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        一起仔豬感染圓環(huán)病毒2型的診斷及防控

        2018-03-06 05:45:31谷溪張培虎山東省成武縣畜牧獸醫(yī)局274200
        山東畜牧獸醫(yī) 2018年2期
        關(guān)鍵詞:檢測

        谷溪 張培虎 (山東省成武縣畜牧獸醫(yī)局 274200)

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        一起仔豬感染圓環(huán)病毒2型的診斷及防控

        谷溪 張培虎 (山東省成武縣畜牧獸醫(yī)局 274200)

        某規(guī)?;i場斷奶仔豬發(fā)生漸行性消瘦,皮膚發(fā)白,精神沉郁,呼吸困難,病程長為特征的疾病。剖檢發(fā)現(xiàn)肺臟呈橡皮樣,腹股溝淋巴結(jié)腫大。采集病死豬病料,采用RT-PCR和PCR方法進行檢測。結(jié)果顯示所采樣品中,豬圓環(huán)病毒2型為陽性,豬瘟病毒野毒株、藍(lán)耳病毒和偽狂犬病毒均為陰性。結(jié)合臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測結(jié)果,診斷為豬圓環(huán)病毒2型感染。

        豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus virus,PCV)屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬的單股環(huán)狀負(fù)鏈DNA病毒,為已知最小的動物病毒之一[1]。目前PCV主要分為PCV1和PCV2兩種血清型,其中PCV-1在豬群中廣泛存在,但無致病性,而PCV-2能引起豬繁殖障礙、豬皮炎與腎病綜合征、仔豬先天性震顫等一系列臨床表現(xiàn),統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病(PCVAD)[2]。由于該病主要破壞動物機體的免疫系統(tǒng),造成免疫抑制,引起繼發(fā)感染并誘發(fā)細(xì)菌和病毒的混合感染,給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。

        1 發(fā)病情況

        該豬場存欄仔豬200頭,從2017年2月有35~50日齡仔豬陸續(xù)發(fā)病,發(fā)病率不高,但病程較長,最長有1個月,死亡率較高達20%。該批仔豬按照本場免疫流程進行了偽狂犬、豬瘟等疫苗的免疫,但未免疫過藍(lán)耳疫苗和圓環(huán)病毒疫苗。

        2 臨床癥狀

        仔豬被毛粗亂無光澤,皮膚發(fā)白,精神沉郁,眼睛分泌物增多,發(fā)熱,咳嗽、腹部和四肢等部位出現(xiàn)暗紅色病灶,觸摸淋巴結(jié)腫大等,生長緩慢消瘦,群體大小不均一。個別出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大,呼吸困難等臨床癥狀。

        3 剖檢變化

        對病死豬進行剖檢發(fā)現(xiàn),主要肺臟變硬,蒼白呈橡皮樣,腹股溝淋巴結(jié)腫大,腎臟水腫蒼白,其他臟器無明顯肉眼可見病變。

        4 實驗室檢測

        4.1 材料與方法

        4.1.1 試劑 豬瘟病毒野毒株實時熒光RT-PCR檢測試劑盒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實時熒光RT-PCR檢測試劑盒,購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司;豬偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒和豬圓環(huán)病毒2型熒光PCR檢測試劑盒及病毒DNA/RNA柱式提取試劑盒,均購自北京森康生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

        4.1.2 檢測方法 無菌采集病死豬的腎臟、肺臟、脾臟和腹股溝淋巴結(jié)。將4種臟器混合剪碎后,研磨并勻漿,反復(fù)凍融4次,4℃,8000r/min離心5min,取上清液分別用DNA/RNA柱式提取試劑盒提取核酸,置于-20℃保存?zhèn)溆?。豬瘟病毒野毒株和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的反轉(zhuǎn)錄、擴增,偽狂犬病毒和圓環(huán)病毒2型的擴增均按試劑盒說明進行操作。

        4.1.3 結(jié)果判定 豬瘟病毒野毒株和藍(lán)耳病病毒(通用型)判定方法:Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線判為陽性;3030且出現(xiàn)典型的擴增曲線的樣品應(yīng)復(fù)檢,復(fù)檢仍出現(xiàn)上述結(jié)果的判為陽性,否則判為陰性。

        4.2 結(jié)果與分析

        附表 豬瘟病毒野毒株、豬藍(lán)耳病病毒(通用型)、豬偽狂犬病毒和豬圓環(huán)病毒2型的熒光RT-PCR /PCR檢測結(jié)果

        項目豬瘟病毒野毒株藍(lán)耳病病毒(通用型)豬偽狂犬病毒豬圓環(huán)病毒2型 Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果 陽性對照陰性對照15.360試驗成立24.250試驗成立23.340試驗成立14.3260試驗成立 樣品B0陰性0陰性0陰性6.920陽性 樣品C0陰性0陰性0陰性20.037陽性

        注:樣品B為病死豬,樣品C為發(fā)病活豬。

        從附表可以看出,2份樣品豬瘟病毒野毒株、藍(lán)耳病病毒(通用型)和偽狂犬病毒檢測結(jié)果均為陰性,圓環(huán)病毒2型均為陽性,這表明2份樣品同時感染了圓環(huán)病毒2型。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化、實驗室檢測等綜合判定,本次豬場發(fā)病原因主要是由豬圓環(huán)病毒2型感染而引起的。

        5 綜合防控措施

        5.1 加強飼養(yǎng)管理

        飼養(yǎng)管理是養(yǎng)殖生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)。根據(jù)仔豬生長情況,及時降低飼養(yǎng)密度,保持良好的圈舍通風(fēng)。保證豬群全價營養(yǎng),禁止飼喂發(fā)霉變質(zhì)飼料。實行全進全出的飼養(yǎng)方式,合理進行分群與混養(yǎng),避免將不同日齡的豬混群飼養(yǎng),從而減少和降低豬群之間PCV2及其他病原接觸感染的機會。

        5.2 減少應(yīng)激因素

        保育豬自身免疫還未健全,同時由于生長、生理特點及環(huán)境、營養(yǎng)、應(yīng)激等因素的影響,可降低斷奶仔豬的抵抗力,很容易被病毒感染[3]。仔豬斷奶后21~30d是預(yù)防本病的關(guān)鍵時期,因此,最有效的方法和措施是盡可能減少對斷奶仔豬的刺激[4]。

        5.3 科學(xué)免疫接種

        做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細(xì)小病毒病和豬支原體肺炎等疾病的疫苗免疫接種,有效預(yù)防和控制其他感染性疾病,提高豬群整體的免疫抗體水平,減少呼吸道系統(tǒng)病原的繼發(fā)感染。結(jié)合周邊疾病流行狀況和本場實際情況,科學(xué)選擇圓環(huán)病毒(PCV-2)滅活疫苗或亞單位疫苗對豬群進行免疫,降低豬群感染圓環(huán)病毒的風(fēng)險。

        5.4 建立生物安全體系

        科學(xué)防控,逐步建立豬場生物安全體系。嚴(yán)格控制外來人員、車輛進入豬場,嚴(yán)防外來病原的引入。避免從疫區(qū)引進豬只,保障本場豬群健康。對早期發(fā)現(xiàn)疑似感染豬進行檢查、隔離、淘汰,病死豬及糞便排泄物做無害化處理。建立消毒制度,定期消毒,徹底對畜舍進行打掃消毒,切實做好豬場的生物安全工作。

        5.5 做好保健預(yù)防

        為更好地提高豬群的免疫力、抗病力,預(yù)防和減少其他疫病的混合感染或繼發(fā)感染,可在飼料中適當(dāng)添加黨參、白術(shù)、黃芪之類的補氣扶正藥,配合添加優(yōu)質(zhì)電解多維,對防控豬圓環(huán)病毒相關(guān)病很有益處[5]。

        [1] 田家偉, 吳霞, 張亮等. 重慶地區(qū)某規(guī)模化豬場豬圓環(huán)病毒2型的PCR檢測[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013, 03(上): 89-91.

        [2] 陳陸, 彭志鋒, 楊霞等. 10株豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)河南株全基因組的克隆與序列分析[J]. 中國獸醫(yī)學(xué), 2010, 30(2): 166-173.

        [3] 蘆銀華, 陳德勝, 戴亞斌等. 應(yīng)用復(fù)合PCR法檢測豬圓環(huán)病毒[J]. 中國獸醫(yī)科技, 2001, 31(9): 8-9.

        [4] 方博, 宋慧敏, 鐘麗紅等. 豬圓環(huán)病毒2型的臨床特點及綜合防控[J]. 廣東飼料, 2017, 26(5): 48-50.

        [5] 懷川, 王茜, 王升等. 豬圓環(huán)病毒相關(guān)病(PCVAD)及其防治措施[J]. 中國畜禽種業(yè), 2013. 9(3).112.

        (2017–09–19)

        S858.28

        B

        1007-1733(2018)02-0039-02

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