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        FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達(dá)情況及其與腫瘤分期、轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

        2018-03-08 01:26:24李延新
        實(shí)用癌癥雜志 2018年1期
        關(guān)鍵詞:染色胃癌病理

        李延新 杜 雄

        已有研究表明,F(xiàn)OX家族蛋白與核基質(zhì)結(jié)合蛋白(SATB-1)參與到細(xì)胞凋亡,惡性腫瘤轉(zhuǎn)化過程,因此本研究旨在探究FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達(dá)情況及其與腫瘤分化、轉(zhuǎn)移、臨床預(yù)后的相關(guān)性,以期為胃癌早期診斷提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 標(biāo)本來源

        收集我院2013年2月至2015年4月收治的180例經(jīng)外科手術(shù)切除并經(jīng)病理確診的胃癌組織標(biāo)本及相應(yīng)的癌旁正常組織(鏡下診斷無癌組織浸潤)作為對照組,其中包含男性114例,女性66例,平均年齡(57.72±4.1)歲;所有手術(shù)標(biāo)本在半小時(shí)內(nèi)采集后立即儲存中液氮。TNM分期參考美國癌癥聯(lián)合委員會(AJCC)分期標(biāo)準(zhǔn)。

        1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn)

        納入標(biāo)準(zhǔn):①所有病例在術(shù)前均未行放化療;②病例資料完整,均與家屬簽署知情同意書。該研究獲得我院倫理委員會批準(zhǔn);排除標(biāo)準(zhǔn):①合并嚴(yán)重臟器功能不全;②合并其他惡性腫瘤。

        1.3 方法

        1.3.1 免疫組織化學(xué) 采用免疫組織化學(xué)(SP法)檢測胃癌組織及癌旁正常組織中FOXJ1及SATB-1蛋白的表達(dá)情況,所有操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書(SP試劑盒購于武漢博士德生物有限公司)。操作步驟簡述如下:常規(guī)切片后烤片、二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水、滅活內(nèi)源性過氧化物酶,抗原修復(fù)、滴加已稀釋好的一抗(兔抗人SATB1多克隆抗體、鼠抗人FOXJ1單克隆抗體均購于美國Abcam公司)、4 ℃孵育過夜、加二抗室溫孵育,滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素孵育、使用DAB顯色(DAB顯色試劑盒購于武漢博士德生物有限公司),蘇木精復(fù)染,脫水并封片。

        1.3.2 結(jié)果判定 SATB-1是核轉(zhuǎn)錄因子,定位于細(xì)胞核,細(xì)胞核呈橘黃色為陽性表達(dá)。FOXJ1蛋白染色以細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)淡黃色至棕黃色顆粒為陽性。參照Sinicrope[1]評分標(biāo)準(zhǔn)對蛋白進(jìn)行半定量:根據(jù)陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度及細(xì)胞陽性率綜合評分,兩者得分相乘,總分(0~3)分為陰性表達(dá),總分(4~12)分為陽性表達(dá)。染色強(qiáng)度評分:未出現(xiàn)陽性染色計(jì)0分;弱染色1分;中等染色2分;強(qiáng)染色3分;細(xì)胞陽性率評分:隨機(jī)選取5個(gè)視野,陽性細(xì)胞數(shù)≤5%計(jì)0分;6%~25%計(jì)1分;26%~50%計(jì)2分;51%~75%計(jì)3分;≥75%計(jì)4分。由兩名病理科副主任醫(yī)師獨(dú)立閱片。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        應(yīng)用SPSS 17.0軟件,計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)對比分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 FOXJ1及SATB-1在胃癌組織及癌旁正常組織中表達(dá)量的差異

        經(jīng)免疫組織化學(xué)SP法檢測發(fā)現(xiàn)FOXJ1蛋白在胃癌組織中陽性表達(dá)率為48.33%,顯著低于其在正常組織中的陽性表達(dá)率(94.44%,P<0.01);SATB-1蛋白在胃癌組織中陽性表達(dá)率為58.33%,顯著高于其在正常組織中的陽性表達(dá)率(9.44%,P<0.01),見表1。

        2.2 FOXJ1及SATB-1蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

        統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明:不同性別、年齡及不同腫瘤位置患者的FOXJ1蛋白表達(dá)水平比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),而與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、臨床分期等顯著相關(guān)。浸潤深度大、分化程度低、已發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者FOXJ1蛋白陽性表達(dá)率顯著較低(P<0.05)。SATB-1蛋白表達(dá)水平與患者年齡、性別、腫瘤位置等無相關(guān)性(P>0.05),而浸潤深度深、已發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者SATB-1蛋白陽性表達(dá)率顯著較高(P<0.05),見表2。

        表1 FOXJ1及SATB-1在不同組織中表達(dá)水平的差異(例,%)

        3 討論

        研究表明在惡性腫瘤的增殖、發(fā)展過程中常伴隨著原癌基因與抑癌基因的調(diào)控紊亂,進(jìn)而導(dǎo)致相應(yīng)蛋白的異常表達(dá)[2]。研究腫瘤病理過程中蛋白質(zhì)表達(dá)變化有助于發(fā)現(xiàn)腫瘤病變中關(guān)鍵的調(diào)控蛋白,通過定向調(diào)節(jié)該蛋白的表達(dá)水平,控制腫瘤病變,這也是腫瘤靶向治療的基礎(chǔ)。本文采用免疫組化的方法檢測FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達(dá)情況及其與腫瘤分化、轉(zhuǎn)移、臨床預(yù)后的相關(guān)性,結(jié)果表明:FOXJ1蛋白在胃癌組織中陽性表達(dá)率顯著低于其在正常組織中的陽性表達(dá)率,而SATB-1蛋白在胃癌組織中陽性表達(dá)率顯著高于其在正常組織中的陽性表達(dá)率。進(jìn)一步研究蛋白表達(dá)水平與臨床病理的相關(guān)性發(fā)現(xiàn):不同性別、年齡及腫瘤位置患者的FOXJ1、SATB-1蛋白表達(dá)水平比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。腫瘤浸潤深度大、發(fā)生淋巴結(jié),遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者的FOXJ1蛋白陽性表達(dá)率顯著較低,SATB-1蛋白陽性表達(dá)率顯著較高。

        FOXJ1蛋白是FOX蛋白家族中的一員,F(xiàn)OX家族在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起重要的調(diào)控作用。已有研究表明,F(xiàn)OXJ1可通過促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及金屬蛋白酶7的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移;FOXQ1在多種腫瘤病變中扮演促癌基因角色,加快腫瘤惡化。與其他成員的作用不同,F(xiàn)OXJ1蛋白在不同的腫瘤類型及發(fā)展階段呈現(xiàn)異質(zhì)性表達(dá),在肝癌患者組織中FOXJ1蛋白表達(dá)上調(diào),然而在卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌中FOXJ1蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào),且具有明顯的浸潤和促轉(zhuǎn)移作用[3]。在胃癌組織中FOXJ1蛋白發(fā)揮抑癌基因作用,該研究結(jié)果與劉秀鵬[4]、袁春鑾等[5]的報(bào)道一致。目前,關(guān)于FOXJ1蛋白的異質(zhì)性表達(dá)還沒有明確的機(jī)制解釋,仍需進(jìn)一步研究。核基質(zhì)結(jié)合蛋白(SATB-1)是1種組織特異性表達(dá)的核基質(zhì)結(jié)合蛋白,其廣泛參與細(xì)胞分化、凋亡、腫瘤的發(fā)生過程,能夠調(diào)控與腫瘤發(fā)生相關(guān)的上千余種基因的表達(dá),被譽(yù)為“基因組織者”。研究顯示SATB-1能夠上調(diào)原癌基因表達(dá)的同時(shí)下調(diào)抑癌基因表達(dá),在結(jié)腸癌、肝癌、前列腺癌等惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá),且與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)[6-7],本研究中SATB-1在胃癌組織中呈現(xiàn)出相似的特性。

        表2 FOXJ1、SATB-1蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)的相關(guān)性/例

        綜上所述,F(xiàn)OXJ1及SATB-1蛋白參與胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中,且與腫瘤分化、轉(zhuǎn)移等病理指標(biāo)密切相關(guān),可作為預(yù)測腫瘤惡性程度及轉(zhuǎn)移傾向的臨床指標(biāo)。

        [1] Sinicrope FA,Ruan SB,Cleary KR,et al.bcl-2 and p53 oncoprotein expression during colorectal tumorigenesis〔J〕.Cancer Res,1995,55(2):237-241.

        [2] Phang CW,Karsani SA,Sethi G,et al.Flavokawain C inhibits cell cycle and promotes apoptosis,associated with endoplasmic reticulum stress and regulation of MAPKs and akt signaling pathways in HCT 116 human colon carcinoma cells〔J〕.Plos One,2016,11(2):e0148775.

        [3] 王 靜.FOXJ1在胃癌惡性生物學(xué)表型中的作用和機(jī)制〔D〕.第四軍醫(yī)大學(xué),2014.

        [4] 劉秀鵬,趙素芳,胡晶晶,等.FOXJ1在胃癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性〔J〕.海南醫(yī)學(xué),2016,27(2):192-194.

        [5] 袁春鑾,孫志超,張 磊,等.SATB1陽性患者胃癌臨床病理特征分析及預(yù)后〔J〕.實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2016,20(3):52-55.

        [6] 胥 穎,董丹丹,李 科,等.核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白質(zhì)1在胃癌中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系〔J〕.實(shí)用醫(yī)院臨床雜志,2016,13(2):60-62.

        [7] 劉淮東,高 超.SATB1、KISS1在胃腺癌組織芯片中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志,2016,21(1):52-56.

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