張宏梅+崔佰吉
【摘要】目的 探討血清藥理學(xué)方法在中藥苦參抗腫瘤作用研究中的應(yīng)用價(jià)值。方法 選取20只SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,分別給予中藥苦參灌胃(給藥組)和生理鹽水灌胃(對(duì)照組)進(jìn)行對(duì)照分析,通過(guò)噻唑藍(lán)法檢測(cè)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察以及細(xì)胞周期分析,對(duì)中藥苦參的抗腫瘤作用做出評(píng)價(jià)。結(jié)果 與對(duì)照組相比,給藥組的對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率相對(duì)更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),對(duì)于腫瘤細(xì)胞細(xì)胞周期分布的影響更為顯著。在給藥組中,含藥血清濃度越高,其對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率也就越高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 經(jīng)過(guò)血清藥理學(xué)方法研究,能夠從中了解到中藥苦參在抗腫瘤方面具有良好的作用效果。
【關(guān)鍵詞】血清藥理學(xué)方法;中藥苦參;抗腫瘤
【中圖分類號(hào)】R285 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2017.33..01
1 資料與方法
1.1 一般資料
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為20只SD大鼠(成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供),體重220~250 g,雌雄各10只。實(shí)驗(yàn)藥劑:噻唑藍(lán)、臺(tái)盼藍(lán)以及蛋白酶K,均由北京索萊寶科技有限公司提供。小牛血清(賽默飛世爾科技有限公司)。細(xì)胞株:SPC-A1人肺癌細(xì)胞,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所提供。檢測(cè)儀器:EUROStar II熒光顯微鏡(歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司)、流式細(xì)胞儀(貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)有限公司)、PCR擴(kuò)增儀和酶標(biāo)儀(賽默飛世爾科技有限公司)以及高效液相色譜(HPLC)等。水煎中藥苦參,煎劑濃度為3 mg/ml。
1.2 方法
選取10只SD大鼠(雄、雌各5只)作為給藥組,灌服中藥苦參煎劑(150 ml/kg)。2次/d。另外選取10只SD大鼠(雄、雌各5只)作為對(duì)照組,灌服生理鹽水
(150 ml/kg),2次/d。連續(xù)給藥3天后,行腹主動(dòng)脈采血,分離血清,獲得含藥血清和空白血清。其中含藥血清需要接受有效成分和含量的鑒定,離心、取上清液,并進(jìn)行等體積氯仿萃取,定容后進(jìn)行高效液相色譜分析。在含藥血清,中苦參堿和氧化苦參堿的濃度相對(duì)較高
將SPC-A1人肺癌細(xì)胞(5×104/mL)的加入96孔板(每孔含培養(yǎng)液100 μL),在培養(yǎng)箱(37℃,5%CO2)中進(jìn)行孵育。24 h后分為兩組,分別加入不同濃度的含藥血清和空包血清。在此基礎(chǔ)上,每孔加入生理鹽水,用以調(diào)整每孔細(xì)胞總體積。24 h后加入濃度為2 mg/mL的噻唑藍(lán)20 μL后,孵育4 h后去除上清液,使用酶標(biāo)儀進(jìn)行處理,測(cè)定吸光值,每個(gè)濃度平行測(cè)定3孔,計(jì)算平均吸光值,進(jìn)而得到中藥苦參對(duì)于SPC-A1人肺癌細(xì)胞的抑制率。
2 結(jié) 果
2.1 含藥血清對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用
給藥組,測(cè)得活細(xì)胞數(shù)為(491.44±28.62)×103/mL,生長(zhǎng)抑制率為(42.41±11.25)%。對(duì)照組,測(cè)得活細(xì)胞數(shù)為(992.18±114.26)×103/mL,對(duì)比差異顯著(P<0.05)。
2.2 不同濃度含藥血清對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用
對(duì)比2.5%、5%、10%、15%以及20%濃度的含藥血清對(duì)于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,見(jiàn)表1。
2.3 含藥血清和空白血清的腫瘤細(xì)胞周期分布分析
(見(jiàn)表2)
3 討 論
目前,中藥苦參提取物及其復(fù)方制劑在臨床疾病的治療中有著較為廣泛的應(yīng)用,且獲得了良好的療效,其應(yīng)用領(lǐng)域也在不斷拓展,并在抗腫瘤治療的研究中取得一定的進(jìn)展。中藥苦參的抗腫瘤作用并不十分明確,可能存在著一定的風(fēng)險(xiǎn)性,則需要通過(guò)含藥血清試驗(yàn)研究來(lái)予以驗(yàn)證和判斷。
綜上所述,中藥苦參有效成分在抗腫瘤治療方面具有很高的應(yīng)用價(jià)值,需要進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用,這對(duì)于抗腫瘤治療的發(fā)展有著十分重要的意義。
參考文獻(xiàn)
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本文編輯:李 豆endprint