法靈敏度、特異度都高[12-13]，因患兒均為嬰幼兒，并未對(duì)3歲以上患兒進(jìn)行檢測(cè)，也未對(duì)患兒的治療用藥及預(yù)后隨訪進(jìn)行評(píng)估，以上這些工作還有待進(jìn)一步的探討完善。

[1]葛存興，趙晶，王宏志，等．比較嬰兒血液和母乳中人巨細(xì)胞病毒檢測(cè)在診斷嬰兒感染中的價(jià)值[J]．中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2016，16(2)：101-102．

[2]NAING Z,RAYNER B,KILLIKULANGARA A,et al.Prevalence of viruses in stool of premature neonates at a neonatal intensive care unit[J].J Paediatr Child Health,2013,49(3):E221-E226.

[3]浮苗，田可港，鄭曉群．人巨細(xì)胞病毒潛伏感染相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]．中國(guó)病原生物學(xué)雜志，2014，9(12)：1134-1138．

[4]白華，李汶靜，梁麗俊．嬰兒巨細(xì)胞病毒肝炎130例臨床特點(diǎn)及預(yù)后分析[J]．寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，37(9)：1065-1068．

[5]YASUDA K,SUGIURA K,ISHIKAWA R,et al.Perinatal cytomegalovirus-associated bullae in an immunocom-petent infant[J].Arch Dermatol,2012,148(6):770-772.

[6]PEREIRA L,PETITT M,FONG A,et al.Intrauterine growth restriction caused by underlying congenital cytomegalovirus infection[J].J Infect Dis,2014,209(10):1573-1584.

[7]WATERS A,JENNINGS K,FITZPATRICK E,et al.Incidence of congenital cytomegalovirus infection in Ireland:implications for screening and diagnosis[J].J Clin Virol,2014,59(3):156-160.

[8]趙興艷．小兒巨細(xì)胞感染92例臨床分析[J]．中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2015，31(3)：66-67．

[9]黃玉玲．不同年齡階段兒童巨細(xì)胞病毒感染臨床表現(xiàn)差異探討[J]．臨床醫(yī)學(xué)工程，2016，23(6)：729-730．

[10]鄺輝，周瑾，張媛，等．嬰幼兒巨細(xì)胞病毒IgM抗體陽(yáng)性結(jié)果分析及臨床應(yīng)用意義[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37(13)：1840-1841．

[11]朱艷萍，于珍，布月青，等．尿液CMV-DNA聯(lián)合血清CMV-IgM檢測(cè)對(duì)嬰幼兒巨細(xì)胞病毒感染的診斷價(jià)值[J]．中國(guó)婦幼保健，2015，30(18)：2960-2962．

[12]袁浩，唐曾，周毅峰．巨細(xì)胞病毒的3種檢測(cè)方法在診斷小兒巨細(xì)胞病毒感染中的評(píng)價(jià)[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41(14)：2607-2610．

[13]吳曉波，呂貞燕，何勇．更昔洛韋聯(lián)合丙種免疫球蛋白治療嬰兒巨細(xì)胞病毒感染的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J]．臨床藥物治療雜志，2016，14(2)：31-36．