李繼友，高麗梅

（1.天津渤海職業(yè)技術(shù)學(xué)院，天津300402，2.天津市華宇農(nóng)藥有限公司，天津300384）

異噁唑草酮屬高效低毒除草劑，是一種有機(jī)雜環(huán)類選擇性內(nèi)吸型異噁唑類除草劑，主要用于玉米、甘蔗等旱作物苗前土壤處理。異噁唑草酮主要經(jīng)由敏感雜草幼根吸收傳導(dǎo)，抑制對(duì)羥基苯丙酮雙氧酶(HPPD)的產(chǎn)生進(jìn)而阻止形成葉綠素，抑制光合作用，導(dǎo)致雜草失綠枯萎死亡。每畝地有效成分用量僅為6g，當(dāng)在土壤中施用異噁唑草酮后，因土壤墑情不好有效成分滯留于表層土壤中，不能及時(shí)防除雜草，但較長時(shí)間不被分解，等到降雨或灌溉時(shí)，仍能防除雜草，甚至能殺傷和抑制長到4～5葉的敏感雜草。異噁唑草酮原藥2014年才在我國正式登記，登記的制劑品種也只有拜耳公司的一個(gè)水分散粒劑品種，20%異噁唑草酮水懸浮劑的開發(fā)，能夠?yàn)槲覈峁┮粋€(gè)新的對(duì)環(huán)境友好的玉米田土壤處理的優(yōu)秀除草劑，成為取代莠去津、乙草胺、甲草胺、以及異丙甲草胺等的重要除草劑之一[1～3]，對(duì)實(shí)現(xiàn)我國玉米田雜草的可持續(xù)控制有重要意義。目前用高效液相色譜法分析異噁唑草酮水懸浮劑溶液有效成分含量國內(nèi)未見報(bào)道。因此，本文使用迪馬C18（3.5um，100x4.6mm）柱對(duì)不同濃度異噁唑草酮水懸浮劑試樣中有效成分進(jìn)行定量分析研究，并對(duì)檢測(cè)波長進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后為420nm，最大限度的提高檢測(cè)精度避免干擾，該方法線性相關(guān)系數(shù)好，精密度能滿足分析要求，適合于異噁唑草酮水懸浮劑溶液質(zhì)量的檢測(cè)控制。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑

異噁唑草酮原藥（98%，江蘇中旗作物保護(hù)股份有限公司）；乙腈(色譜純，迪馬科技有限公司)；氯化鈉(分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；純凈水(娃哈哈純凈水)。

1.2 儀器

儀器：Agilent1260液相色譜儀-紫外檢測(cè)器：電子天平：MS304S；Vortex-genie2快速混勻器；移液槍，移液管，容量瓶，分液漏斗，濾膜，注射器等。

1.3 色譜操作條件

流動(dòng)相：V（乙腈）∶V（水）=65∶35

流速：1mL/min

進(jìn)樣量：20μL

柱溫：35℃

檢測(cè)波長（紫外）：220 nm

保留時(shí)間：異噁唑草酮約2.289min,異噁唑草酮的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 異噁唑草酮液相色譜圖

2 結(jié)果分析與討論

2.1 流動(dòng)相的選擇

實(shí)驗(yàn)過程中分別使用了 V(甲醇)∶V（水）＝80∶20、V（乙腈）∶V（水）=65∶35等流動(dòng)相配比進(jìn)行試驗(yàn)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙腈—水(體積比65∶35)為實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相時(shí)，對(duì)異噁唑草酮的分離效果最好，峰形尖銳，保留時(shí)間適中，最后確定實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相為乙腈—水(體積比 65∶35)。

2.2 檢測(cè)波長的選擇

利用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)異噁唑草酮試樣的紫外可見吸收進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)異噁唑草酮試樣在220nm波長下具有較強(qiáng)吸收。利用高效液相色譜對(duì)不同濃度的異噁唑草酮試樣在220nm波長下進(jìn)行測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果顯示試樣的吸收峰強(qiáng)且雜質(zhì)的響應(yīng)值小，在3min內(nèi)能達(dá)到基線分離。因此，確定用220nm為檢測(cè)波長。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定

稱量22.1mg標(biāo)準(zhǔn)品異噁唑草酮（含量97.5%），用乙腈溶液定容到25mL容量瓶中，搖勻后得到濃度為861.9mg a.i./L的異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)母液，待用。

設(shè)定5個(gè)梯度濃度，配制5種不同濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的標(biāo)樣溶液。稀釋上述標(biāo)準(zhǔn)母液，用乙腈定容，搖勻后得到濃度分別為 0.400、1.00、2.00、4.00、6.00mg a.i./L標(biāo)準(zhǔn)曲線系列濃度溶液（異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)溶液配制見表1），將配制的標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液按照儀器條件依次進(jìn)樣，以進(jìn)樣濃度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)樣線性關(guān)系曲線，結(jié)果如圖2所示?？梢缘玫疆悋f唑草酮的線性回歸方程和相關(guān)系數(shù):y=21.7886x-0.1534,R2=0.9998。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明異噁唑草酮在測(cè)定的質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果如表2所示，異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見圖2。

圖2 異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

表1 異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)溶液配制表

表2 異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果

2.4 添加回收率的測(cè)定

通過對(duì)試樣回收率的試驗(yàn)可以考察該分析方法的準(zhǔn)確度。設(shè)定兩個(gè)添加濃度，添加濃度分別為8.00、250μga.i./L。添加溶液配制見表3，每個(gè)添加濃度重復(fù)測(cè)定5次。異噁唑草酮水中添加回收試驗(yàn)結(jié)果見表4。在相同的色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定?？梢詼y(cè)得，添加8.00μga.i./L.的平均回收率為88.4%，RSD為6.78%；添加250μga.i./L.的平均回收率為98.0%，RSD為4.11%。

表3 添加溶液配制表

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測(cè)定異噁唑草酮含量，以乙腈-水為流動(dòng)相，迪馬 C18（3.5μm，100x4.6mm）柱對(duì)不同濃度異噁唑草酮水懸浮劑試樣中有效成分進(jìn)行了定量分析，檢測(cè)波長為420nm，8.00μga.i./L、250μga.i./L異噁唑草酮懸浮劑的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD分別為6.78%、4.11%；平均回收率分別為88.4%、98.0%。質(zhì)量濃度0.40～6.00mg/L之間線性相關(guān)系數(shù)為R2=0.9998。通過實(shí)驗(yàn)表明，該方法具有分離效果好、精密度和準(zhǔn)確度高、操作簡(jiǎn)便、分析時(shí)間短等特點(diǎn)，符合定量分析要求，是進(jìn)行異噁唑草酮含量較為理想的分析方法。

表4 異噁唑草酮水中添加回收試驗(yàn)結(jié)果

參考文獻(xiàn):

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