韓風(fēng)波 宮敬利 畢博

【摘 ?要】 本試驗(yàn)選取提取時(shí)間、提取次數(shù)、提取溶劑3個(gè)因素進(jìn)行槲蕨超聲波黃酮含量提取試驗(yàn)研究，結(jié)果表明：提取時(shí)間20min、提取次數(shù)1次、提取溶劑濃度為65%乙醇時(shí)，槲蕨超聲波提取黃酮含量最高，希望能為槲蕨整個(gè)黃酮提取工藝奠定基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】 黃酮;槲蕨;超聲波提取

Effect of extraction time， times and solvent concentration on extraction of flavonoids from quercetin by ultrasonic wave

Hang Fengbo ?Gong Jingli ?Bi Bo

[Abstract] The test selection of extraction time， extraction times and three factors of extraction solvent for it fern， experimental study on ultrasound extraction flavonoids content results showed that 20 min extraction time， extraction times 1 time， concentration of extraction solvent was 65% ethanol， it fern ultrasonic extracting flavonoids content is the highest， hope it can fern the flavonoids extraction technology to lay the foundation.

[Keywords] flavonoids; the antioxidant ferns; ultrasonic extraction

槲蕨，為骨碎補(bǔ)科中的一種附生植物，拉丁學(xué)名：Drynaria roosii Nakaike，又稱(chēng)骨碎補(bǔ)、毛姜、猴姜、申姜、爬巖姜、石巖姜等。該植物主產(chǎn)于遼寧（大連）、山東（嶗山、昆箭山、牟平、招遠(yuǎn)、威海）、江蘇（海州）及臺(tái)灣等地，其活性成分為以柚皮苷為主的二氫黃酮類(lèi)化合物。槲蕨是一種重要的藥用植物，功能主治補(bǔ)腎、活血、止血，治腎虛久瀉及腰痛，風(fēng)濕痹痛，齒痛，耳鳴，跌打閃挫、骨傷，闌尾炎，也可治斑禿和雞眼等[1]。本試驗(yàn)以槲蕨黃酮含量為指標(biāo)，通過(guò)研究超聲提取時(shí)間、提取次數(shù)、提取溶劑濃度對(duì)槲蕨黃酮含量的影響，以?xún)?yōu)化槲蕨中黃酮提取最佳的提取工藝，為生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗(yàn)材料

槲蕨采集于吉林市左家自然保護(hù)區(qū);無(wú)水乙醇（分析純）、蒸餾水、5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品等藥品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供;試驗(yàn)儀器有：752 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海奧普勒儀器有限公司）、JY2002電子天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）、F80型高速粉碎機(jī)（金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠(chǎng)）、電子分析天平（CP114 奧豪斯儀器有限公司上海）、THC-5B型數(shù)控超聲提取機(jī)（濟(jì)寧天華超聲電子儀器有限公司），均由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院中藥實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 ?試驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備 ?取蘆丁20.00mg，定容到100mL容量瓶中，配置0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，取10mL容量瓶6支，依次稱(chēng)取0、1、2、3、4、5mL標(biāo)準(zhǔn)液，5、4、3、2、1、0mL 50%乙醇加入，依照黃酮含量，在490nm測(cè)定吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)[2-3]。

1.2.2提取時(shí)間對(duì)黃銅含量的影響 ?精密稱(chēng)取槲蕨粉末1.00g，提取溶劑濃度為65%，料液比分別為1：30，提取溫度40℃，超聲功率400W，提取1次，分別超聲提取5、10、20、30、40、50min，3次重復(fù)，制備成供試品溶液，測(cè)定其吸光度，考察超聲時(shí)間對(duì)槲蕨黃酮含量的影響，確定最佳的超聲時(shí)間[4]。

1.2.3提取次數(shù)對(duì)黃酮含量的影響 ?精密稱(chēng)取槲蕨粉末1.00g，提取溶劑濃度、料液比、提取溫度、超聲功率按照1.2.2設(shè)置，提取時(shí)間20min，分別提取1次、2次、3次、4次，3次重復(fù)，制備成供試品溶液，測(cè)定其吸光度，考察超聲次數(shù)對(duì)槲蕨黃酮含量的影響，確定最佳的提取次數(shù)[5]。

1.2.4提取溶劑對(duì)黃酮含量的影響 ?精密稱(chēng)取槲蕨粉末1.00g，提取溶劑濃度、料液比、提取溫度、超聲功率、提取時(shí)間按照1.2.2設(shè)置，提取1次，提取溶劑濃度設(shè)45%、55%、65%、75%、85%、100%的乙醇共6個(gè)水平，3次重復(fù)，制備成供試品溶液，測(cè)定其吸光度，考察提取溶劑濃度對(duì)槲蕨黃酮含量的影響，確定最佳的提取溶劑濃度。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)數(shù)據(jù)計(jì)算出一元線(xiàn)性回歸方程為：y =10.89x+0.0459，相關(guān)系數(shù)R2=0.9998，表明對(duì)照品槲蕨黃酮含量在21～105ug/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。見(jiàn)圖1。

2.2 ?提取時(shí)間對(duì)黃酮含量的影響

見(jiàn)圖2。

圖2表明：提取時(shí)間比對(duì)黃酮含量有一定的影響，提取時(shí)間20min以前，隨著提取時(shí)間增加黃酮含量呈遞增趨勢(shì)，但提取時(shí)間達(dá)到20min以后，黃酮含量呈遞減趨勢(shì)，為了確定差異顯著性，進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3 ?提取次數(shù)對(duì)黃酮含量的影響

見(jiàn)圖3。

圖3表明：提取次數(shù)對(duì)黃酮含量有一定的影響，隨著提取次數(shù)增加黃酮含量呈遞增趨勢(shì)，但遞增趨勢(shì)趨于緩和，為了確定差異顯著性，進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4 ?提取溶劑濃度對(duì)黃酮含量影響

見(jiàn)圖4。

圖4表明：提取溶劑濃度比對(duì)黃酮含量有一定的影響，隨著提取溶劑濃度增加黃酮含量呈遞增趨勢(shì)，但提取溶劑濃度達(dá)到65%以后，呈遞減趨勢(shì)，為了確定差異顯著性，進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表3。

3 ?結(jié)論與討論

本試驗(yàn)選取提取時(shí)間、提取次數(shù)、提取溶劑3個(gè)單因素考查槲蕨黃酮成分超聲提取工藝，并進(jìn)行方差分析，篩選出3個(gè)單因素各自的最佳水平。結(jié)果表明：3個(gè)因素中，溶劑濃度對(duì)黃酮提取影響存在顯著性差異，結(jié)合3個(gè)因素不同水平綜合平均值比較，確定最佳生產(chǎn)方案是提取時(shí)間20min、提取次數(shù)1次，提取溶劑濃度為65%乙醇。由于時(shí)間關(guān)系，該試驗(yàn)僅針對(duì)3種因素進(jìn)行了比較，結(jié)果可作為正交試驗(yàn)的一個(gè)借鑒，希望能為槲蕨黃酮制備成其它的劑型奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

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