許英超 王相友 印 祥 胡周勛 岳仁才
(山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院, 淄博 255049)
馬鈴薯作為第四大糧食作物,其品質(zhì)越來越受到人們的關(guān)注。馬鈴薯的品質(zhì)評(píng)價(jià)指標(biāo)較多,如硬度、蛋白質(zhì)含量、干物質(zhì)含量、還原糖含量、淀粉含量等,其中,干物質(zhì)含量是馬鈴薯加工業(yè)對(duì)馬鈴薯品質(zhì)評(píng)價(jià)的主要指標(biāo),關(guān)系到企業(yè)原材料的成本與后續(xù)工藝參數(shù)的選擇[1]。通常用于加工的馬鈴薯干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)需要達(dá)到馬鈴薯鮮質(zhì)量的18%~26%[2]。但馬鈴薯在生長過程中,由于栽培方式[3]和栽培措施[4]的不同,干物質(zhì)會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移,從而在馬鈴薯塊莖內(nèi)部分布不均勻。研究馬鈴薯各部位的干物質(zhì)含量及分布狀態(tài)至關(guān)重要,直接關(guān)系到馬鈴薯加工業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。
國外部分學(xué)者已對(duì)馬鈴薯干物質(zhì)分布情況進(jìn)行研究。PRITCHARD等[5]將馬鈴薯長軸頂端部分去掉,剩余部分均勻分成9塊,干燥后測(cè)量干物質(zhì),結(jié)果顯示,外側(cè)干物質(zhì)含量高于內(nèi)側(cè)含量。BANDANA等[6]認(rèn)為馬鈴薯表皮層干物質(zhì)含量高于其余部位。以上研究均表明馬鈴薯干物質(zhì)在馬鈴薯塊莖各部位的分布不同,但由于取樣方法的局限性,不能精確顯示各部位的具體情況。因此,需要新的方法提供更詳細(xì)的馬鈴薯干物質(zhì)含量分布信息, 目前未見國內(nèi)學(xué)者進(jìn)行此項(xiàng)研究的相關(guān)文獻(xiàn)。
高光譜成像技術(shù)將光譜技術(shù)與成像技術(shù)相結(jié)合,可同時(shí)獲取高光譜圖像中每個(gè)像素點(diǎn)的光譜信息和空間信息[7],根據(jù)官能團(tuán)分子的振動(dòng)躍遷特性,定量測(cè)量被測(cè)物的化學(xué)、物理性質(zhì)及它們的空間分布狀態(tài)。目前,高光譜成像技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于食品質(zhì)量的快速檢測(cè)[8],主要檢測(cè)食品中的水分[9]、蛋白質(zhì)[10]、脂肪[11]、可溶性固形物[12]、還原糖[13]和干物質(zhì)等含量[14]。
本文采用高光譜成像技術(shù)對(duì)馬鈴薯干物質(zhì)的空間分布狀態(tài)進(jìn)行可視化檢測(cè),結(jié)合光譜技術(shù)與圖像處理技術(shù),建立預(yù)測(cè)模型,旨在確定馬鈴薯干物質(zhì)空間分布狀態(tài)的可視化,以期為馬鈴薯精加工提供理論指導(dǎo),為開發(fā)便攜式測(cè)量裝置提供技術(shù)支持。
試驗(yàn)用馬鈴薯采收于山東省滕州市,品種為希森6號(hào)。挑選外表完好、無機(jī)械損傷、大小均勻的馬鈴薯20個(gè)。洗凈放于恒溫23℃暗室內(nèi)晾干24 h。參照MO等[15]方法結(jié)合前期的馬鈴薯光學(xué)特性試驗(yàn)研究,將每個(gè)樣品在平行于軸線方向用ST-208B型手動(dòng)切片機(jī)從右向左依次切11 mm的切片。如圖1所示共有6個(gè)切片,Ⅰ~Ⅴ厚度為11 mm,第6片厚度隨機(jī)。如A-A所示,將Ⅰ~Ⅴ切片用直徑15 mm的打孔器做30個(gè)標(biāo)記。采用高光譜成像系統(tǒng)對(duì)切片進(jìn)行掃描,將標(biāo)記處的馬鈴薯采用干燥法[16]進(jìn)行干物質(zhì)測(cè)量。
圖1 取樣示意圖Fig.1 Sampling image
樣品信息采集,采用可見-近紅外高光譜成像系統(tǒng)。本系統(tǒng)主要包括CCD相機(jī)(美國Xenics公司)、Specim V10E型線掃式近紅外光譜儀(芬蘭奧盧光譜成像有限公司)、雙分支光纖光源(美國Advanced illumination公司)、一軸電動(dòng)移動(dòng)平臺(tái)(臺(tái)灣五鈴光學(xué)股份有限公司)、暗箱、計(jì)算機(jī)等。高光譜系統(tǒng)的波長范圍為382~1 010 nm,光譜分辨率為2.8 nm,入射光狹縫寬30 μm。相機(jī)分辨率1 600像素×1 200像素。光源采用21 V/150 W鹵素?zé)艚影l(fā)光長度152.4 mm的線性光導(dǎo)管加線型聚光鏡,移動(dòng)平臺(tái)移動(dòng)距離為400 mm。
采集的高光譜圖像質(zhì)量與相機(jī)的曝光時(shí)間、鏡頭的焦距、移動(dòng)平臺(tái)的移動(dòng)速度以及光源入射角度有關(guān)[17]。高光譜圖像采集前先將光源提前預(yù)熱30 min,以確保光源穩(wěn)定。然后調(diào)整各參數(shù),確保圖像信息真實(shí)有效。經(jīng)過優(yōu)化,最終設(shè)置的參數(shù)如下:曝光時(shí)間為25 ms,位移平臺(tái)移動(dòng)速度為3.5 mm/s,圖像分辨率為804像素×440像素,物距為210 mm,光源入射角度為45°,如圖2所示。將3片厚度為11 mm的馬鈴薯切片根部向右按順序平鋪在移動(dòng)平臺(tái)上,關(guān)閉暗箱。打開光譜采集軟件IRCP0071-1COMB (臺(tái)灣五鈴光學(xué)股份有限公司),采集每片馬鈴薯的高光譜圖像。之后將剩余2片馬鈴薯切片按相同步驟進(jìn)行高光譜圖像采集。
圖2 高光譜成像系統(tǒng)Fig.2 Hyperspectral imaging system1.光源 2.CCD相機(jī) 3.光譜儀 4.鏡頭 5.電動(dòng)移動(dòng)平臺(tái) 6.暗箱 7.馬鈴薯切片
由于暗電流的存在以及光源強(qiáng)度在不同波段下的不均勻分布,高光譜圖像中含有噪聲信號(hào), 故需要對(duì)高光譜圖像進(jìn)行黑白標(biāo)定[18]。將反射率為0.99且與樣品等高的白板(芬蘭Specim公司)置于樣品采集區(qū)域,將采集的圖像作為全白圖像,標(biāo)記為Iw。將鏡頭蓋上鏡頭蓋采集圖像,作為全黑圖像,記為Ib。對(duì)馬鈴薯干物質(zhì)圖像進(jìn)行校正,公式為
(1)
式中I——校正后的馬鈴薯切片圖像
Ir——原始的馬鈴薯切片圖像
采用Unscrambler 10.5軟件對(duì)原始光譜進(jìn)行預(yù)處理,建立了馬鈴薯干物質(zhì)含量的回歸預(yù)測(cè)模型。采用Matlab 2012軟件對(duì)光譜進(jìn)行特征變量的選取。
分別采用主成分分析(Principal component regression, PCR)、支持向量機(jī)(Support vector regression, SVMR)與偏最小二乘回歸(Partial least squares regression, PLSR)預(yù)測(cè)馬鈴薯干物質(zhì)含量,并得到最優(yōu)模型。將高光譜圖像與最優(yōu)模型結(jié)合,轉(zhuǎn)化成可視化干物質(zhì)分布圖。
試驗(yàn)選用20個(gè)馬鈴薯,每個(gè)馬鈴薯取30個(gè)感興趣區(qū)域(Region of interesting, ROI),共600個(gè)ROI,圖3是馬鈴薯600個(gè)ROI的干物質(zhì)含量分布情況。如圖3所示,馬鈴薯干物質(zhì)含量基本服從正態(tài)分布,在19.5%~22.5%附近較多,兩側(cè)較少。20.5%和21.5%的頻數(shù)最高,均為93次。馬鈴薯干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)取值范圍較大,最小值為12.16%,最大值為28.82%,平均值為20.47%,偏差2.03%。
圖3 馬鈴薯干物質(zhì)分布情況Fig.3 Distribution of potato dry matter content
圖4為各個(gè)馬鈴薯干物質(zhì)的平均含量及偏差情況。20個(gè)馬鈴薯中干物質(zhì)總質(zhì)量分?jǐn)?shù)最小為18.70%,最大為22.92%,偏差范圍為1.60%~3.74%。
圖4 各馬鈴薯干物質(zhì)平均含量及偏差Fig.4 Average dry matter content and standard deviation of each potato
將高光譜圖像校正處理后,提取高光譜圖像上每個(gè)ROI的平均光譜。圖5為單個(gè)馬鈴薯30個(gè)ROI的原始光譜曲線,如圖所示光譜在450 nm附近有較大吸收帶,類胡蘿卜素中葉黃素和玉米黃素的最大吸收波長均在450 nm 左右[19],希森6號(hào)為黃肉品種,類胡蘿卜素含量較高。650 nm附近有小吸收峰,葉綠素在此有吸收帶。750、970 nm吸收峰分別為水的O—H三級(jí)倍頻和二級(jí)倍頻的吸收帶[20]。馬鈴薯中含有70%~80%的水,因此譜圖中970 nm附近有較大吸收帶。
圖5 馬鈴薯原始光譜Fig.5 Raw spectra of potato
將600個(gè)馬鈴薯樣本按照2∶1的比例分配校正集和預(yù)測(cè)集,并保證最大值和最小值在校正集中。表1為馬鈴薯干物質(zhì)在不同預(yù)處理下建立的偏最小二乘回歸模型。SNV-SG-FD的PLSR模型最好。預(yù)測(cè)集的決定系數(shù)和均方根誤差分別為0.803和0.903%,相對(duì)分析誤差為2.248,該值大于2,因此有好的預(yù)測(cè)效果。
表1 干物質(zhì)不同預(yù)處理方法的PLSR預(yù)測(cè)模型Tab.1 Performance of PLSR models of potato dry matter by different preprocessing methods
圖6為光譜預(yù)處理后的效果圖。圖6a為SG平滑預(yù)處理后光譜圖,SG平滑預(yù)處理可有效去除光譜噪聲;與原始光譜相比光譜更平滑。圖6b為SNV預(yù)處理后光譜圖,SNV能減少基線漂移及光散射引起的光譜冗余數(shù)據(jù),圖6b中光譜冗余數(shù)據(jù)少,更集中。圖6c為SNV-SG-FD預(yù)處理后光譜,F(xiàn)D可降低背景因素的干擾,三者相結(jié)合能更好地去除干擾,顯示有效光譜數(shù)據(jù)。由圖6c可以看出,光譜去除冗余信息,顯示出明顯的波峰與波谷。在520 nm出現(xiàn)明顯波峰,花青素的吸收帶在490~550 nm[21],馬鈴薯果肉中有較多含量的花青素[22]。在900 nm附近有較大的吸收峰,淀粉中的C—H三級(jí)倍頻和四級(jí)倍頻吸收帶分別在900 nm和740 nm附近。
圖6 預(yù)處理光譜圖Fig.6 Preprocessed spectrum
采集的光譜共包含440個(gè)波段。為了簡(jiǎn)化建模過程,加快計(jì)算速度,提高模型的預(yù)測(cè)能力,需要提取光譜的特征波段,壓縮光譜數(shù)據(jù),以期實(shí)現(xiàn)馬鈴薯干物質(zhì)的在線可視化檢測(cè)。本文采用正自適應(yīng)加權(quán)算法(Competitive adaptive reweighted sampling, CARS)與連續(xù)投影法(Successive projections algorithm, SPA)相結(jié)合的方法對(duì)光譜進(jìn)行波段選擇[23],并對(duì)所選波段進(jìn)行主成分分析、偏最小二乘回歸和支持向量機(jī)建模[24-25]。
正自適應(yīng)加權(quán)算法選擇變量,先優(yōu)選出PLSR回歸系數(shù)權(quán)重大的波長點(diǎn),再利用十折交叉驗(yàn)證選出n個(gè)校正集均方根誤差最小的子集作為最優(yōu)組合。圖7a是變量數(shù)選擇的變化趨勢(shì),圖7b是十折交叉驗(yàn)證的校正集均方根誤差的變化狀態(tài),圖7c是各變量在采樣過程中回歸系數(shù)的變化路徑。從圖7可知95次采樣獲得的校正集均方根誤差最小,通子集有42個(gè)波段。
圖7 CARS變量選擇Fig.7 Variable selection by CARS
連續(xù)投影法通過分析向量的投影,查找含有冗余信息最少的變量組,使變量共線性最小。通過CARS-SPA選擇變量,共獲得了22個(gè)特征波長(410、421、446、498、525、550、560、604、644、647、661、736、778、792、845、847、898、899、900、906、912、940 nm),結(jié)果如圖8所示。馬鈴薯干物質(zhì)的大部分成分為淀粉,故所選的對(duì)應(yīng)波段主要在900 nm附近(特征波長898、899、900、906、912 nm)。馬鈴薯中葉黃素、花青素和葉綠素的含量較多故所選的特征波段較多(特征波長446、498、525、550、560、644、 647、 661 nm)。
圖8 CARS-SPA二次變量選擇Fig.8 Variable selection by CARS-SPA
表2 不同變量選擇方法及建模結(jié)果Tab.2 Performance of models on different spectra variable selection
圖9 馬鈴薯干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的PLSR預(yù)測(cè)模型Fig.9 PLSR model for potato dry matter content
圖10 馬鈴薯干物質(zhì)含量空間分布圖Fig.10 Distribution map of potato dry matter content
馬鈴薯干物質(zhì)的空間分布很難通過肉眼直觀判斷,圖10是利用所得的PLSR模型,將高光譜上的像素點(diǎn)轉(zhuǎn)換成馬鈴薯干物質(zhì)含量后所得的馬鈴薯干物質(zhì)含量空間分布圖。顏色梯度條由下往上代表馬鈴薯干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)由低變高,范圍為11%~28%。由圖10可知,切片Ⅰ和Ⅴ的主要顏色為紅色,干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為24.62%;切片Ⅱ和Ⅳ的主要顏色為紅色和黃色,以黃色為主,干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)在19%~22%之間;中間切片Ⅲ主要呈藍(lán)綠色,干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)在12%~21%之間。表明馬鈴薯中心干物質(zhì)含量最低,由中心向表皮干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)逐漸增加。
切片Ⅲ的中間有條紫色豎線,是馬鈴薯的內(nèi)髓位置,主要成分為水,因此干物質(zhì)含量低,干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.16%。外圍藍(lán)色圈是馬鈴薯的維管束環(huán)位置,馬鈴薯的干物質(zhì)含量主要分布在內(nèi)髓與維管束環(huán)之間,內(nèi)髓干物質(zhì)含量最低。
由此可以看出高光譜圖像技術(shù)能有效實(shí)現(xiàn)馬鈴薯干物質(zhì)含量的可視化檢測(cè),相比于傳統(tǒng)干物質(zhì)的測(cè)量方法,更快速更直觀。本研究為薯片薯?xiàng)l的加工及檢測(cè)提供了技術(shù)支持,為近紅外便攜設(shè)備的研制提供了基礎(chǔ)。
(1)將CARS-SPA兩種選擇變量的方法相結(jié)合提取原始光譜的特征波段,共獲得了22個(gè)(特征波長410、421、446、498、525、550、560、604、644、647、661、736、778、792、845、847、898、899、900、906、912、940 nm)有效波段。
(3)通過對(duì)馬鈴薯干物質(zhì)空間分布的研究,提出了采用高光譜成像技術(shù)可視化檢測(cè)馬鈴薯干物質(zhì)的方法。利用所得的CARS-SPA-PLSR模型,將高光譜圖像轉(zhuǎn)換成馬鈴薯干物質(zhì)含量空間分布圖,實(shí)現(xiàn)了馬鈴薯干物質(zhì)含量的直觀可視化檢測(cè)。
(4)得出了馬鈴薯干物質(zhì)的空間分布規(guī)律,馬鈴薯干物質(zhì)主要是分布在內(nèi)髓與維管束環(huán)之間,由內(nèi)髓向外干物質(zhì)含量逐漸增加,內(nèi)髓位置干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最低為12.16%,外層干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)可達(dá)24.62%。
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