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        HSP90β 在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況及其與臨床病理特征的關(guān)系分析

        2018-02-21 12:58:46
        結(jié)直腸肛門外科 2018年6期
        關(guān)鍵詞:癌基因直腸癌病理

        邵 宇 陳 平 陸 俊 王 濤 史 俊

        (宜興市人民醫(yī)院胃腸外科 江蘇無(wú)錫 214200)

        結(jié)直腸癌(colorectal carcinoma,CRC)目前已成為全世界發(fā)病率僅次于肺癌、 乳腺癌與前列腺癌的第四大常見惡性腫瘤[1]。 在我國(guó),結(jié)直腸癌也是目前最常見的惡性腫瘤之一, 其發(fā)病率和死亡率逐年上升,已經(jīng)成為我國(guó)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。 2015 年中國(guó)癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示, 我國(guó)結(jié)直腸癌新發(fā)病例37.6萬(wàn),其中死亡病例19.1 萬(wàn)[2]。因結(jié)直腸癌患者就診時(shí)已多處于晚期,伴隨腫瘤的轉(zhuǎn)移,手術(shù)根治困難,預(yù)后差。熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一組細(xì)胞內(nèi)分子伴侶蛋白質(zhì),具有重要生物學(xué)功能,腫瘤細(xì)胞在受到藥物等外界刺激時(shí)可誘導(dǎo)生成HSP, 拮抗細(xì)胞的凋亡。 HSP90 是HSP 中的一類蛋白,以是否含豐富的谷氨酰胺片段可分為HSP90α 和HSP90β亞型。 本研究旨在探討HSP90β 在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)情況及其與臨床病理特征的關(guān)系,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1 材料和方法

        1.1 材料與方法 以宜興市人民醫(yī)院普外科于2000 年1 月至2007 年12 月間行結(jié)直腸癌腫瘤切除術(shù)的218 結(jié)直腸癌患者為例, 各收集結(jié)直腸癌組織石蠟標(biāo)本1 份。 所納入患者的臨床資料包括手術(shù)日期、性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤組織分級(jí)、腫瘤TNM 分期(UICC 第八版)、腫瘤臨床分期等。 本研究已通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核。

        1.2 主要試劑 山羊抗人HSP90β 多克隆抗體(Santa Cruz);SP 免疫組化試劑盒、DAB 顯色試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。

        1.3 實(shí)驗(yàn)方法 山羊抗人HSP90β 多克隆抗體的濃度為1:100。 標(biāo)本蠟塊切片后,按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行免疫組化染色。對(duì)于染色結(jié)果的評(píng)估,參照雙評(píng)分半定量法[3]:(1)染色強(qiáng)度計(jì)分,以無(wú)染色為0 分、淡黃色為1 分、棕黃色為2 分、棕褐色為3 分;(2)陽(yáng)性細(xì)胞染色數(shù)量計(jì)分, 以未見陽(yáng)性細(xì)胞為0 分、<25%計(jì)為1 分、26%~50%記為2 分、51%~75%記為3 分、>75%記為4 分。 將所得的兩個(gè)分?jǐn)?shù)相乘,使用SPSS軟件繪制ROC 曲線得到分界值5.500, 將0~4 分定義為HSP90β 低表達(dá),6~12 分定義為HSP90β 高表達(dá)。

        1.4 觀察指標(biāo) (1)觀察HSP90β 在結(jié)直腸癌細(xì)胞中的表達(dá)情況;(2)分析HSP90β 的表達(dá)水平與患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。HSP90β 的表達(dá)水平與患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。 以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 HSP90β 在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況HSP90β 主要表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)區(qū)域,見圖1。

        圖1 HSP90β 在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況(×100,SP)

        表1 HSP90β 的表達(dá)水平與患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系(n)

        2.2 HSP90β 的表達(dá)水平與患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 HSP90β 的表達(dá)水平與T 分期、N 分期以及臨床分期有關(guān)(均P <0.05),與性別、年齡、腫瘤部位、組織分級(jí)及M 分期無(wú)關(guān)(均P >0.05)。 見表1。

        3 討 論

        結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率和死亡率均較高。 目前認(rèn)為其發(fā)病與多種因素有關(guān),遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、生物技術(shù)等多學(xué)科的發(fā)展對(duì)研究結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程具有重要的意義。

        HSP 作為在生物界中普遍存在的一類蛋白質(zhì),廣泛參與細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、發(fā)育,其維持細(xì)胞生存的作用導(dǎo)致其與腫瘤的生長(zhǎng)有密切關(guān)系[4]。 HSP90作為其中一類蛋白,在腫瘤的發(fā)生發(fā)展、癌基因與抑癌基因之間的相互作用以及細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)化中起到重要的作用[5]。 在細(xì)胞中,HSP90β 與癌基因、抑癌基因的產(chǎn)物結(jié)合,通過(guò)形成蛋白復(fù)合體,介導(dǎo)構(gòu)象的成熟及轉(zhuǎn)運(yùn),從而參與細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過(guò)程。同時(shí),HSP90β 在細(xì)胞增殖過(guò)程中,作為分子伴侶影響蛋白構(gòu)象,從而參與細(xì)胞周期[6]。 有研究表明,HSP90β 在惡性腫瘤細(xì)胞系的表達(dá)水平較正常組織明顯升高, 也提示HSP90β 可能參與了細(xì)胞的惡性增殖過(guò)程[7]。 本研究中,HSP90β 的表達(dá)水平與結(jié)直腸癌T 分期、N 分期以及臨床分期有關(guān),與上述文獻(xiàn)內(nèi)容相符。 此外,有報(bào)道稱,HSP90β 與腫瘤對(duì)化療藥物的耐藥性的產(chǎn)生有關(guān), 主要與參與細(xì)胞耐藥相關(guān)蛋白構(gòu)象的成熟與定位、 下調(diào)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)及蛋白酶活性等有關(guān)[8-9]。因此,進(jìn)一步研究HSP90β 在結(jié)直腸癌耐藥中的表達(dá)規(guī)律及與預(yù)后關(guān)系, 可能為臨床合理的治療提供一定的理論依據(jù)。 本研究由于隨訪數(shù)據(jù)的欠完善,對(duì)于HSP90β 表達(dá)水平與患者預(yù)后、對(duì)化療藥物耐藥情況的相關(guān)性未能做進(jìn)一步分析, 有待后續(xù)研究。

        綜上所述,HSP90β 的不同表達(dá)水平與T 分期、N 分期以及臨床分期有關(guān), 提示了其可能參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。

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