龐志峰 章光明 朱淑英 張兵 唐慧玲

摘要：【目的】了解金華市自然人群肺炎支原體（MP）感染率及抗體水平，為該疾病的防治提供依據(jù)?！痉椒ā坎捎梅謱与S機抽樣方法，采集1560名研究對象血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定肺炎支原體特異性抗體。

【結(jié)果】1560名調(diào)查者中，MP抗體陽性1000名，陽性率為64.1%，GMT為1∶60.3。不同地區(qū)、不同戶籍、不同性別人群MP抗體水平無差異。3月、6～9月所采集標(biāo)本抗體水平較高。不同年齡段抗體水平呈現(xiàn)“中間高、兩頭低”的現(xiàn)象，兒童和青少年的抗體水平相對較高?！窘Y(jié)論】金華市MP人群感染率較高，防控工作需要加強。

關(guān)鍵詞：肺炎支原體；抗體；流行病學(xué)；酶聯(lián)免疫吸附試驗

中圖分類號：R375+.2 文獻標(biāo)志碼：A DOI：10.19428/j.cnki.sjpm.2018.18359

肺炎支原體（MP）感染又稱原發(fā)性非典型肺炎、冷凝集試驗陽性肺炎，基本病理呈間質(zhì)性肺炎或毛細支氣管炎樣改變，臨床表現(xiàn)以頑固性劇烈咳嗽為特征。MP除引起肺部病變外，還可以引起支氣管炎、扁桃體炎、鼓膜炎，并且可引發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)病變，嚴重者可導(dǎo)致死亡[1]。為了解金華市自然人群MP感染狀況，2014—2015年該市疾病預(yù)防控制中心（CDC）開展了自然人群MP血清流行病學(xué)調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 對象

采用分層隨機抽樣方法，在金華市9個縣（市、區(qū)）內(nèi)隨機抽取東陽市、永康市、金東區(qū)和浦江縣4個縣（市、區(qū)）為研究地區(qū)，每個縣（市、區(qū)）按經(jīng)濟發(fā)展水平分別隨機抽取3～4個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）開展調(diào)查。根據(jù)2013年金華市一起MP肺炎暴發(fā)疫情處置過程中健康人群（病例對照研究中社區(qū)對照）抗體檢測結(jié)果，設(shè)置金華市人群MP抗體陽性率π為30%，容許誤差δ為2.5%，檢驗標(biāo)準α為0.05，估算樣本量為1200人。研究對象納入標(biāo)準：根據(jù)臨床呼吸道感染癥狀標(biāo)準，剔除任何患有與呼吸道感染相關(guān)疾病者，將符合研究標(biāo)準的人群按照戶籍分為本地和流動兩組，分0月[KG-*4]～、8月[KG-*4]～、2歲[KG-*4]～、4歲[KG-*4]～、6歲[KG-*4]～、8歲[KG-*4]～、10歲[KG-*4]～、15歲[KG-*4]～、20歲[KG-*4]～、30歲[KG-*4]～、40歲[KG-*4]～、50歲[KG-*4]～、60歲[KG-*4]～13個年齡段，每個年齡段調(diào)查不少于30人。調(diào)查期限為2014年10月—2015年9月，為減少因采樣時間帶來的誤差，每個縣（市、區(qū)）每月按比例完成各年齡段的采樣。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 由經(jīng)過培訓(xùn)的調(diào)查員說明調(diào)查目的，經(jīng)調(diào)查對象或監(jiān)護人現(xiàn)場簽署知情同意書后，<8歲者采集靜脈血2 mL，≥8歲者采集靜脈血5 mL，分離血清后置于-70℃冰箱保存，并送金華市CDC統(tǒng)一檢測。

1.2.2 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定肺炎支原體特異性抗體（IgG、IgM、IgA），檢測試劑由富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)。檢測前行預(yù)實驗，待實驗結(jié)果穩(wěn)定后再對所有血清標(biāo)本進行檢測，抗體滴度≤1∶20判為陰性，>1∶20判為陽性。為減少實驗誤差，全部檢測工作由2人按照各自分工完成。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析 使用EpiInfo 7.2軟件建立數(shù)據(jù)庫并進行數(shù)據(jù)的雙錄入和統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以相對數(shù)表示，采用描述流行病學(xué)方法，按性別、地區(qū)、年齡組、戶籍及月份統(tǒng)計血清抗體陽性率和幾何平均滴度（GMT）進行比較分析。率的比較用卡方檢驗，抗體滴度經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行t檢驗、F檢驗或秩和檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況

共調(diào)查1560人，每個縣（市、區(qū)）390人，每個年齡段每縣（市、區(qū)）調(diào)查30人，每個月采集標(biāo)本120～150份。男性777人，女性783人，性別比為1∶1.01；本地戶籍924人，外地戶籍636人。經(jīng)統(tǒng)計，1560名調(diào)查者中，MP抗體陽性1000名，陽性率為64.1%（95%CI：61.7～66.3%），GMT為1∶60.3（95%CI：1∶56.8～1∶64.0）。

2.2 不同地區(qū)人群抗體水平

東陽市、永康市、金東區(qū)、浦江縣調(diào)查人群MP抗體陽性率分別為62.6%、66.2%、65.1%和62.6%（χ2=1.694，P=0.638），GMT分別為1∶62.2、1∶61.0、1∶61.0、1∶57.1（F=1.995，P=0.053），不同地區(qū)人群MP抗體水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

2.3 不同戶籍人群抗體水平

本地人口和外地人口MP抗體陽性率分別為65.0%和62.7%（χ2=0.872，P=0.351），GMT分別為1∶60.4和1∶60.2（t=-0.104，P=0.917），不同戶籍人群MP抗體水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

2.4 不同性別人群抗體水平

男女MP抗體陽性率分別為62.4%和65.8%（χ2=1.906，P=0.167），GMT分別為1∶57.5和1∶62.9（t=-1.584，P=0.113），男女MP抗體水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表3。

2.5 不同年齡人群抗體水平

圖1顯示，不同年齡人群抗體水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.383，P=0.017），MP抗體水平自新生兒開始隨著年齡的增長逐漸升高，4～5歲時達到高峰，隨后緩慢下降，在20～29歲出現(xiàn)一個低谷，30～39歲年齡段時再次升高并出現(xiàn)另一個高峰，但峰值低于4～5歲年齡段，40歲之后呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。

2.6 不同采樣月份人群抗體水平

不同采樣月份MP抗體陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.73，P=0.0002），其中3月份和6月份最高，其次是9月份、7月份和8月份。見表4。

3 討論

MP是社區(qū)獲得性肺炎（CAP）的重要病原體，高達40%以上的CAP由MP造成，其中多達18%的兒童病例需要進行住院治療[1]。MP主要通過呼吸道傳播，開展其血清流行病學(xué)研究，掌握其流行特點和規(guī)律，對預(yù)防和控制其傳播有著積極的作用。目前，國內(nèi)外關(guān)于MP血清流行病學(xué)的研究多集中于患病人群，有關(guān)自然人群MP血清流行病學(xué)的研究較少。2014—2015年金華市調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該市自然人群MP抗體陽性率為64.1%，低于俞蘇蒙等[2]報道的新入伍青年91.2%的陽性率，但高于林國躍等[3]報道的某部隊?wèi)?zhàn)士35.8%的抗體陽性率、黃光明等[4]報道的汕頭市健康人群11.8%的抗體陽性率和汪寧等[5]報道的南京地區(qū)健康兒童14.6%的抗體陽性率。產(chǎn)生這種差異的原因主要與研究人群的構(gòu)成不同，另一方面也可能與所使用的檢測試劑不同有關(guān)，血清MP抗體檢測方法有多種，其標(biāo)記物和方法不同都直接影響結(jié)果的敏感性和特異性，目前國內(nèi)尚無統(tǒng)一的MP血清流行病學(xué)調(diào)查方法，對抗體陽性滴度的判斷標(biāo)準也不一致，這直接影響到對MP流行病學(xué)的現(xiàn)狀研究和資料間的橫向比較[1-2]。對于MP血清流行病學(xué)調(diào)查所使用的檢測方法和試劑有待進一步規(guī)范，以使調(diào)查結(jié)果準確可靠且易于比較。

本次調(diào)查結(jié)果顯示，不同地區(qū)、不同戶籍、不同性別人群的MP抗體陽性率及抗體平均滴度的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明人群具有同樣的感染機會。不同年齡段人群MP抗體水平存在較大差異，呈現(xiàn)“中間高、兩頭低”的現(xiàn)象，與黃海櫻等[6]報道結(jié)果相一致。在嬰幼兒時期由于細胞免疫系統(tǒng)未發(fā)育成熟，T淋巴細胞功能低下，其對B淋巴細胞分泌抗體的調(diào)節(jié)功能也受到影響，此時為隱匿性感染，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體效價較低；隨著年齡的增長免疫系統(tǒng)逐步完善，當(dāng)再次感染MP時，表現(xiàn)出肺炎等癥狀，特異性抗體水平也逐漸升高[6-7]；有研究表明，成年人感染MP后的IgG反應(yīng)較弱，再次感染并不能使MP抗體水平明顯升高，而且隨著年齡的增長MP抗體水平也會自然遞減，成年期之后MP抗體水平的下降可能與此有關(guān)[8]。

MP感染一年四季均有散發(fā)，不同地域的氣候，包括氣溫、濕度等條件均會影響其流行曲線[1]。本研究結(jié)果顯示，3月及6～9月金華市人群MP抗體陽性率和抗體平均滴度均高于其他月份，考慮可能與以下原因有關(guān)：① 金華市3月份降雨多，天氣陰冷潮濕，利于MP生長繁殖；② 金華市為盆地地形，亞熱帶季風(fēng)氣候，6～9月天氣炎熱，空調(diào)的使用增加了MP人際傳播的機會。

（志謝：感謝東陽市、永康市、金東區(qū)、浦江縣疾病預(yù)防控制中心對本研究工作的支持）

參考文獻

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[5]汪寧，趙季文，徐萃瑜，等.南京地區(qū)健康兒童青少年中肺炎支原體自然感染狀況的調(diào)查[J].中國公共衛(wèi)生，1990，6（12）：537-538.

[6]黃海櫻，陳波，周強，等.廣州地區(qū)不同人群肺炎支原體感染的流行病學(xué)調(diào)查分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（2）：300-302.

[7]李新，賈志杰，垢敬.肺炎支原體感染血清學(xué)檢測分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（14）：1584-1585.

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（收稿日期：2017-05-22）