王艷春
深圳市龍崗中心醫(yī)院輸血科,廣東深圳 518172
輸血是臨床常用的治療手段,近年來由于臨床輸血的普及和臨床輸血量的增加,輸血對機體產(chǎn)生的影響也日益受到重視,血液具有復雜的生理功能,包括氧的傳送、凝血以及免疫等[1-2],近年來的研究顯示[3-4],紅細胞不僅具有攜氧等生理功能,而且具有免疫功能,紅細胞免疫功能參與機體整體免疫網(wǎng)絡(luò)的夠成,如對外來抗原的吸附,參與對腫瘤細胞的識別等。輸血對紅細胞免疫功能的影響目前尚少有報道,本文就臨床反復輸血患者紅細胞免疫功能的變化進行研究,為臨床輸血安全提供進一步的資料。
選擇2016年2月~2017年6月我院收治的需輸血治療的患者126例,其中男74例,女52例,年齡29~63歲,平均(47.2±8.5)歲,其中消化道出血36例,慢性腎病貧血52例,功能性子宮出血29例,其它原因貧血9例,患者入選標準:(1)急性失血Hb<90g/L或慢性失血Hb<70g/L;(2)原發(fā)病診斷明確,預期輸血能夠取得可靠效果;(3)Hb降低未達到輸血標準,但有較為炎癥的失血或貧血相關(guān)癥狀;(4)患者對研究內(nèi)容知情同意。排除標準:(1)免疫性溶血性貧血患者;(2)合并免疫系統(tǒng)疾病,可能影響紅細胞免疫功能者;(3)長期應用免疫抑制劑或糖皮質(zhì)激素者;(4)合并惡性腫瘤,可能導致紅細胞免疫異常者?;颊呷脒x后按輸血次數(shù)分為對照組及研究組,其中對照組63例,男38例,女25例,年齡29~61歲,平均(47.1±8.7)歲,其中消化道出血19例,慢性腎病貧血24例,功能性子宮出血15例,其它原因貧血5例,研究組63例,其中男36例,女27例,其中消化道出血17例,慢性腎病貧血28例,功能性子宮出血14例,其它原因貧血4例,兩組患者年齡、性別、基礎(chǔ)疾病等一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。
患者入組后均積極治療原發(fā)病,輸血指征明確,輸注紅細胞懸液,輸血前常規(guī)交叉配血,檢測不規(guī)則抗體,輸血前0.9%NaCL沖洗管道,紅細胞出庫后4h內(nèi)輸注完畢,輸注過程中嚴密觀察不良反應發(fā)生情況,輸注紅細胞后血袋送輸血科保留24h備查,輸血前及輸血后24h行靜脈血血細胞分析檢查,評價輸血效果。
兩組患者輸血前及輸血后48h采集靜脈血檢測紅細胞粘附免疫功能(RBC.C3bR、RFER、RBC.IC)和紅細胞腫瘤免疫功能(DTER、NTER、ATER和ETER),檢測方法采用郭氏法[5-6]。RBC.C3bR檢測:酵母試劑(上海通蔚生物科技有限公司)用Hanks液配成含1×108酵母細胞/mL的懸液,然后加等量新鮮豚鼠血清,37℃水浴20min,加入C3b抗原致敏酵母菌株,靜脈血分離紅細胞,采用Hanks液洗滌3次,稀釋成125×107細胞/mL的懸液C3b致敏酵母懸液和紅細胞懸液各50μL,混勻,于37℃水浴40min后取出,涂片干燥,甲醇固定,姬姆薩氏染液染色,高倍鏡檢查,計算花環(huán)率;RBC.IC檢測過程同上,檢測過程不采用C3b抗原至敏酵母菌,RFER檢測分別采用滅活血清及正常血清檢測花環(huán)率,按下列公式計算,RFER=滅活血清花環(huán)率-正常血清花環(huán)率/滅活血清花環(huán)率×100%,DTER、NTER、ATER及ETER檢測過程分別采用凍干補體致敏和未致敏的肝癌細胞株,按上述步驟進行檢測。
采用統(tǒng)計學軟件SPSS11.5版對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,計量資料采用(x±s)表示,采用t檢驗,計數(shù)資料采用百分數(shù)(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
兩組患者輸血前RBC.C3bR、RFER、RBC.IC比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),輸血后兩組患者RBC.C3bR、RFER均較輸血前降低(P<0.05),RBC.IC較輸血前增高(P<0.05),輸血后研究組RBC.C3bR、RFER低于對照組(P<0.05),RBC.IC高于對照組(P<0.05)。見表1。
表1 兩組患者輸血前后紅細胞粘附免疫功能比較(x ± s,%)
兩 組 患 者 輸 血 前 DTER、NTER、ATER和ETER比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),輸血后兩組DTER、NTER、ATER和ETER均較輸血前降低(P<0.05),輸血后研究組DTER、NTER、ATER和ETER低于對照組(P<0.05)。見表2。
近年來的研究顯示[7-8],紅細胞具有免疫功能,參與機體整體免疫網(wǎng)絡(luò)的夠成,紅細胞表面粘附具有多種抗體,能夠識別、粘附抗原,清除抗原抗體免疫復合物,紅細胞表面的主要抗體包括Ⅰ型補體受體、NK細胞增強因子、阿片類受體以及紅細胞趨化因子受體等,能夠通過與抗原以及其他細胞的受體發(fā)揮免疫作用,如參與對腫瘤細胞的免疫清除,參與對炎癥因子的免疫作用發(fā)揮抗感染作用等。
紅細胞的免疫功能受多種因素的影響,如自身的免疫功能狀態(tài)、紅細胞的功能狀態(tài)、衰老因素、遺傳因素以及其它疾病的影響等[9]。有研究顯示[10-11],輸血能夠引起自身免疫功能的變化,如T淋巴細胞免疫功能的抑制,免疫球蛋白表達的下降以及紅細胞免疫功能狀態(tài)的改變等。在對本組資料的研究發(fā)現(xiàn),兩組患者輸血后紅細胞 粘附免疫功能以及腫瘤免疫功能均較輸血前不同程度下降,其中RBC.C3bR及RFER下降,RBC.IC升高,而研究組的變化要較對照組更為明顯,輸血后研究組的RBC.C3bR及RFER要低于對照組,RBC.IC高于對照組,而輸血后的DTER、NTER、ATER和ETER比要低于對照組,提示反復輸血對受血者的紅細胞免疫功能具有明顯的影響,RBC.C3bR、RFER及RBC.IC能夠反應紅細胞的粘附免疫功能,RBC.C3bR、RFER能夠反應紅細胞膜表面粘附受體的情況,RBC.C3bR、RFER降低說明紅細胞表面受體減少,說明紅細胞自身的免疫功能下降,RBC.IC能夠反應外周抗原免疫復合的增加情況,其表達上調(diào)說明循環(huán)免疫復合物增多,RBC.C3bR、RFER及RBC.IC的變化說明紅細胞的免疫功能降低與繼發(fā)性的因素有關(guān)[12-13],其可能與反復輸血導致的異體血中抗原成分形成循環(huán)免疫復合物,占據(jù)紅細胞表面的受體,導致活性受體的相對量下降,導致其粘附功能降低,粘附免疫功能受損[14]。DTER、NTER、ATER和ETER是一組反應與紅細胞腫瘤免疫有關(guān)的指標,包括對體內(nèi)對腫瘤表面抗原的識別以及NK細胞殺傷腫瘤的趨化等作用的相關(guān)受體,DTER、NTER、ATER和ETER的下降能夠反應紅細胞腫瘤免疫作用受到抑制[15-16],其可能同紅細胞自身免疫功能的改變、外周循環(huán)免疫復合物的競爭性抑制以及血制品中某些理化成分的改變有關(guān)[17]。
表2 兩組輸血前后紅細胞腫瘤免疫功能比較(x ± s,%)
綜上所述,反復輸注紅細胞能夠引起受血者紅細胞免疫功能的降低,其可能增加患者預后不良的風險,在臨床疾病的治療過程中,要嚴格掌握輸血的指征,合理利用輸血技術(shù)進行臨床疾病的治療,降低輸血風險,提高輸血質(zhì)量。
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