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        乙型病毒性肝炎患者血清炎癥因子及趨化因子表達(dá)及意義

        2018-04-03 06:58:37趙小麗高鵬劉俊華周鳳蕊王佳樂(lè)李廣明
        關(guān)鍵詞:趨化因子中度乙型肝炎

        趙小麗,高鵬,劉俊華,周鳳蕊,王佳樂(lè),李廣明

        (鄭州市第六人民醫(yī)院肝病五科,鄭州450061)

        乙型肝炎的發(fā)生,可以顯著促進(jìn)肝臟細(xì)胞代謝功能的損傷,加劇肝臟纖維化或者肝癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。流行病學(xué)研究顯示,急性乙型肝炎或者慢性乙型肝炎的發(fā)病率可達(dá)375~456/10萬(wàn)人以上[1],特別是在部分經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū),乙型肝炎的發(fā)病率更高。在探討乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),細(xì)胞炎癥因子或者趨化因子的高表達(dá)可以通過(guò)加劇肝臟細(xì)胞的炎癥損傷、促進(jìn)細(xì)胞膜完整性的破壞,并通過(guò)加劇肝臟細(xì)胞間質(zhì)細(xì)胞的纖維化,進(jìn)而促進(jìn)乙型肝炎的病情進(jìn)展[2-3]。趨化因子(CXCL16和CXCL11)及血清炎癥因子(IL-6、IL-10、IL-12)等在影響肝臟細(xì)胞線(xiàn)粒體損傷或者代償功能障礙的過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用[4-5]。本研究選取93例乙型肝炎患者,進(jìn)一步探討炎癥因子及趨化因子在乙肝患者外周靜脈血中的異常表達(dá)及意義。

        1 資料與方法

        1.1一般資料選取2015年2月-2017年2月在我院治療的慢性乙型肝炎患者93例,其中輕度患者37例,中度患者30例,重度患者26例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)[5];(2)入院前未接受免疫調(diào)節(jié)和抗病毒治療;(3)患者知情同意并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并甲肝、丙肝等病毒性感染以及酒精性肝炎、脂肪肝、自身免疫性肝炎等其他肝炎;(2)合并有惡性腫瘤、自身免疫性疾病等疾病。同時(shí)選取40例健康志愿者作為對(duì)照組,3組受試者性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表 1。

        表1 4組一般資料比較Tab 1 Comparison of general data of patients in the 4 groups

        1.2檢測(cè)方法所有患者均于入院24 h內(nèi)采集空腹靜脈血約5 mL并分作2份,1份自然抗凝后以3 000 r/min離心10 min,取上清液采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中CXCL16、CXCL11水平,檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物有限公司,具體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作;另一份置于枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi),加入IL-6、IL-10和IL-12檢測(cè)試劑盒后,利用膠體金法檢測(cè)IL-6、IL-10和IL-12水平,試劑盒購(gòu)自上海奧普生物醫(yī)藥有限公司,具體檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

        1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0軟件,計(jì)量資料采用±s表示,多組間比較使用方差分析,兩兩比較采用LSD檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析,以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1各組血清炎癥因子及趨化因子比較輕度、中度和重度組CXCL16、CXCL11明顯高于對(duì)照組(P<0.05);重度組IL-6、IL-10和IL-12明顯高于輕度組、中度組和對(duì)照組(P<0.05);中度組 IL-6、IL-10和IL-12明顯高于輕度組和對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

        表2 各組血清炎癥因子及趨化因子比較Tab 2 Comparison of serum inflammatory factors and chemokines in each group

        2.2各組生化指標(biāo)比較輕度、中度和重度組AST、ALT和 DBIL 明顯高于對(duì)照組(P<0.05),而 TC明顯低于對(duì)照組(P<0.05);3組TG比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05),見(jiàn)表 3。

        表3 各組生化指標(biāo)比較Tab 3 Comparison of biochemical indexes of patients of each group

        2.3各組HBV DNA比較重度組HBV DNA明顯高于中度和輕度組(P<0.05);中度組HBV DNA明顯高于輕度組(P<0.05),見(jiàn)表 4。

        表4 各組HBV DNA比較Tab 4 Comparison of HBV DNA in each group

        2.4相關(guān)性分析將乙肝患者炎癥因子與生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析:IL-6和IL-12與ALT成正相關(guān)(r=0.404和0.434,P<0.05),而 IL-10與 ALT成負(fù)相關(guān)(r=-0.341,P <0.05);將趨化因子與生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析:CXCL16與生化指標(biāo)無(wú)相關(guān)性(P>0.05);將炎癥因子與趨化因子進(jìn)行相關(guān)分析:IL-6、IL-12和 IL-10與 CXCL16、CXCL11無(wú)相關(guān)性(P>0.05);將HBV DNA與生化指標(biāo)、趨化因子、炎癥因子進(jìn)行相關(guān)分析:HBV DNA 與 ALT、AST、CXCL16呈正相關(guān)(r=0.302、0.305 和 0.413,P<0.05)。

        3 討論

        乙型肝炎的發(fā)生,主要與乙型肝炎病毒感染導(dǎo)致的肝細(xì)胞損傷有關(guān)[6-7]。同時(shí)乙型肝炎治療后患者的肝臟細(xì)胞功能損傷仍然較為明顯[8-9]。而通過(guò)對(duì)乙型肝炎發(fā)病過(guò)程中炎癥因子或者趨化因子的變化研究,可以為臨床上乙型肝炎的生物學(xué)治療提供理論基礎(chǔ),也可以為乙型肝炎的臨床病情預(yù)后評(píng)估提供參考。

        炎癥因子(IL-6、IL-10和IL-12)等的高表達(dá),可以通過(guò)下游炎癥信號(hào)通路ROCH的激活,加劇單核細(xì)胞或者巨噬細(xì)胞的上調(diào),促進(jìn)乙型肝炎患者的炎癥性損傷和氧化應(yīng)激損傷[10];IL-6、IL-10和IL-12等的高表達(dá),也在促進(jìn)肝臟細(xì)胞的線(xiàn)粒體能量利用障礙或者加劇呼吸鏈氧化損傷等方面發(fā)揮了重要作用,影響肝臟細(xì)胞膜的完整性;CXCL16和CXCL11等趨化因子的表達(dá),能夠在誘導(dǎo)炎癥因子或者免疫因子及補(bǔ)體成分激活的同時(shí),促進(jìn)不同炎癥信號(hào)通路的交叉式激活導(dǎo)致的病情進(jìn)展[11-12]。已有的研究探討了細(xì)胞炎癥因子在乙肝患者中的異常表達(dá),認(rèn)為高表達(dá)的IL-6或者其他類(lèi)型的細(xì)胞炎癥因子,可以顯著促進(jìn)肝臟細(xì)胞膜的氧化應(yīng)激損傷,促進(jìn)肝臟細(xì)胞膜的損傷,加劇肝功能障礙的形成;另外部分研究探討了趨化因子的血清學(xué)異常表達(dá),認(rèn)為異常表達(dá)的趨化因子能夠抑制肝臟細(xì)胞膜的修復(fù),促進(jìn)代謝性相關(guān)損傷的發(fā)生,加劇病情的進(jìn)展。

        在本研究中可以發(fā)現(xiàn),急性乙肝組和慢性乙肝組CXCL16、CXCL11明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示相關(guān)趨化因子的異常表達(dá)可能參與了疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程,趨化因子的表達(dá)可以通過(guò)影響到免疫因子補(bǔ)體成分的激活,促進(jìn)炎癥因子如腫瘤壞死因子的激活等,促進(jìn)肝臟細(xì)胞的損傷,加劇乙型肝炎病情的進(jìn)展。鄧玉奎等[13-14]在探討重度乙型肝炎患者的發(fā)病機(jī)制的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),趨化因子如CXCL16表達(dá)濃度超過(guò)55%時(shí),其可以顯著促進(jìn)肝功能的損傷,加劇肝功能失代償?shù)娘L(fēng)險(xiǎn),且患者的病情越為嚴(yán)重,相關(guān)血清學(xué)趨化因子的異常表達(dá)越為明顯,這些均提示了趨化因子或者細(xì)胞炎癥因子的異常表達(dá)在乙肝發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。對(duì)于IL-6、IL-10和IL-12等炎癥因子的表達(dá)關(guān)系分析可見(jiàn),在急性組及慢性組患者血清中,均存在明顯的IL-6、IL-10和IL-12的高表達(dá),高于正常對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,特別是在慢性乙型肝炎患者血清中,相關(guān)炎癥因子的指標(biāo)變化較為明顯,IL-6、IL-10和IL-12等的高表達(dá),可以通過(guò)下列幾個(gè)方面影響到肝炎患者的病情:(1)IL-6可以促進(jìn)單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞對(duì)于肝臟間質(zhì)細(xì)胞的浸潤(rùn),促進(jìn)肝臟小葉結(jié)構(gòu)的重塑;(2)IL-12等的上升,促進(jìn)了肝臟上皮細(xì)胞功能代償?shù)漠惓?,影響了?xì)胞膜的完整性。在乙型肝炎組患者中,AST、ALT和DBIL明顯高于對(duì)照組,提示肝炎患者體內(nèi)存在明顯的干細(xì)胞功能損傷或者膽汁酸代謝障礙,同時(shí)甘油三酯等指標(biāo)同樣存在一定的異常表達(dá),這主要考慮與短時(shí)間內(nèi)肝臟細(xì)胞的生化代償功能的異常有關(guān)。HBV DNA的表達(dá)在中度或者重度病情的患者中的表達(dá)明顯上升,特別是重度組患者的血清中相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)可進(jìn)一步上升,提示了HBV DNA的表達(dá)與患者的病情嚴(yán)重程度的關(guān)系,這主要考慮與HBV DNA的表達(dá)能夠影響到肝臟細(xì)胞的破壞、假小葉的形成及代償性肝臟纖維化損傷等過(guò)程有關(guān)。相關(guān)關(guān)系分析可見(jiàn),CXCL11與AIL成正相關(guān),同時(shí)IL-6和IL-12與ALT成正相關(guān),而IL-10與ALT成負(fù)相關(guān),這些均提示了炎癥因子或者趨化因子與乙型肝炎患者病情的關(guān)系。從機(jī)制上考慮,趨化因子與細(xì)胞炎癥因子的內(nèi)在相關(guān)關(guān)系,可能與下列幾個(gè)方面的因素有關(guān):(1)趨化因子如CXCL11的上升,可以促進(jìn)單核細(xì)胞或者巨噬細(xì)胞的激活,促進(jìn)下游細(xì)胞炎癥因子的激活,加劇肝臟細(xì)胞膜的損傷;(2)趨化因子及細(xì)胞炎癥因子如IL-6或者IL-12的結(jié)合,能夠在干擾肝臟細(xì)胞代謝、蛋白合成等方面發(fā)揮作用,影響到乙肝患者病毒顆粒對(duì)于肝臟細(xì)胞的破壞及損傷。相關(guān)性分析也可見(jiàn),HBV DNA的表達(dá)與患者的血清學(xué)炎癥因子指標(biāo)或者趨化因子指標(biāo)具有密切的關(guān)系,進(jìn)一步提示了HBV DNA的表達(dá)與肝炎患者的病情關(guān)系。本次研究的創(chuàng)新性在于探討了趨化因子在急性及慢性乙型肝炎患者血清中的異常表達(dá),同時(shí)揭示了細(xì)胞炎癥因子及趨化因子的內(nèi)在相關(guān)關(guān)系。

        綜上所述,乙肝患者IL-6、IL-10、IL-12以及CXCL16和CXCL11表達(dá)上調(diào),其中IL-6、IL-10、IL-12和CXCL11可一定程度反映肝功能損害程度。后續(xù)研究可以增加樣本量進(jìn)行多中心研究,進(jìn)一步探討不同的細(xì)胞炎癥因子或者趨化因子在乙肝患者中的異常表達(dá)及其與患者臨床預(yù)后的關(guān)系。

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