尹曉丹，何軍琴，王景尚，薛曉鷗

子宮內(nèi)膜對于維持女性月經(jīng)和生育能力非常重要，在胚胎著床和妊娠過程中起關(guān)鍵作用。子宮內(nèi)膜容易受流產(chǎn)、感染等因素的影響而形成薄型子宮內(nèi)膜。薄型子宮內(nèi)膜是指子宮內(nèi)膜厚度低于能夠獲得妊娠的閾厚度，即＜7 mm［1］。目前治療薄型子宮內(nèi)膜常用的藥物有雌激素、阿司匹林等［2-5］，但療效不確定［6-9］，因此尋找更有效的治療方案是目前臨床亟待解決的問題。

評價(jià)子宮內(nèi)膜容受性的指標(biāo)有子宮內(nèi)膜厚度、形態(tài)學(xué)、間質(zhì)、腺體以及子宮內(nèi)膜血管等，這些指標(biāo)均與妊娠結(jié)局有很大的關(guān)系。本研究旨在觀察補(bǔ)腎活血方對腎虛血瘀薄型子宮內(nèi)膜大鼠子宮內(nèi)膜容受性的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 2016年6月—2017年3月選取SPF級(jí)雌性SD大鼠42只，體質(zhì)量200～220 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(京)2012-0001。動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境3 d，自由飲水飲食，室溫（22±1）℃，濕度（40±10）%，光照周期12 h/12 h。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 實(shí)驗(yàn)用中藥購自同仁堂藥店。補(bǔ)腎活血方由熟地15 g、菟絲子12 g、桑寄生12 g、覆盆子12 g、川斷12 g、川牛膝12 g、當(dāng)歸12 g、丹參12 g、澤蘭12 g、川芎9 g、益母草20 g、雞血藤12 g、紅花9 g組成，藥物浸泡后煎煮。一劑藥煎煮2次，第一次煎煮先用大火煮沸后改用小火，再煎

本文創(chuàng)新點(diǎn)：

（1）本文為薄型子宮內(nèi)膜的臨床防治和補(bǔ)腎活血治療提供了新思路；（2）首次疊加了腎虛血瘀模型和薄型子宮內(nèi)膜模型；（3）通過相關(guān)作用機(jī)制的研究，為中藥治療薄型子宮內(nèi)膜的推廣提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。25 min，將藥液煎至100 ml左右濾出。第二次煎煮加涼水稍高于藥面，煮沸后再改用小火煎15 min左右，煎至100 ml左右濾出。將兩次煎煮的藥液混合均勻，再濃縮或稀釋到所需濃度。按人鼠體表面積換算，大鼠劑量為人的等效劑量；戊酸雌二醇（補(bǔ)佳樂，1 mg/片，拜耳公司，批號(hào)：J20130009），按人鼠體表面積換算，大鼠劑量為0.3 mg·kg-1·d-1；羥基脲（齊魯制藥有限公司，批號(hào)H37021289），按人鼠體表面積換算，大鼠劑量為450 mg·kg-1·d-1；高分子右旋糖酐（Dextran70，瑞士Amwesham Biosciences公司），按人鼠體表面積換算，大鼠劑量為5 ml/kg。

1.3 主要試劑 蘇木精染液、伊紅染液、生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG、辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素（均購自北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司），波形蛋白一抗、角蛋白一抗（購自Abcam公司）。

1.4 動(dòng)物模型制備 將大鼠隨機(jī)分為對照組9只，造模組33只。參照《雌性大鼠腎虛血瘀模型初探》［10］建立腎虛血瘀薄型子宮內(nèi)膜大鼠模型。造模組大鼠給予羥基脲450 mg·kg-1·d-1灌胃給藥8 d，于末次給藥30 min后尾靜脈快速推注10%高分子右旋糖苷5 ml/kg。羥基脲給藥8 d后，大鼠出現(xiàn)皮毛枯槁欠光澤、體型瘦小等腎虛癥狀；注射10%高分子右旋糖苷1 h后大鼠耳、爪、尾部顏色紫暗，提示腎虛血瘀造模成功。將腎虛血瘀模型大鼠腹部皮膚切開，進(jìn)入腹腔定位子宮后，在宮角處注入0.3 ml 95%無水乙醇，保持宮腔充盈狀態(tài)，2 min后再次注入0.3 ml 95%無水乙醇，另一側(cè)操作相同，反復(fù)沖洗宮腔，關(guān)腹。造模結(jié)束后，分別從對照組和造模組隨機(jī)抽取3只大鼠處死，開腹取子宮，觀察子宮大體標(biāo)本，并縱行剖開部分子宮暴露宮腔后浸入10%福爾馬林溶液中固定，常規(guī)HE染色后，在光鏡下觀察子宮內(nèi)膜厚度。與對照組相比，模型組子宮壁全層變薄，子宮內(nèi)膜層較肌層更明顯，且未見明顯波浪形，驗(yàn)證模型造模成功。

1.5 動(dòng)物分組及用藥 將造模組大鼠隨機(jī)分為模型組、補(bǔ)腎活血高劑量組、補(bǔ)腎活血中劑量組、補(bǔ)腎活血低劑量組、補(bǔ)佳樂組，每組6只。對照組灌服蒸餾水10 ml/kg；模型組灌服蒸餾水10 ml/kg；補(bǔ)腎活血低劑量組灌服補(bǔ)腎活血方2.16 mg/kg，10 ml/d；補(bǔ)腎活血中劑量組灌服補(bǔ)腎活血方4.32 mg/kg，10 ml/d；補(bǔ)腎活血高劑量組灌服補(bǔ)腎活血方8.64 mg/kg，10 ml/d；均為1次/d；補(bǔ)佳樂組灌服補(bǔ)佳樂0.3 mg·kg-1·d-1。給藥3個(gè)動(dòng)情周期即15 d。

1.6 實(shí)驗(yàn)方法 第15天給藥后1 h取材（開腹取子宮）。

1.6.1 HE染色 常規(guī)HE染色后，在光鏡下觀察子宮內(nèi)膜各層厚度變化、腺體和血管分布情況，采用Leica qwin plus圖像處理軟件測量子宮內(nèi)膜厚度、間質(zhì)厚度。

1.6.2 免疫組化法檢測子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積、間質(zhì)細(xì)胞面積 銳性刮取子宮后壁內(nèi)膜全層1 cm×1 cm，標(biāo)本冷藏運(yùn)送并在20 min內(nèi)經(jīng)機(jī)械分離和酶消化制成細(xì)胞懸液，然后通過二次篩網(wǎng)過濾法（100 μm和40 μm的濾篩）初步將基質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞分離，然后分別用有限稀釋法進(jìn)行低密度培養(yǎng)，角蛋白和波形蛋白特異表達(dá)于上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞，因此本研究利用角蛋白和波形蛋白的面積來反映上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的生長情況。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以表示,多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜HE染色結(jié)果 對照組子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)完整，呈波浪形，腺上皮和腔上皮細(xì)胞完整，呈立方狀，腺體和血管數(shù)量正常；模型組子宮內(nèi)膜厚度變薄，腺上皮和腔上皮細(xì)胞呈扁平狀，腺體稀少，毛細(xì)血管數(shù)量減少，內(nèi)膜連續(xù)性差；補(bǔ)腎活血低、中劑量組子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)欠完整，腺上皮及腔上皮細(xì)胞呈矮柱狀，腺體減少，毛細(xì)血管增多，內(nèi)膜稍厚；補(bǔ)腎活血高劑量組、補(bǔ)佳樂組結(jié)構(gòu)完整內(nèi)膜比例增加，內(nèi)膜連續(xù)，呈波浪形，大部分腺上皮和腔上皮細(xì)胞完整，呈單層立方狀，排列整齊（見圖1）。

2.2 各組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較 6組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮內(nèi)膜厚度小于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血低、中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜厚度大于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜厚度大于補(bǔ)腎活血低、中、高劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001，見表1）。

2.3 各組大鼠子宮間質(zhì)厚度比較 6組大鼠子宮間質(zhì)厚度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮間質(zhì)厚度小于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血低、中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮間質(zhì)厚度大于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮間質(zhì)厚度大于補(bǔ)腎活血低、中劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05，見表2）。

圖 1 各組大鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)（HE染色，×40）Figure 1 Endometrial morphology in rats of each group

2.4 各組大鼠子宮腺體數(shù)比較 6組大鼠子宮腺體數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮腺體數(shù)少于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮腺體數(shù)多于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮腺體數(shù)多于補(bǔ)腎活血低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.001，見表3）。

2.5 各組大鼠子宮血管數(shù)比較 6組大鼠子宮血管數(shù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮血管數(shù)少于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮血管數(shù)多于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮血管數(shù)多于補(bǔ)腎活血低劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05，見表4）。

2.6 各組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積比較 6組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積小于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積大于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積大于補(bǔ)腎活血低劑量組、小于補(bǔ)腎活血高劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05，見表5）。

2.7 各組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積比較 6組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05）。模型組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積小于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)腎活血低、中、高劑量組及補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積大于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.001）；補(bǔ)佳樂組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積大于補(bǔ)腎活血低劑量組、小于補(bǔ)腎活血高劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.001，見表 6）。

3 討論

薄型子宮內(nèi)膜通常是指在黃體中期（排卵后6～10 d）子宮內(nèi)膜厚度＜7 mm，其主要臨床特征為月經(jīng)周期正常，但月經(jīng)量過少。薄型子宮內(nèi)膜不僅影響胚胎種植，還增加自然流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)也是導(dǎo)致不孕及閉經(jīng)的重要因素，給患者帶來極大心理壓力，因此，對薄型子宮內(nèi)膜的發(fā)病機(jī)制與防治研究成為了國內(nèi)外的難點(diǎn)與熱點(diǎn)課題。本研究擬通過建立腎虛血瘀薄型子宮內(nèi)膜大鼠模型來探討補(bǔ)腎活血方對其子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)的影響。結(jié)果提示，補(bǔ)腎活血方能夠改善子宮內(nèi)膜的結(jié)構(gòu)，在子宮內(nèi)膜的厚度、間質(zhì)厚度、腺體數(shù)以及血管數(shù)方面均有所提高。補(bǔ)腎活血方由熟地15 g、菟絲子12 g、桑寄生12 g、覆盆子12 g、川斷12 g、川牛膝12 g、當(dāng)歸12 g、丹參12 g、澤蘭12 g、川芎9 g、益母草20 g、雞血藤12 g、紅花9 g組成。補(bǔ)腎填精、養(yǎng)血活血是中醫(yī)改善薄型子宮內(nèi)膜的常用治法，補(bǔ)腎活血方基于以上理論，多年來經(jīng)臨床反復(fù)驗(yàn)證能有效改善薄型子宮內(nèi)膜［11］。臨床上除了采用藥物治療薄型子宮內(nèi)膜，也可以采用子宮內(nèi)膜搔刮術(shù)來激發(fā)內(nèi)膜的炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)，刺激內(nèi)膜分泌相應(yīng)的細(xì)胞因子和生長因子等［12］，從而增加子宮內(nèi)膜容受性。此類方法雖然能夠改善子宮內(nèi)膜容受性，但也有導(dǎo)致婦科炎癥等風(fēng)險(xiǎn)。

表 1 各組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較（，μm）Table 1 Comparison of the endometrial thickness between rats of each group

表 1 各組大鼠子宮內(nèi)膜厚度比較（，μm）Table 1 Comparison of the endometrial thickness between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05；與補(bǔ)腎活血中劑量組比較，dp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，ep＜0.05

對照組 6 23.6±4.3模型組 6 9.3±0.7a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 11.6±0.3b補(bǔ)腎活血中劑量組 6 13.0±0.5b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 14.6±1.0b補(bǔ)佳樂組 6 18.1±0.8bcde F值 45.792 P值 ＜0.001

表 2 各組大鼠子宮間質(zhì)厚度比較（，μm）Table 2 Comparison of the thickness of uterine stroma between rats of each group

表 2 各組大鼠子宮間質(zhì)厚度比較（，μm）Table 2 Comparison of the thickness of uterine stroma between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05；與補(bǔ)腎活血中劑量組比較，dp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，ep＜0.05

對照組 6 678.8±49.3模型組 6 154.3±21.1a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 370.6±53.8b補(bǔ)腎活血中劑量組 6 471.2±26.0b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 577.6±25.3b補(bǔ)佳樂組 6 522.3±12.8bcde F值 165.963 P值 ＜0.001

表 3 各組大鼠子宮腺體數(shù)比較（，個(gè)）Table 3 Comparison of the number of uterine glands between rats of each group

表 3 各組大鼠子宮腺體數(shù)比較（，個(gè)）Table 3 Comparison of the number of uterine glands between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05

對照組 6 36±7模型組 6 14±4a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 14±3補(bǔ)腎活血中劑量組 6 24±2b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 32±10b補(bǔ)佳樂組 6 30±6bc F值 15.312 P值 ＜0.001

表 4 各組大鼠子宮血管數(shù)比較（，個(gè)）Table 4 Comparison of uterine vessels between rats of each group

表 4 各組大鼠子宮血管數(shù)比較（，個(gè)）Table 4 Comparison of uterine vessels between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05

對照組 6 28.2±4.3模型組 6 16.3±2.2a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 17.3±1.4補(bǔ)腎活血中劑量組 6 21.7±2.2b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 21.8±2.3b補(bǔ)佳樂組 6 21.8±1.8bc F值 16.666 P值 ＜0.001

表 5 各組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積比較（，μm2）Table 5 Comparison of endometrial epithelial cell area between rats of each group

表 5 各組大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞面積比較（，μm2）Table 5 Comparison of endometrial epithelial cell area between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05；與補(bǔ)腎活血高劑量組比較，dp＜0.05

對照組 6 22.8±2.6模型組 6 6.8±1.4a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 6.8±0.5補(bǔ)腎活血中劑量組 6 8.5±0.6b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 15.0±0.6b補(bǔ)佳樂組 6 9.4±0.5bcd F值 145.854 P值 ＜0.001

表 6 各組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積比較（，μm2）Table 6 Comparison of endometrial stromal cell area between rats of each group

表 6 各組大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞面積比較（，μm2）Table 6 Comparison of endometrial stromal cell area between rats of each group

注：與對照組比較，ap＜0.05；與模型組比較，bp＜0.05；與補(bǔ)腎活血低劑量組比較，cp＜0.05；與補(bǔ)腎活血高劑量組比較，dp＜0.05

對照組 6 11.1±1.0模型組 6 2.6±0.5a補(bǔ)腎活血低劑量組 6 5.0±0.3b補(bǔ)腎活血中劑量組 6 7.9±1.2b補(bǔ)腎活血高劑量組 6 13.7±0.8b補(bǔ)佳樂組 6 7.1±1.2bcd F值 116.054 P值 ＜0.001

中醫(yī)學(xué)古籍中沒有對“薄型子宮內(nèi)膜”的記載。薄型子宮內(nèi)膜的臨床表現(xiàn)主要為不孕，故中醫(yī)治療本病多歸結(jié)為“不孕”。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎藏精，生天癸，主生殖，為沖任之本，育胎之根。若先天稟賦不足，腎氣虛弱，失于溫煦氣化，或早配頻產(chǎn)，以致耗傷精血，則天癸不充，腎封藏失職，沖任二脈失養(yǎng)，胞脈失養(yǎng)而不能攝精受孕。女子以血為本，血?dú)赓F在流暢。七情內(nèi)傷，素性抑郁，或忿怒過度，氣滯血瘀，瘀阻沖任，氣血運(yùn)行受阻，種子艱難。又或流產(chǎn)金刃傷及胞宮胞脈，使胞宮受損，瘀血阻滯，或產(chǎn)后百脈空虛，抗病力弱，常傷腎傷血，造成胞宮損傷，由于損傷而自溢，死血瘀滯胞宮，氣滯血瘀，以致不能攝精成孕。近年來，隨著醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)一步深入，發(fā)現(xiàn)腎虛與血瘀二者在病因病機(jī)方面互為因果，互為影響，無論是腎陰虛還是腎陽虛均會(huì)發(fā)生因虛致瘀的病理表現(xiàn)［13］。因此，補(bǔ)腎填精、益氣養(yǎng)血活血是改善薄型子宮內(nèi)膜的關(guān)鍵。宋殿榮等［14］觀察補(bǔ)腎活血方對妊娠大鼠子宮內(nèi)膜容受性的改善情況發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎活血方能明顯改善胚泡著床障礙大鼠子宮內(nèi)膜表面胞飲突的發(fā)育，并顯著提高子宮內(nèi)膜整合素αvβ3mRNA的表達(dá)，有助于子宮內(nèi)膜容受性的建立，本研究結(jié)論與之相似。從現(xiàn)代藥理學(xué)角度分析，這可能是由于丹參、當(dāng)歸有增加血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的功效，而菟絲子、桑寄生等可使人著床期子宮內(nèi)膜組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子及其受體數(shù)目均明顯增加，進(jìn)而有利于子宮血管的生成，從而改善子宮血液循環(huán)，提高子宮內(nèi)膜容受性，但其具體的作用機(jī)制將在進(jìn)一步的研究中進(jìn)行探討。

綜上所述，補(bǔ)腎活血方能夠增加子宮內(nèi)膜各層厚度、腺體數(shù)、血管數(shù)以及上皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞面積。

作者貢獻(xiàn)：尹曉丹進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，文章的可行性分析，文獻(xiàn)/資料收集、整理，撰寫論文；何軍琴，王景尚進(jìn)行論文的修訂，英文修訂；薛曉鷗負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，對文章整體負(fù)責(zé)。

本文無利益沖突。

［1］CHANG Y，LI J，CHEN Y，et al.Autologous platelet-rich plasma promotes endometrial growth and improves pregnancy outcome during in vitro fertilization［J］.Int J Clin Exp Med，2015，8（1）：1286-1290.

［2］SATIRAPOD C，WINGPRAWAT S，JULTANMAS R，et al.Effect of estradiol valerate on endometrium thickness during clomiphene citrate-stimulated ovulation［J］.J Obstet Gynaecol Res，2014，40（1）：96-101.DOI：10.1111/jog.12130.

［3］ZHAO M，CHANG C，LIU Z，et al.Treatment with low-dose aspirin increased the level LIF and integrin β3 expression in mice during the implantation window［J］.Placenta，2010，31（12）：1101-1105.DOI：10.1016/j.placenta.2010.10.002.

［4］EFTEKHAR M，SAYADI M，ARABJAHVANI F.Transvaginal perfusion of G-CSF for infertile women with thin endometrium in frozen ET program： a non-randomized clinical trial［J］.Iran J Reprod Med，2014，12（10）：661-666.

［5］KUNICKI M，UKASZUK K，WOCLAWEK-POTOCKA I， et al.Evaluation of granulocyte colony-stimulating factor effects on treatment-resistant thin endometrium in women undergoing in vitro fertilization［J］.Biomed Res Int，2014，2014：913235. DOI：10.1155/2014/913235.

［6］哈靈俠，袁瑩瑩，裴利國，等.粒細(xì)胞集落刺激因子宮腔灌注在改善薄型子宮內(nèi)膜中的應(yīng)用價(jià)值［J］.中國婦幼保健，2015，30（1）：82-85.DOI：10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411.2015.01.30.HA L X，YUAN Y Y，PEI L G，et al.Application value of intrauterine perfusion of granulocyte colony-timulating factor in improving thin endometrium［J］.Maternal and Child Health Care of China，2015，30（1）：82-85. DOI：10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411.2015.01.30.

［7］趙詩藝，劉英，楊曉葵，等.薄型子宮內(nèi)膜凍融胚胎移植周期中應(yīng)用雌二醇/雌二醇地屈孕酮的療效觀察［J］.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2015，31（4）：270-273.ZHAO S Y，LIU Y，YANG X K，et al.The effect of femoston on endimetrial thickness and pregnancy outcome in Frozen-thawed embryo transfer cycles of patients with thin endometrium［J］.Journal of Practical Obstetrics and Gynecology，2015，31（4）：270-273.

［8］孫旸，梁婧，蘭曉霞，等.改善子宮內(nèi)膜發(fā)育不良的藥物治療［J］.國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志，2015，34（3）：251-254.SUN Y，LIANG J，LAN X X，et al.Recent progress of medicine for endometrial hypoplasia［J］.Journal of International Reproductive Health/Family Planning，2015，34（3）：251-254.

［9］史紅珍，林琳，孫立娟，等.不同雌激素對薄型子宮內(nèi)膜患者子宮內(nèi)膜容受性的影響［J］.山西醫(yī)藥雜志，2015，44（9）：1050-1052.

［10］林繼紅，楊海英.雌性大鼠腎虛模型初探［J］.中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2010，20（10）：78.

［11］尹曉丹，何軍琴.補(bǔ)腎活血方對多囊卵巢綜合征不孕癥患者子宮內(nèi)膜容受性及雌二醇、孕酮影響［J］.環(huán)球中醫(yī)藥，2015，8（6）：672-674.DOI：10.3969/j.issn.1674-1749.2015.06.008.YIN X D，HE J Q. Effect of reinforcing kidney and activating blood decoction on endometrial receptivity and estrogen［J］.Globla Traditional Chinese Medicine，2015，8（6）：672-674.DOI：10.3969/j.issn.1674-1749.2015.06.008.

［12］GNAINSKY Y， GRANOT I，ALDO P B，et al.Local injury of the endometrium induces an inflammatory response that promotes successful implantation. ［J］.Fertil Steril，2010，94（6）：2030-2036.DOI：10.1016/j.fertnstert.2010.02.022.

［13］王均寧，韓濤，路廣林.從《內(nèi)經(jīng)》血瘀理論探討血瘀致病的臨床特征［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，26（2）：13-14.DOI：10.3321/j.issn：1006-2157.2003.02.005.WANG J N，HAN T，LU G L.Clinical characteristics of blood stasis caused by blood stasis based on the theory of blood stasis in Neijing［J］.Journal of Beijing University of Chinese Medicine，2003，26（2）：13-14.DOI：10.3321/j.issn：1006-2157.2003.02.005.

［14］宋殿榮，劉亞琴，張崴，等.補(bǔ)腎活血方中藥對妊娠大鼠子宮內(nèi)膜容受性的影響［J］.國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志，2009，36（2）：161-164. DOI：10.3969/j.issn.1674-1870.2009.02.020.SONG D R，LIU Y Q，ZHANG W，et al.The effect of Bushenhuoxue recipe on endometrial receptivity in pregnancy mice［J］.J Int Obstrt Gynecol，2009，36（2）：161-164.DOI：10.3969/j.issn.1674-1870.2009.02.020.