董富,祁曉晗,指導 杜艷軍

?

淺談動物實驗艾條灸的刺激量

董富,祁曉晗,指導 杜艷軍

(湖北中醫(yī)藥大學,武漢 430061)

艾灸療法是針灸療法中的重要組成部分,主要是通過溫熱、艾煙、紅外線等刺激腧穴來調(diào)整經(jīng)絡臟腑功能以達到防病治病的目的。近年來,有關艾灸防治疾病的效應研究取得了較大進展,然而艾灸刺激量的具體應用卻各有不同,影響了艾灸效應的優(yōu)化選擇。該文擬從艾灸刺激量之艾條直徑、艾灸距離、時間、頻率等方面綜述艾灸方法在動物實驗中的具體應用,探討實驗研究中艾灸刺激量相對統(tǒng)一的重要性。

灸法;刺激量;實驗研究;綜述

艾灸療法,是采用艾絨制成艾條或艾炷等熏烤機體穴位以達到保健治病的一種自然療法,也是中醫(yī)針灸療法的重要組成部分。艾灸具有溫經(jīng)散寒、行氣通絡、扶陽固脫、升陽舉陷和拔毒泄熱的作用?！鹅`樞·官能》:“針所不為,灸之所宜?！薄睹t(yī)別錄》:“艾葉苦、微溫,無毒,主灸百病?！苯陙?艾灸動物實驗研究日益增多,筆者通過檢索萬方和知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫2006—2016年期間的相關文獻發(fā)現(xiàn),雖然多數(shù)文章均有對艾灸時間、距離、頻率和溫度的說明,但各有不同。即使是在防治相同疾病時,由于刺激量的不同,也無法評價與優(yōu)選最佳治療方案。《醫(yī)宗金鑒·刺灸心法要訣》:“凡灸諸病,必火足氣到,始能求愈。然頭與四肢皮肉淺薄,若并灸之,恐肌骨氣血難堪,必分日灸之,或隔日灸之,其艾炷宜小,壯數(shù)宜少。有病必當灸巨闕、鳩尾二穴者,必不可過三五壯。背腰下皮肉深厚,艾炷宜大,壯數(shù)宜多,使火氣到,始能去痼冷之疾也。”說明艾灸刺激量的大小是取效的關鍵。筆者粗淺地認為艾灸的刺激量與艾灸的直徑、時間、距離、頻率和溫度有一定的聯(lián)系。為此,筆者擬對近10年來動物實驗中關于艾灸刺激量應用情況進行綜述,以期為艾灸實驗研究中的刺激量應用標準提供參考。

1 艾條的直徑

艾條直徑的大小決定了施灸部位受熱面積的不同,對機體腧穴產(chǎn)生的效應也不同。有學者[1-2]在艾灸預處理對全腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)Bc1-2和Bax蛋白表達及SOD、MDA影響的實驗研究中,均采用0.4 cm×10 cm的艾條。哈略[3]在艾灸對動脈粥樣硬化小鼠炎性反應因子及MMP-9的實驗研究中,采用規(guī)格為0.5 cm×20 cm的艾條,灸膻中穴顯著降低了小鼠主動脈MMP-9含量。肖凌等[4]在針灸調(diào)節(jié)衰老大鼠對疫苗反應性的實驗研究中,采用自制直徑為0.6 cm的艾條。劉飛等[5]在艾灸防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的實驗研究中,采用規(guī)格為0.75 cm×30 cm的艾條。杜艷軍等[6]在觀察艾灸對老年大鼠海馬線粒體膜電位神經(jīng)元凋亡的影響中,采用自制的直徑約0.8 cm的艾條。魏鐵花等[7]在艾灸治療大鼠系膜增生性腎小球腎炎實驗研究中,采用自制直徑為0.8 cm香煙艾條。白如鑫等[8]在溫和灸對中老年部分雄激素缺乏綜合征大鼠模型影響的實驗研究中,采用規(guī)格為1.5 cm×15 cm的艾條。也有部分研究在文章中尚未標注使用艾灸的直徑規(guī)格。其實無論是大鼠、小鼠,還是兔等這種小型動物,穴位之間的距離很小,艾條直徑稍大會涉及非治療穴位而影響腧穴效應的準確性。同時選取不同直徑的艾條,艾條與動物表皮接觸面積不同,導致艾灸產(chǎn)生的溫度范圍不同,其效果也會有區(qū)別。

2 艾灸的距離

艾灸距離的遠近能決定艾灸起始溫度的高低,進而影響艾灸的溫熱程度。王曉穎等[9]在不同針灸方法逆轉(zhuǎn)環(huán)磷酰胺致大鼠胃黏膜損害的實驗研究中,艾條置于足三里上0.5 cm處。白如鑫等[8]在溫和灸對雄激素缺乏綜合征大鼠模型影響的實驗研究中,艾條置于穴位上方0.5～1 cm。孫軍剛等[10]在溫和灸對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠IL-2、TGF-b的影響實驗研究中,艾條置于穴位上1.5 cm。孫國杰等[11]在針灸預處理對AD大鼠海馬組織GSK-3b和PP2A影響的實驗研究中,艾條置于腎俞上方2～3 cm。陳波等[12]在艾灸治療對兔KOA軟骨損傷及MMP-1和TIMP-1表達調(diào)節(jié)作用的實驗研究中,艾條置于膝關節(jié)周圍腧穴(內(nèi)膝眼、犢鼻、陽陵泉、陰陵泉、血海)上方2～3 cm。崔明慧等[13]在刺絡放血聯(lián)合艾灸對腎功能衰竭大鼠腎功能影響的實驗研究中,艾條置于命門穴、關元穴和雙側(cè)足三里穴上方3 cm。范琳燕等[14]在艾灸對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型大鼠骨代謝的影響研究中,艾條距離大鼠腎俞穴約5 cm。查閱文獻中發(fā)現(xiàn),雖然艾灸距離多有不同,但設置在腧穴上方2～3 cm為多[4-7,11],與教材所述基本一致,分析此高度可能有助于艾灸溫度的舒適性與恒定性。

3 施灸時間

艾灸的時間也是艾灸刺激強度的重要因素,施灸時間長短能影響艾熱導入動物體內(nèi)熱量的大小,不同的熱量自然產(chǎn)生的艾灸刺激效應亦不同,只有有效的刺激強度才能更好地激發(fā)經(jīng)絡臟腑的自我調(diào)整與治愈功能。張丹等[15]在艾灸對腹膜透析功能影響的實驗研究中,給予大鼠腹部神闕穴艾灸5 min。張燕等[16]則以大鼠安靜為度,溫和灸大鼠命門穴8 min,并采用基因芯片技術研究艾灸大鼠命門穴延緩衰老的抗氧化機制。鄭曙光等[17]在艾灸治療對兔膝關節(jié)骨性關節(jié)炎調(diào)節(jié)作用的實驗研究中,選取膝關節(jié)周圍腧穴每穴艾灸10 min,亦以動物能忍受、不劇烈掙扎為度。毛翔等[18]在艾灸對多因素致慢性疲勞大鼠海馬5-HT1A受體mRNA表達干預的實驗研究中,用無煙艾條對大鼠的百會、肝俞、脾俞、腎俞、后三里每穴刺激均達15 min。閆懷士等[19]則在艾灸抗小鼠流感病毒性肺炎的實驗研究中,對小鼠背部腧穴肺俞、膏肓俞每次刺激達20 min。魏鐵花等[7]在艾灸治療大鼠系膜增生性腎小球腎炎實驗研究中,對不同部位腧穴其灸治時間各不相同,如灸背部腎俞穴7 min,命門穴6 min;灸腹部中脘、關元等穴10 min;灸四肢足三里、涌泉等穴5 min。王莖等[20]具體研究不同灸量艾灸雙側(cè)天樞穴對克羅恩病大鼠結(jié)腸組織損傷積分和血清IgG、IgA、IgM水平的影響,分為5 min、15 min、25 min 3組,艾灸距離均為1～2 cm,每日1次,結(jié)果顯示灸治15 min和25 min的效果均優(yōu)于灸治5 min,但灸治15 min和25 min之間療效比較無顯著性差異。

4 艾灸的施灸頻率

施灸頻率雖不影響單次灸量,但卻關系著累積灸量,而不同的累積灸量所達到的累積效應是有所差別的。鄭雪峰等[21]在艾灸化療后低白細胞模型大鼠外周血象的研究中,對關元穴的施灸頻率是每日1次。陳波等[22]在艾灸對衰老模型小鼠外周血淋巴細胞DNA損傷程度影響的研究中,灸治雙側(cè)足三里的頻率是每2 d治療1次。趙宇輝等[23]在探討艾灸預處理對心肌缺血再灌注損傷的保護機制中,將艾灸預處理組分為艾灸每日1次組和每日2次組,結(jié)果顯示艾灸預處理每日1次與缺血預處理預防心肌缺血再灌注損傷的效應無顯著性差異,而艾灸預處理每日2次組優(yōu)于缺血預處理組,提示艾灸預處理對心肌細胞缺血再灌注的保護效應與每日艾灸次數(shù)有關。關于頻率與療效是否存在著正比例關系,這值得我們進一步研究。

5 施灸溫度

艾條的直徑直接決定了施灸面積的大小,而施灸的距離影響著艾條與皮膚接觸的高低,決定了溫熱效應。陳云飛等[24]在不同時段艾灸血清中內(nèi)生性蛋白組分雙向電泳的實驗研究中,在兔大椎穴上懸灸20 min,使穴位的體表溫度達43℃左右。肖明良等[25]基于艾灸3 min達到約44℃最高溫度,之后維持在43.5℃左右的皮溫測試結(jié)果,在艾灸對亞急性衰老小鼠腦細胞端粒長度影響的實驗研究中,溫和灸小鼠足三里穴7 min,以小鼠相對安靜,無劇烈掙扎、嘶叫為度。

筆者在查閱相關文獻后發(fā)現(xiàn),目前動物實驗研究中涉及到具體艾灸溫度及灸治溫度適宜性的文獻較少,多為“適宜為度”“不出現(xiàn)掙扎為度”“以施術者手背皮膚感覺溫熱為度”的表述。生物學研究認為只有足夠的刺激強度才能引發(fā)細胞的興奮。施灸時要產(chǎn)生灸感,需達到表皮“唇紅為度”,僅表面有溫熱感,是達不到治療目的的?！夺t(yī)宗金鑒·刺灸心法要訣》:“凡灸諸病,必火足氣到,始能求愈?！庇捎趧游飳囟鹊哪褪苄杂袆e于人,實驗研究時動物腧穴的灸治溫度參數(shù)若有相對統(tǒng)一的客觀標準,將會有助于艾灸效應機制研究。

6 討論

艾灸以在臨床上患者感覺舒適易接受、價格廉價、療效可靠等優(yōu)點被廣大患者喜愛[26-29],相關研究[30-33]也證明艾灸對大部分疾病是有積極治療作用。綜上文獻可見,艾灸動物研究中關于艾條直徑、灸治時間、距離、溫度和頻率等操作細節(jié)各執(zhí)己見,形成了刺激方式不統(tǒng)一、刺激量大小不等、刺激效應不一致的局面。如毛翔等[18]和羅英華等[34]的研究對象均為慢性疲勞大鼠,具體操作時灸距一致,灸治時間分別為15 min和10 min,研究結(jié)果均顯示有較好療效。這種現(xiàn)狀不利于指導科研與臨床對某種疾病選取最佳穴位組,以達到最好的臨床療效。梁玉磊等[35]在艾灸動物實驗中引發(fā)的思索中,也提及針灸動物實驗操作標準存在不足,如實驗動物的固定(大鼠因捆綁而驚擾,掙扎氣亂,必然影響艾灸療效)、操作的灸量、操作時間等問題。說明當前研究者已經(jīng)認識到盡量控制艾灸的影響因素,保持艾灸刺激量一致在研究同類疾病中的意義。臨床使用的艾條標準基本一致,若能首先統(tǒng)一運用于動物的艾條標準,進而開展針對動物艾灸刺激量的相關研究,將有助于艾灸效應機制的深入研究。

[1] 趙宇輝,孫忠人,李曉捷,等.艾灸預處理對全腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)Bc1-2和Bax蛋白表達影響的實驗研究[J].針灸臨床雜志,2006,22(8):53-54.

[2] 華金雙,李麗萍,朱現(xiàn)民.艾灸預處理對全腦缺血大鼠 SOD、MDA的影響[J].中國針灸,2006,26(8):595-597.

[3] 哈略.艾灸對動脈粥樣硬化小鼠炎性因子及MMP-9作用的實驗研究[D].北京中醫(yī)藥大學,2016:1389-1394.

[4] 肖凌,明平紅,寧勇,等.針灸調(diào)節(jié)衰老大鼠對疫苗反應性的實驗研究[J].湖北中醫(yī)藥大學學報,2012,14(2): 10-12.

[5] 劉飛,任平,徐雅麗,等.艾灸防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的實驗研究[J].中國老年學雜志,2012,32(8):1655-1656.

[6] 杜艷軍,孫國杰.艾灸對老年大鼠海馬線粒體膜電位、神經(jīng)元凋亡的影響[J].針刺研究,2005,30(4):212- 214.

[7] 魏鐵花,王慶國,李珊珊,等.艾灸治療大鼠系膜增生性腎小球腎炎實驗研究[J].長春中醫(yī)藥大學學報,2013, 29(1):13-15.

[8] 白如鑫,李沛.溫和灸對中老年部分雄激素缺乏綜合征大鼠模型影響的實驗研究[J].針刺研究,2007,32(4): 229-233.

[9] 王曉穎,盛強,索玉平,等.不同針灸方法逆轉(zhuǎn)環(huán)磷酰胺致大鼠胃黏膜損害的實驗研究[J].實用醫(yī)技雜志, 2012,19(6):585-586.

[10] 孫軍剛,耿煜,吳巧鳳,等.溫和灸對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠IL-2、TGF-b的影響[J].世界華人消化雜志,2015,23 (13):2058-2063.

[11] 孫國杰,周華,杜艷軍,等.針灸預處理對AD大鼠海馬組織GSK-3b和PP2A影響的實驗研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2011,22(3):732-733.

[12] 陳波,謝西梅,李佳霖.艾灸治療對兔KOA軟骨損傷及TNF-a、TGF-b1和IGF-1表達調(diào)節(jié)作用的實驗研究[J].江蘇中醫(yī)藥,2009,41(6):69-71.

[13] 崔明慧,溫景榮,陳靜霞,等.刺絡放血聯(lián)合艾灸對腎功能衰竭大鼠腎功能影響的實驗研究[J].天津中醫(yī)藥,2010,27(3):248-250.

[14] 范琳燕,趙可偉,江鋼輝,等.艾灸對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型大鼠骨代謝的影響[J].新中醫(yī),2011,43(12):116 -117.

[15] 張丹,張淑靜,張翠紅,等.艾灸對腹膜透析功能影響的實驗研究[J].上海針灸雜志,2010,29(9):556-558.

[16] 張燕,羅炳德.基因芯片研究艾灸大鼠命門穴延緩衰老的抗氧化機制[J].中國老年學雜志,2009,29(2):169- 171.

[17] 鄭曙光,陳波,馬四補,等.艾灸治療對兔膝關節(jié)骨性關節(jié)炎調(diào)節(jié)作用的實驗研究[J].北京中醫(yī)藥大學學報, 2008,31(5):358-360.

[18] 毛翔,孫興華,張?zhí)N.艾灸對多因素致慢性疲勞大鼠海馬5-HT1A受體mRNA表達干預的實驗研究[J].針灸臨床雜志,2013,29(7):86-88.

[19] 閆懷士,李京培.艾灸抗小鼠流感病毒性肺炎的實驗研究[J].上海針灸雜志,2006,25(7):43-44.

[20] 王莖,夏曉紅,葉敏,等.不同灸量艾灸對克羅恩病大鼠結(jié)腸組織損傷積分和血清IgG、IgA、IgM水平的影響[J].天津中醫(yī)藥大學學報,2014,33(1):22-25.

[21] 鄭雪峰,聶焱,王志強.艾灸關元穴對化療后低白細胞模型大鼠外周血象影響的實驗研究[J].湖北中醫(yī)雜志, 2009,31(5):5-6.

[22] 陳波,呂宗華.艾灸對衰老模型鼠外周血淋巴細胞DNA損傷程度影響的實驗研究[J].吉林中醫(yī)藥,2007,27 (6):56-57.

[23] 趙宇輝,孫忠人.艾灸預處理對心肌缺血再灌注大鼠細胞凋亡及HSP70 mRNA表達的影響[J].安徽中醫(yī)學院學報,2009,28(1):36-38.

[24] 陳云飛,楊文佳,馬曉芃,等.不同時段艾灸血清中內(nèi)生性蛋白組分雙向電泳的實驗研究[J].上海中醫(yī)藥大學學報,2007,21(2):57-60.

[25] 肖明良,楊曉忱,鐘潤琪,等.艾灸對亞急性衰老小鼠腦細胞端粒長度影響的實驗研究[J].北京中醫(yī)藥,2013, 32(1):65-67.

[26] 龔紅斌,付勇,肖霞芳,等.CONSORT結(jié)合STRICTOM對灸法治療過敏性鼻炎RCT試驗質(zhì)量的評價[J].江西中醫(yī)藥,2016,47(4):56-60.

[27] 王進東,張春華,胡世平.通督溫陽灸法治療陽虛質(zhì)亞健康狀態(tài)臨床研究[J].新中醫(yī),2015,47(2):187-189.

[28] 周丹萍,孫志嶺,江星,等.不同灸法干預類風濕關節(jié)炎的臨床研究進展[J].國際中醫(yī)中藥雜志,2015,37(5): 471-474.

[29] 張楠.中醫(yī)灸法之源流發(fā)展與應用[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2017,12(9):1221-1224.

[30] Choe S, Cai M, Jerng UM,.The Efficacy and Underlying Mechanism of Moxibustion in Preventing Cognitive Impairment: A Systematic Review of Animal Studies[J]., 2018,27(1):1-15.

[31] Kang HR, Jung CY, Lee SD,.Efficacy and safety of electrical moxibustion for knee osteoarthritis: study protocol for a randomized controlled trial[J]., 2018, 19(1):159.

[32] Wang SJ, Wang Q, Ma J,.Effect of moxibustion on mTOR-mediated autophagy in rotenone-induced Parkinson's disease model rats[J]., 2018,13(1):112-118.

[33] Zhou W, Lei R, Zuo C,.Analgesic Effect of Moxi- bustion with Different Temperature on Inflammatory and Neuropathic Pain Mice: A Comparative Study[J]., 2017:4373182.

[34] 羅英華,唐純志,羅偉君.艾灸背俞穴對慢性疲勞大鼠炎性應激的影響[J].新中醫(yī),2012,44(8):161-162.

[35] 梁玉磊,祝婕,許曉康,等.艾灸動物實驗中引發(fā)的思索[J].中華中醫(yī)藥雜志,2016,31(11):4379-4381.

Preliminary Analysis of the Stimulation Dosage of Moxa-stick Moxibustion in Animal Experiments

,-,-.

,430061,

As an important part of acupuncture-moxibustion therapy, moxibustion prevents and treats diseases by regulating meridians and organs via the stimulation of heat, moxa smoke and infrared. During the recent years, study on the effect of moxibustion in preventing and treating diseases has achieved a great progress. However, the moxibustion dosage varies in application, which adversely influences the moxibustion effect. This article discussed the significance of unifying the moxibustion dosage in experimental studies by reviewing the factors affecting moxibustion dosage including the diameter of moxa stick, treatment distance, time and frequency.

Moxibustion; Stimulation dosage; Experimental study; Review

1005-0957(2018)03-0359-04

R245

A

10.13460/j.issn.1005-0957.2018.03.0359

2017-11-11

董富(1995—),女,2014級學生,Email:1245066716@qq.com

杜艷軍(1975—),女,教授,博士生導師,Email:dyjhbtcm2013@163.com