，

社區(qū)獲得性肺炎(CAP)是指在醫(yī)院外罹患的感染性肺實(shí)質(zhì)(含肺泡壁，即廣義上的肺間質(zhì))炎癥，包括具有明確潛伏期的病原體感染在入院后于潛伏期內(nèi)發(fā)病的肺炎。肺炎支原體(MP)是我國(guó)成人CAP的重要致病源。急性心肌梗死(AMI)是指由于持久而嚴(yán)重的心肌缺血所致的部分心肌急性壞死。CAP和AMI均是老年多發(fā)病，隨著社會(huì)人口老齡化，且合并出現(xiàn)臨床較多見，合并出現(xiàn)時(shí)病情兇險(xiǎn)，死亡率高。本研究分析MP感染與CAP合并AMI的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 CAP合并AMI組為2015年1月—2016年10月在我院老年醫(yī)學(xué)科和冠心病重癥監(jiān)護(hù)治療病房(CCU)住院治療的病人30例，男18例，女12例，年齡78.27歲±4.72歲，未合并嚴(yán)重肝、腎、內(nèi)分泌等系統(tǒng)疾病；CAP未合并AMI組為同期住院治療的病人30例，男19例，女11例，年齡76.67歲±3.83歲，未合并嚴(yán)重心、肝、腎、內(nèi)分泌等系統(tǒng)疾病。CAP診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)《中國(guó)成人社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南》；AMI診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)《急性心肌梗死診斷和治療指南》。健康對(duì)照組30名為同期健康體檢者，男15名，女15名，年齡76.47歲±4.09歲，經(jīng)臨床檢查排除糖尿病、心、腦、肺、腎、肝臟等器官的器質(zhì)性病變，近2個(gè)月無(wú)呼吸系統(tǒng)疾病史。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)本采集 分別抽取病人入院24 h內(nèi)(急性期)及恢復(fù)期空腹非抗凝外周靜脈血8mL～10mL，3 000 r/min(離心半徑18.5 cm)離心10 min分離血清，置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。兩次采血間隔時(shí)間約3周。痰標(biāo)本由專人于入院24 h內(nèi)用一次性吸痰管送入鼻腔5 cm～10 cm，利用負(fù)壓吸引的原理，吸取痰液1 mL～2 mL，置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。咽拭子由專人于入?4 h內(nèi)用無(wú)菌棉拭子擦取病人咽后壁黏膜留取，置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。采集同期健康體檢者空腹非抗凝外周靜脈血，離心，置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。留取健康體檢者咽拭子，置-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 MP-IgM檢測(cè) 采用ELISA法檢測(cè)，德國(guó)Virion/Serion公司的MP-IgM試劑盒，嚴(yán)格按照說明書操作，檢測(cè)所有病人急性期、恢復(fù)期及健康體檢者M(jìn)P-IgM水平。診斷標(biāo)準(zhǔn)：急性期MP-IgM效價(jià)≥1∶160或雙份血清學(xué)標(biāo)本抗體滴度升高4倍以上可診斷為MP急性感染陽(yáng)性。

1.2.3 MP-DNA檢測(cè) 采用RT-PCR法檢測(cè)所有病人急性期痰標(biāo)本、咽拭子MP-DNA，檢測(cè)健康體檢者咽拭子MP-DNA?？偤怂?DNA/RNA)提取試劑盒及MP-DNA擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因診斷公司。檢測(cè)儀器為美國(guó)ABI 7500自動(dòng)熒光檢測(cè)儀。痰標(biāo)本經(jīng)震蕩、離心、去上清，再加入裂解液提取總核酸；將咽拭子加入1 mL無(wú)菌生理鹽水充分震蕩混勻，取漂洗液離心、去上清，加入裂解液中，提取咽拭子標(biāo)本中的總核酸。設(shè)計(jì)上游引物Ⅰ 5’-GCAAGGGTTCGTTATTG-3’，下游引物Ⅱ 5’-CGCCTGCGCTTGCTTTAC-3’，熒光探針 5’-AGGTAATGGCTAGAGTTTGACTG-3’。反應(yīng)總體積為50 μL。循環(huán)溫度設(shè)置：預(yù)變性94 ℃ 2 min；變性93 ℃ 45 s，退火55 ℃ 60 s，循環(huán)10次；變性93 ℃ 30 s，退火55 ℃ 45 s，循環(huán)30次。結(jié)果以Ct值顯示，反應(yīng)結(jié)束電腦自動(dòng)采集、分析結(jié)果。診斷標(biāo)準(zhǔn)：MP-DNA拷貝數(shù)≥1.00e+005copies/mL，診斷為MP感染陽(yáng)性。根據(jù)陽(yáng)性質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品所得數(shù)據(jù)分析并調(diào)節(jié)基線起始值和閾值，標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率為-3.70，線性相關(guān)系數(shù)R2>0.992。結(jié)果判定：若擴(kuò)增曲線呈S型且Ct值<30，則判定樣品的MP-DNA為陽(yáng)性；若擴(kuò)增曲線不呈S型或Ct值≥30，則判定樣品的MP-DNA為陰性。

1.2.4 白介素-6(IL-6)檢測(cè) 采用ELISA法，試劑盒由德國(guó)Virion/Serion公司提供，嚴(yán)格按說明書操作，檢測(cè)所有病人急性期及健康體檢者IL-6水平。

2 結(jié) 果

2.1 MP的感染情況

2.1.1 血清MP-IgM檢測(cè)結(jié)果 CAP合并AMI組血清MP-IgM陽(yáng)性率為40.00%(12/30)，CAP未合并AMI組血清MP-IgM陽(yáng)性率為20.00%(6/30)。CAP合并AMI組MP-IgM陽(yáng)性率高于CAP未合并AMI組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.857，P=0.091)。

2.1.2 痰標(biāo)本MP-DNA檢測(cè)結(jié)果 CAP合并AMI組痰標(biāo)本MP-DNA陽(yáng)性率為63.33%(19/30)，CAP未合并AMI組痰標(biāo)本MP-DNA陽(yáng)性率為30.00%(9/30)。CAP合并AMI組痰標(biāo)本MP-DNA陽(yáng)性率明顯高于CAP未合并AMI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.696，P=0.010)。

2.1.3 咽拭子MP-DNA檢測(cè)結(jié)果 CAP合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率為63.33%(19/30)，CAP未合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率為20.00%(6/30)，健康對(duì)照組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率為6.67%(2/30)。CAP合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率明顯高于CAP未合并AMI組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.589，P<0.01)。CAP合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=21.172，P<0.01)。CAP未合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率與健康對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 3組IL-6水平比較 CAP合并AMI組IL-6水平明顯高于CAP未合并AMI組和健康對(duì)照組，CAP未合并AMI組IL-6水平明顯高于健康對(duì)照組，LSD、SNK檢驗(yàn)結(jié)果表明3組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 3組IL-6水平比較 (±s) ng/L

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是動(dòng)脈壁的一種病理改變，其特征是血管增厚、僵硬和管腔縮小。AS認(rèn)為是一種膽固醇貯積疾病，過去幾年中，對(duì)AS病理生理學(xué)的認(rèn)識(shí)經(jīng)歷明顯演變。AS認(rèn)為是一種慢性炎癥性疾病[1]，其特征是具有吞噬和抗原提呈能力的細(xì)胞被激活，氧化修飾脂蛋白的積累，受損的免疫細(xì)胞和組織原位修復(fù)的增加及動(dòng)脈內(nèi)膜的增生性病變[2-4]，其中病原微生物感染可能是病因之一[5-7]。AMI是冠狀動(dòng)脈急性、持續(xù)性缺血缺氧所引起的心肌壞死。AS不穩(wěn)定斑塊破裂或糜爛導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓形成，認(rèn)為是大多數(shù)AMI發(fā)病的主要病理基礎(chǔ)。

本研究顯示，CAP合并AMI組MP-IgM陽(yáng)性率(40.00%)高于CAP未合并AMI組MP-IgM陽(yáng)性率(20.00%)；CAP合并AMI組痰標(biāo)本MP-DNA陽(yáng)性率(63.33%)明顯高于CAP未合并AMI組痰標(biāo)本MP-DNA陽(yáng)性率(30.00%)；CAP合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率(63.33%)明顯高于CAP未合并AMI組咽拭子MP-DNA陽(yáng)性率(20.00%)。結(jié)果表明CAP合并AMI時(shí)MP感染陽(yáng)性率較高，提示MP急性感染在AMI起病過程中發(fā)揮重要作用，MP感染可能是AMI病因之一。

IL-6是由活化的單核/巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白[8-9]，可激活炎癥細(xì)胞，促進(jìn)肝細(xì)胞合成大量C反應(yīng)蛋白(CRP)，激活的炎癥細(xì)胞合成、釋放其他促炎因子，參與肝臟急性期反應(yīng)，故IL-6水平反映機(jī)體的炎癥狀態(tài)[10]。激活的炎癥細(xì)胞引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，細(xì)胞黏附分子表達(dá)增加，參與血栓形成；同時(shí)CRP與脂蛋白結(jié)合，通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)，加重心肌細(xì)胞損傷、壞死。Anderson等[11]研究表明，AMI病人IL-6 mRNA表達(dá)高于正常冠脈對(duì)照組6倍，提示IL-6介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能參與動(dòng)脈粥樣斑塊的易損和破裂，IL-6水平可能與斑塊的不穩(wěn)定程度有關(guān)。故認(rèn)為IL-6是AMI的危險(xiǎn)因素。

本研究顯示，CAP合并AMI病人IL-6水平明顯升高，同時(shí)MP感染陽(yáng)性率明顯升高，提示AMI時(shí)存在較強(qiáng)的炎癥激活，MP感染是炎癥因子激活的因素之一。機(jī)體感染MP后，IL-6誘導(dǎo)T細(xì)胞分化、B細(xì)胞生長(zhǎng)，參與炎癥反應(yīng)的病理過程。劉芳等[12]研究提示IL-6水平在肺炎支原體肺炎急性期明顯高于普通肺炎，且急性期高于恢復(fù)期，重癥病人高于輕癥病人，提示其在肺炎支原體肺炎免疫應(yīng)答的、早期即發(fā)揮重要作用，IL-6可能與MP感染的嚴(yán)重程度和轉(zhuǎn)歸相關(guān)。有研究表明，IL-6水平增高是早期出現(xiàn)的感染指標(biāo)[13]，其過度表達(dá)可致多器官、多系統(tǒng)損傷[14-15]。MP持續(xù)感染導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞損傷、平滑肌細(xì)胞增殖、膽固醇沉積、泡沫細(xì)胞形成，促進(jìn)AS斑塊形成；急性MP感染促進(jìn)AS斑塊破裂、脫落，誘發(fā)AMI。

綜上所述，MP感染是炎癥因子增加的因素之一，感染急性期IL-6明顯升高，導(dǎo)致較強(qiáng)的炎癥激活，促進(jìn)AS斑塊破裂、脫落，誘發(fā)AMI。說明AMI發(fā)生在一定程度上與炎癥反應(yīng)有關(guān)，而MP感染加重冠狀動(dòng)脈內(nèi)炎癥反應(yīng)，觸發(fā)AS斑塊不穩(wěn)定，導(dǎo)致AMI發(fā)生。早期準(zhǔn)確、及時(shí)控制MP感染，可減少CAP合并AMI的發(fā)生，具有重要的臨床意義。

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