倪曉強(qiáng)
(珠海貝索生物技術(shù)有限公司,廣東珠海 519015)
細(xì)菌菌液濃度測量是臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的日常工作之一,細(xì)菌懸浮在液體中,整體為渾濁狀液體,其濃度采用專用的麥?zhǔn)蠞舛葋肀硎?,普通比濁計無法測量,因此臨床上常采用肉眼與不同麥?zhǔn)蠞舛葮?biāo)準(zhǔn)管比濁估算或?qū)S名準(zhǔn)媳葷嵊嫓y量。目前市場上所供應(yīng)的比濁計產(chǎn)品大多為國外進(jìn)口產(chǎn)品,價格較昂貴,導(dǎo)致很多國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室因負(fù)擔(dān)不起而仍用人工目測比濁,直接影響到試驗(yàn)的效果和準(zhǔn)確性。同時部分細(xì)菌,如結(jié)核分枝桿菌在配制菌液時需要使用磨菌管(依靠內(nèi)裝的小玻璃珠之間的互相碰撞、碾磨將菌團(tuán)打散)磨菌,然后再吸出懸液比濁,不僅增加操作步驟而且存在潛在的生物安全問題。細(xì)菌比濁的目的基本都是需要配制成指定濃度,現(xiàn)有麥?zhǔn)媳葷嵊嬙跍y量后需要客戶自行計算或多次嘗試來達(dá)到目的,操作復(fù)雜、效率低,也容易導(dǎo)致操作人員的困惑。
鑒于目前存在的情況,開發(fā)了一款智能麥?zhǔn)媳葷嵊?,功能在進(jìn)口儀器基礎(chǔ)上做了技術(shù)改良,不僅具有已有比濁儀的功能,而且還具有可直接對磨菌管進(jìn)行比濁的功能,同時可以適應(yīng)2種管徑,可實(shí)現(xiàn)計算功能,可滿足更多使用要求,更適合于廣大國內(nèi)微生物實(shí)驗(yàn)室使用。
國外一些知名廠商(如梅里埃、BD)已研制開發(fā)出性能穩(wěn)定的濁度計,在國外市場占有一定份額,但價格較昂貴,難以在國內(nèi)普及應(yīng)用。國內(nèi)一些廠商制造的濁度計穩(wěn)定性相對較差,難以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時現(xiàn)有產(chǎn)品均無磨菌管直接測量、自動計算功能。
(1)智能麥?zhǔn)媳葷嵊嫽跐岫葴y試的比濁原理設(shè)計。比濁原理的光學(xué)系統(tǒng)如圖1所示,某一波長的光線,通過菌懸液后,其光強(qiáng)度將被減弱。由朗伯-比爾定律可知,入射光與透過光的強(qiáng)度比,與樣品液的濁度和液體的厚度相關(guān)。若樣品液層厚度一定,則吸光度與樣品的濁度相關(guān)。據(jù)此,控制系統(tǒng)可根據(jù)光電池因透過樣品池的光信號的強(qiáng)弱輸出的不同電信號,來計算樣品濁度。
圖1 濁度法結(jié)構(gòu)
(2)設(shè)計難點(diǎn)。在一定的樣品濁度范圍內(nèi),系統(tǒng)要對光電池的電信號進(jìn)行線性化補(bǔ)償與校正,以達(dá)到測試結(jié)果的精度要求(±0.1 McF);低功耗設(shè)計,盡可能延長充電電池的單次使用時間;采用低成本雙面板達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)對醫(yī)療器械的強(qiáng)制性的電磁兼容性測試認(rèn)證要求。
(3)為解決上述難點(diǎn)及存在問題,在硬件電路上,設(shè)計了全新的方案:硬件電路部分主要由電源模塊、主控模塊、光路模塊、采樣模塊、顯示模塊、按鍵模塊、RS232模塊組成。功能框圖如圖2所示。
圖2 硬件電路框圖
采用鋰電池供電進(jìn)行單+5 V電壓源設(shè)計。該模塊由充電管理電路、電池和升壓電路組成。充電管理部分,具有過壓、過流、過充、過溫保護(hù)功能,保證了產(chǎn)品的安全可靠。鋰電池容量為1800 mA·h,可供儀器正常使用30 d以上。另外,安全環(huán)保的鋰電池代替原設(shè)計的堿性電池,也符合可持續(xù)綠色環(huán)保設(shè)計理念。升壓部分,采用電荷泵升壓原理,功耗低,轉(zhuǎn)換效率高(90%)。
采用高性能、低功耗的8位AVR(Alf-Egil Bogen,Vegard Wollan,RISC;Alf-Egil Bogen,Vegard Wollan,精簡指令集)單片機(jī)ATmega64A-AU作為主控芯片,控制系統(tǒng)的充電、按鍵檢測、數(shù)據(jù)采樣與計算、結(jié)果顯示與保存、結(jié)果輸出、參數(shù)設(shè)置與保存。
主要由恒流電路組成,為比濁法光路系統(tǒng)的光源提供恒定電流。基于運(yùn)放加場效應(yīng)管的恒流源,可提供精度較高的恒定電流,在保證LED(Light-Emitting Diode,發(fā)光二極管)發(fā)光光強(qiáng)的同時,也延長了LED光源的壽命。采用波長為590 nm的單色LED,可省去濾光片,簡化了結(jié)構(gòu)。且使用短波長的光,對于小顆粒的散射更為靈敏,利于測量。
為了實(shí)現(xiàn)直接測量磨菌管的功能,在光路設(shè)計上采用了高位單光徑設(shè)計,避開了底部玻璃珠的干擾,實(shí)現(xiàn)直接測量功能。
通過光電池采集透過樣品池的光信號,并轉(zhuǎn)化為電信號,經(jīng)放大后輸入到單片機(jī)。采樣模塊是整個設(shè)計的難點(diǎn)之一。光電池輸出的是微弱的電信號,需要保證放大后提供給單片機(jī)的電信號不失真,即保持其線性關(guān)系,否則無法計算出正確的濁度值。
LCD(Liquid Crystal Display,液晶顯示器)液晶顯示模組,通過SPI(Serial Peripheral Interface,串行外圍設(shè)備接口)協(xié)議與主控芯片通信,顯示儀器的運(yùn)行狀態(tài)、測量結(jié)果、參數(shù)等。
通過按鍵檢測,實(shí)現(xiàn)對儀器的校準(zhǔn)、測量、參數(shù)設(shè)置等操作。
實(shí)現(xiàn)對測量結(jié)果的輸出。通過串口,可連接熱敏打印機(jī)打印測試結(jié)果。
軟件系統(tǒng)功能框圖,如圖3所示。其中最大的特點(diǎn),就是解決了自動計算和多途徑校準(zhǔn)功能。
圖3 軟件功能框圖
計算功能根據(jù)客戶設(shè)定的初始體積和目標(biāo)濁度,自動計算需要增加的液體量,較人工計算更準(zhǔn)確更高效。
多途徑校準(zhǔn)功能使得客戶不用經(jīng)常使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行多點(diǎn)校準(zhǔn),可以直接回復(fù)初始校準(zhǔn)值,采用單點(diǎn)校正的方式保證測量值的準(zhǔn)確性。
隨著智能麥?zhǔn)媳葷嵊嫷膶?shí)際應(yīng)用,其本身所具備的優(yōu)勢與特點(diǎn)逐漸被深入的開發(fā)出來,并且進(jìn)行廣泛的運(yùn)用,使得實(shí)驗(yàn)室工作更加準(zhǔn)確、便利。