張云領(lǐng) 徐濤 齊遵利

摘 要：以南美白對蝦為研究對象，研究了在飼料中添加酵母培養(yǎng)物（在100 g飼料中分別添加0、0.07、0.14 g）及在水體中添加枯草芽孢桿菌（添加量分別為0、0.1、0.2 g/m3）對生長性能及水質(zhì)的影響。結(jié)果表明，各試驗組對蝦成活率存在顯著性差異（P<0.05），隨著芽孢桿菌添加量的增加對蝦成活率呈上升趨勢，養(yǎng)殖水體中氨氮、亞硝態(tài)氮、溶解氧水平呈下降趨勢，硝態(tài)氮無明顯變化并始終處于上升趨勢。結(jié)果顯示酵母培養(yǎng)物的最適添加量為每100 g南美白對蝦基礎(chǔ)飼料中0.14 g、養(yǎng)殖水體中枯草芽孢桿菌的適宜添加量為0.1 g/m3。

關(guān)鍵詞：酵母培養(yǎng)物；枯草芽孢桿菌；南美白對蝦；生長；水質(zhì)

養(yǎng)蝦過程中最怕的就是蝦得病，所以做好蝦病的預(yù)防非常重要。提高對蝦的免疫力和改善養(yǎng)殖水環(huán)境，降低蝦池中的氨氮、亞硝態(tài)氮等有害物質(zhì)是蝦病防治的重要措施。酵母培養(yǎng)物是一種發(fā)酵產(chǎn)品，主要成分為培養(yǎng)基、酵母菌菌體以及次級代謝產(chǎn)物，在飼料中添加后能夠調(diào)節(jié)腸道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境、促進(jìn)養(yǎng)殖動物生長、增強(qiáng)動物免疫力[1]。芽孢桿菌為桿菌科的一屬，是一類好氧的革蘭氏陽性菌，能夠?qū)B(yǎng)殖水體中的有機(jī)質(zhì)進(jìn)行分解，降低養(yǎng)殖水體富營養(yǎng)化，同時將氨氣、二氧化碳等轉(zhuǎn)化為無害物質(zhì)[2]。本試驗在南美白對蝦飼料中添加酵母培養(yǎng)物和在養(yǎng)殖水體中潑灑枯草芽孢桿菌，探討其對對蝦生長和對養(yǎng)殖水質(zhì)的調(diào)節(jié)效果，篩選其最適宜添加量。

1 材料與方法

1.1 試驗用蝦

試驗用南美白對蝦蝦苗來自于正大（卜蜂）公司，蝦苗空運至天津后轉(zhuǎn)運至唐山樂亭試驗地點進(jìn)行暫養(yǎng)，使其先適應(yīng)試驗養(yǎng)殖環(huán)境。

1.2 試驗條件

試驗在體積為1 m×0.5 m×0.6 m的水族箱中進(jìn)行，溫度控制在29 ℃、鹽度28‰。

1.3 試驗分組

分別于每100 g南美白對蝦基礎(chǔ)飼料中添加0、0.07、0.14 g酵母培養(yǎng)物；向養(yǎng)殖水體中添加枯草芽孢桿菌，添加量分別為0、0.1、0.2 g/m3，每隔3 d添加一次，共形成9種試驗組，分別為：T1：0 g、0×1010 cfu/g（對照組）； T2：0 g、0.1×1010 cfu/g； T3：0 g、0.2×1010 cfu/g；T4：0.07 g、0×1010 cfu/g；T5：0.07 g、0.1×1010 cfu/g； T6：0.07 g、0.2×1010 cfu/g；T7：0.14 g、0×1010 cfu/g； T8：0.14 g、0.1×1010 cfu/g； T9：0.14 g，0.2×1010 cfu/g。試驗共設(shè)三個平行組。

1.4 日常管理

枯草芽孢桿菌潑灑前先將其活化，活化用水由80%的淡水和20%的海水配制而成，鹽度不宜過高，向菌液中加少量赤砂糖、氮源和附著基（稻糠）進(jìn)行充氣培養(yǎng)。培養(yǎng)24 h后，菌落總數(shù)達(dá)到上升期，使用200目篩絹將大型雜質(zhì)過濾分離。

選取平均體重為0.04±0.01 g、體質(zhì)健壯、活力強(qiáng)的蝦苗飼養(yǎng)于水族箱內(nèi)，每箱放養(yǎng)200尾，每箱放置一個充氣氣石，試驗所用海水經(jīng)二級砂濾和紫外線消毒。試驗周期為50 d，每天投喂5次，投喂時間分別為06：00、10：00、14：00、18：00、22：00，日投飼率約為對蝦體重的5%左右，將蝦苗的攝食時長控制在1 h，日換水量為養(yǎng)殖水體的10%，各試驗組換水量一致。

1.5 對蝦生長測定

特定生長率（SGR）=100×（lnW末-lnW始）/T

飼料系數(shù)=飼料投喂總量（g）/對蝦體重增加量（g）

成活率（%）= N末/N始×100

其中W末（g）、W始（g）分別代表對蝦最終平均重和初始平均重；N末、N始分別代表試驗結(jié)束和開始時的對蝦苗數(shù)量；T為養(yǎng)殖天數(shù)。

1.6 水質(zhì)測定

樣品分析測試溫度、鹽度、pH（pH計法）、溶解氧（碘量法）、氨氮（靛酚藍(lán)分光光度法）、亞硝態(tài)氮（萘乙二胺分光光度法）、硝態(tài)氮（紫外分光光度法）。操作步驟按照《海洋監(jiān)測規(guī)范》（GB 17378.4-2007）、《海洋調(diào)查規(guī)范》（GB 12763-2007） 的要求執(zhí)行。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)采用（平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）的方法進(jìn)行表示，用 SPSS17.0 進(jìn)行單因素方差分析，并結(jié)合Duncan 氏法進(jìn)行多重分析比較，差異顯著水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母培養(yǎng)物及枯草芽孢桿菌對南美白對蝦生長性能的影響

由表1所示，隨著飼料中酵母培養(yǎng)物添加量的增加，對照組與T2、T3試驗組特定生長率均有所上升，無顯著性差異（P>0.05），與其他試驗組比較存在顯著性差異（P<0.05）。水體中添加枯草芽孢桿菌對對蝦的生長性能影響很小，各組之間無顯著性差異（P>0.05）。在飼料系數(shù)方面以對照組，T2組、T3組的飼料系數(shù)最高，T7與T9組最低，T7與T9之間飼料系數(shù)無顯著性差異（P<0.05），其他各組之間比較存在顯著性差異（P<0.05）。對照組成活率最低、T5、T2組與各試驗組存在顯著性差異（P<0.05），水體中枯草芽孢桿菌濃度增加南美白對蝦的成活率呈上升趨勢，有顯著性差異（P<0.05）。

2.2 酵母培養(yǎng)物及枯草芽孢桿菌對水質(zhì)的影響

2.2.1 對溫度、鹽度、溶解氧、pH的影響 由表2所示，溫度和鹽度在整個試驗期間變化較小，經(jīng)過比較各組之間無顯著性差異。對照組與T2試驗組的溶氧量顯著高于其他各試驗組且存在顯著性差異（P<0.05），T3、T4、T5、T6試驗組之間無顯著性差異，與T7、T8、T9試驗組之間進(jìn)行比較存在顯著性差異（P<0.05）。整個養(yǎng)殖過程中隨著添加微生態(tài)制劑濃度的增加pH下降明顯，對照組與T2、T3、T4組之間無顯著性差異（P>0.05），T5試驗組同各試驗組間均有顯著性差異，對照組與T2組之間無顯著性差異（P>0.05），T6、T7、T8、T9組之間無顯著性差異（P<0.05 ）。

2.2.2 對氨氮的影響 由圖1可知，各組氨氮濃度上升幅度有所差異。在養(yǎng)殖到第10 d時，所有組別的氨氮含量均低于0.4 mg/L，T6組的上升幅度最小，在第10 d時達(dá)到0.11 mg/L，T1與T4組的上升幅度最大。在之后的養(yǎng)殖試驗過程中T6組均顯著低于其他各試驗組，養(yǎng)殖到第50 d時，T3與T9組的氨氮含量顯著低于其他各組（P<0.05），T4組的氨氮含量達(dá)到最高1.13 mg/L，T3、T9組與其他各組之間存在顯著性差異（P<0.05）。

2.2.3 對亞硝態(tài)氮的影響 由圖2可知，養(yǎng)殖過程中第10 d時各試驗組水體亞硝態(tài)氮的含量均高于0.05 mg/L。在之后的養(yǎng)殖過程中，T1組亞硝態(tài)氮含量均顯著高于其他各組（P<0.05），各組之間的差異性不顯著（P>0.05），當(dāng)養(yǎng)殖到第40 d時，各試驗組的亞硝態(tài)氮含量達(dá)到頂峰，之后開始出現(xiàn)不同程度的下降趨勢，試驗結(jié)束時對照組與各試驗組的亞硝態(tài)氮含量具有顯著性差異（P<0.05）。

2.2.4 對硝態(tài)氮的影響 由圖3可知，各試驗組水體中的硝態(tài)氮含量在養(yǎng)殖前20 d一直比較穩(wěn)定，在養(yǎng)殖20 d之后硝態(tài)氮整體呈快速上升趨勢，上升過程中各組無顯著性差異（P>0.05）。

3 討論

3.1 酵母培養(yǎng)物及枯草芽孢桿菌對南美白對蝦生長性能的影響

試驗結(jié)果表明，在對蝦生長方面添加酵母培養(yǎng)物的試驗組較對照組增重率有所上升但無顯著性差異（P>0.05），但是在提高南美白對蝦成活率，降低飼料系數(shù)的方面具有明顯作用。在水體中加入枯草芽孢桿菌對于南美白對蝦的生長性能影響不顯著，各組之間也無顯著性差異（P>0.05），但能顯著提高對蝦成活率和降低飼料系數(shù)。劉哲，魏時來等[3]試驗證明，在飼料中添加0.5%的“XP”（一種純正的酵母培養(yǎng)物）對建鯉的生長有明顯的促進(jìn)作用，其特定生長率比對照組提高了26.83%，飼料系數(shù)降低了22.54%。本試驗結(jié)果與劉哲，魏時來等和周淑芹等在飼料中單獨添加酵母培養(yǎng)物后得出酵母培養(yǎng)物具有提高生長性能、降低飼料系數(shù)、提高蛋白質(zhì)利用率的結(jié)果有類似性[4]。分析其原因，酵母培養(yǎng)物中主要成分為葡聚糖及甘露寡糖，在南美白對蝦養(yǎng)殖過程中，通過向飼料中添加酵母培養(yǎng)物可以增加對蝦腸道內(nèi)有益菌的數(shù)量，從而抑制腸道內(nèi)弧菌的繁殖。本研究結(jié)果表明，在南美白對蝦飼料中添加酵母培養(yǎng)物能在一定程度上促進(jìn)有益菌的繁殖、減少腸道弧菌繁殖、降低飼料系數(shù)，從而起到調(diào)節(jié)腸道菌群平衡的作用。

3.2 酵母培養(yǎng)物及枯草芽孢桿菌對水質(zhì)的影響

試驗結(jié)果表明，在養(yǎng)殖水體中添加枯草芽孢桿菌后發(fā)現(xiàn)水體中亞硝態(tài)氮，氨氮的量呈下降趨勢，與對照組比較存在顯著性差異（P<0.05）。添加枯草芽孢桿菌的試驗組與未添加枯草芽孢桿菌的對照組相比，飼料系數(shù)顯著降低，分析原因可能是枯草芽孢桿菌能夠利用水體中的殘餌糞便生成的絮團(tuán)類物質(zhì)被南美白對蝦攝食所致。張慶等向羅非魚養(yǎng)殖水體中添加枯草芽孢桿菌后能有效控制養(yǎng)殖水體中的氨氮與亞硝態(tài)氮，對羅非魚的生長性能也有一定的促進(jìn)作用[5]。富麗靜等[6]在高密度鯽魚池塘中加入以枯草芽孢桿菌為主的微生物制劑進(jìn)行水環(huán)境調(diào)控，發(fā)現(xiàn)試驗池的氨氮明顯低于對照池。本試驗結(jié)果與朱學(xué)芝[7]和朱忠琴[8]等的研究觀點相一致。

4 結(jié)論

在100 g南美白對蝦基礎(chǔ)飼料中添加0.14 g酵母培養(yǎng)物，在養(yǎng)殖水體中按0.1 g/m3的量添加枯草芽孢桿菌，對南美白對蝦的生長性能具有顯著的促進(jìn)作用，對水中的氨氮、亞硝態(tài)氮有明顯的改善作用。

參考文獻(xiàn)：

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[7] 朱學(xué)芝，鄭石軒，潘慶軍，陸秉招.微生態(tài)制劑對凡納濱對蝦生長及水質(zhì)的影響[J].中山大學(xué)學(xué)報，2008，7（47卷）：58-62.

[8] 朱忠琴，王篤彩，李士虎.復(fù)合微生態(tài)制劑對蝦池水體環(huán)境的影響研究[J].生物技術(shù)與育種，2005，13：29-31.