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【摘要】 目的：探討水通道蛋白4抗體（AQP4-Ab）、載脂蛋白E（ApoE）、白介素-6（IL-6）在評(píng)價(jià)視神經(jīng)脊髓炎星形膠質(zhì)細(xì)胞損害與患者功能缺損關(guān)系中的臨床價(jià)值。方法：選取2015年5月-2017年4月于本院神經(jīng)內(nèi)科進(jìn)行診治的116例急性發(fā)病期視神經(jīng)脊髓炎（NMO）患者作為NMO組，選取同期本院門(mén)診收治的緊張性頭痛患者50例作為對(duì)照組。比較兩組患者血清和腦脊液中AQP4-Ab、ApoE、IL-6水平，以及相關(guān)指標(biāo)的Spearson相關(guān)性分析。結(jié)果：NMO組患者血清AQP4-Ab、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，ApoE水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。NMO組患者腦脊液AQP4-Ab、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，ApoE水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。經(jīng)過(guò)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab與ApoE呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與IL-6呈正相關(guān)關(guān)系。經(jīng)過(guò)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab、IL-6與EDSS評(píng)分呈正相關(guān)關(guān)系，ApoE與EDSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論：NMO患者會(huì)伴隨明顯星形膠質(zhì)細(xì)胞損害，其損害程度與患者神經(jīng)功能缺損有關(guān)，且AQP4-Ab、APOE、IL-6水平在NMO疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有重要作用。

【關(guān)鍵詞】 水通道蛋白4抗體； 載脂蛋白E； 白細(xì)胞介素-6； 視神經(jīng)脊髓炎

【Abstract】 Objective：To investigate the clinical value of aquaprin 4 antibody（AQP4-Ab），apolipoprotein E（ApoE） and interleukin-6（IL-6） in evaluating the relationship between astrocyte damage and functional impairment in patients with neuromyelitis optica（NMO）.Method：From May 2015 to April 2017，116 patients with acute onset NMO treated in department of endocrinology of our hospital were selected as NMO group.50 patients with tension headache treated in our hospital during the same period were selected as the control group.The levels of AQP4-Ab，ApoE and IL-6 in serum and cerebrospinal fluid of two groups were compared，and Spearson correlation analysis of related indexes.Result：The serum levels of AQP4-Ab and IL-6 in NMO group were significantly higher than those in the control group，and the level of ApoE was significantly lower than that in the control group（P<0.05）.The levels of AQP4-Ab and IL-6 in CSF of NMO group were significantly higher than those in control group，and the level of ApoE was significantly lower than that of the control group（P<0.05）.Through Spearson correlation analysis，AQP4-Ab in CSF of patients in NMO group was negatively correlated with ApoE，and positively correlated with IL-6.Through Spearson correlation analysis，the cerebrospinal fluid AQP4-Ab，IL-6 and EDSS score in NMO group were positively correlated，and ApoE and EDSS scores were negatively correlated.Conclusion：NMO patients are associated with obvious astrocyte damage，and the extent of damage is related to neurological impairment，and the levels of AQP4-Ab，APOE and IL-6 play an important role in the pathogenesis and development of NMO.

【Key words】 Aquaprin 4 antibody； Apolipoprotein E； Interleukin-6； Neuromyelitis optica

First-authors address：Inner Mongolia International Mongolian Hospital，Hohhot 010065，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.02.012

視神經(jīng)脊髓炎（neuromyelitis optica，NMO）屬于中樞神經(jīng)系炎性統(tǒng)脫髓鞘神經(jīng)疾病，是一種選擇性自身免疫性疾病，主要侵襲性損傷機(jī)體的視神經(jīng)和脊髓，可引發(fā)視神經(jīng)炎或脊髓炎，其病理病變?yōu)槊撍枨?，逐漸形成硬化斑及壞死空洞，同時(shí)血管周?chē)€會(huì)伴發(fā)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)[1-2]。越來(lái)越多的研究表明，水通道蛋白4抗體（aquaprin 4 antibody，AQP4-Ab）是NMO-IgG識(shí)別的靶分子，在NMO發(fā)病機(jī)制中具有重要作用[3]。載脂蛋白E（apolipoprotein，ApoE）主要由星形膠質(zhì)細(xì)胞合成，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)中脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)[4]。當(dāng)星形膠質(zhì)細(xì)胞受損時(shí)，會(huì)高表達(dá)白介素-6（interleukin-6，IL-6），推測(cè)IL-6參與NMO的發(fā)病過(guò)程[5]。因此，為了探討AQP4-Ab、APOE、IL-6在評(píng)價(jià)視神經(jīng)脊髓炎星形膠質(zhì)細(xì)胞損害與患者功能缺損關(guān)系中的臨床價(jià)值，選取本院神經(jīng)內(nèi)科收治的116例急性發(fā)病期NMO患者進(jìn)行研究，該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意并簽署知情同意書(shū)。現(xiàn)報(bào)告如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 在2015年5月-2017年4月期間，有116例急性發(fā)病期NMO患者于本院內(nèi)分泌科進(jìn)行診治，納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合2006年Wingerchuk修訂的NMO診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；視神經(jīng)炎；急性脊髓炎；NMO-IgG血清陽(yáng)性；腦部影像學(xué)檢查不符合典型多發(fā)性硬化。排除標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病前1個(gè)月接受激素、免疫球蛋白及其他免疫抑制治療；疾病緩解期。選取同期本院門(mén)診收治的緊張性頭痛患者50例作為對(duì)照組，納入標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)損害的陽(yáng)性體征；頭顱MRI、CT檢查正常。

1.2 方法 兩組患者在入院后同一天抽取靜脈血4 mL，3000 r/min離心獲得血清樣品，保存于-80 ℃待檢。在同天兩組患者均進(jìn)行腰椎穿刺，吸取3 mL腦脊液樣本，保存于-80 ℃待檢。AQP4-Ab采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，試劑盒來(lái)自上海羽朵生物科技有限公司。ApoE采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，試劑盒來(lái)自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司。IL-6采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)，試劑盒來(lái)自北京普恩光德生物科技開(kāi)發(fā)有限公司。檢測(cè)設(shè)備為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)。采用Spearman對(duì)NMO的相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料比較 NMO組中，男9例，女107例，年齡16～70歲，平均（42.15±11.37）歲，根據(jù)臨床擴(kuò)展致殘量表評(píng)分（expanded disability status scale，EDSS），分為低分組（≤2.5分）23例，中分組（2.5～6分）72例，高分組（≥6分）21例。對(duì)照組中，男4例，女46例，年齡17～77歲，平均（41.85±10.39）歲。兩組患者基本資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組患者血清AQP4-Ab、ApoE及IL-6水平比較 NMO組患者血清AQP4-Ab、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，ApoE水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 兩組患者腦脊液AQP4-Ab、ApoE及IL-6水平比較 NMO組患者腦脊液AQP4-Ab、IL-6水平均顯著高于對(duì)照組，ApoE水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab與ApoE、IL-6的相關(guān)性分析 經(jīng)過(guò)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab與ApoE呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與IL-6呈正相關(guān)關(guān)系，見(jiàn)表3。

2.5 NMO組腦脊液中AQP4-Ab、ApoE、IL-6水平與EDSS評(píng)分的相關(guān)性分析 經(jīng)過(guò)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab、IL-6與EDSS評(píng)分呈正相關(guān)關(guān)系，ApoE與EDSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，見(jiàn)表4。

3 討論

NMO是選擇性損傷中樞神經(jīng)系統(tǒng)的視神經(jīng)和脊髓的自身免疫性脫髓鞘疾病， NMO多發(fā)于女性，且大多為中年婦女[7-8]。NMO的臨床癥狀較為嚴(yán)重，且病情進(jìn)展快，發(fā)作頻繁，受損脊髓節(jié)段多。NMO造成損害的部位包括視神經(jīng)、延髓頸髓交界以及多個(gè)脊髓節(jié)段，脫髓鞘、神經(jīng)元和軸突的損傷都非常嚴(yán)重[9-10]。因此其預(yù)后差，致殘率較高。星膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛存在，對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)、支持作用，且參與機(jī)體的組織修復(fù)、免疫防御機(jī)制等生理過(guò)程。研究表明，NMO患者會(huì)出現(xiàn)星膠質(zhì)細(xì)胞損害及血腦屏障的破壞[11]。

許多研究表明，在NMO的發(fā)病機(jī)制中，AQP4-Ab有重要意義[12]。AQP4-Ab表達(dá)陽(yáng)性導(dǎo)致NMO患者出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損的原因可能有[13-14]：（1）AQP4-Ab與血腦屏障的破壞有關(guān)；（2）AQP4-Ab進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，AQP4-Ab與視神經(jīng)上的AQP4結(jié)合，可激活補(bǔ)體依賴(lài)性細(xì)胞毒性，以及抗體依賴(lài)細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性，對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞造成損害，以及促使神經(jīng)膠質(zhì)不斷增生；（3）AQP4-Ab可激活炎癥免疫反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞因子分泌，導(dǎo)致炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，使得神經(jīng)元胞體和少突膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生壞死，引起廣泛性脫髓鞘病變，最終導(dǎo)致出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損癥狀。本研究結(jié)果中，NMO組患者血清及腦脊液AQP4-Ab水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。提示星膠質(zhì)細(xì)胞的損害與AQP4-Ab水平提高有關(guān)。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，ApoE主要由星形膠質(zhì)細(xì)胞合成，其主要對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的脂類(lèi)代謝起調(diào)節(jié)作用，如ApoE轉(zhuǎn)運(yùn)的脂質(zhì)可用于神經(jīng)軸突的生長(zhǎng)和髓鞘的合成[15-16]。其還具有保護(hù)血腦屏障、保護(hù)神經(jīng)及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等作用。AQP4-Ab對(duì)血腦屏障的損害，會(huì)使血腦屏障的通透性增加，進(jìn)而使大量炎性因子和抗體通過(guò)血腦屏障，浸潤(rùn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，而ApoE可通過(guò)調(diào)節(jié)星膠質(zhì)細(xì)胞的緊密性，來(lái)維護(hù)血腦屏障的完整[17]。因此，可以推測(cè)ApoE對(duì)NMO患者的神經(jīng)具有保護(hù)作用。本文研究結(jié)果中，NMO組患者血清及腦脊液ApoE水平均顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。另外，經(jīng)過(guò)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab與ApoE呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。提示ApoE對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用，而星膠質(zhì)細(xì)胞的損害使ApoE水平顯著下降。

血腦屏障的破壞會(huì)導(dǎo)致炎性反應(yīng)的發(fā)生，進(jìn)而促使IL-6、IL-10等炎性因子高表達(dá)[18]。IL-6可以通過(guò)Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子通路激活對(duì)細(xì)胞的損傷。有研究表明，星膠質(zhì)細(xì)胞受損后，可大量分泌炎性因子IL-6，而IL-6又可促進(jìn)漿細(xì)胞活性的提高，從而產(chǎn)生更多的AQP4-Ab[19-20]。另外，IL-6還可激活無(wú)活性的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs），進(jìn)一步對(duì)血腦屏障及血腦脊液屏障造成破壞，促使大量AQP4-Ab進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，最終引發(fā)NMO。本研究結(jié)果顯示，NMO組患者血清及腦脊液IL-6水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab與IL-6呈正相關(guān)關(guān)系，與ApoE呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。另外，經(jīng)Spearson相關(guān)性分析，NMO組患者腦脊液中AQP4-Ab、IL-6與EDSS評(píng)分呈正相關(guān)關(guān)系，ApoE與EDSS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。說(shuō)明NMO患者的IL-6、ApoE與AQP4-Ab、疾病嚴(yán)重程度均有關(guān)。因此，此三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)NMO疾病的嚴(yán)重程度具有一定的預(yù)測(cè)作用，可以作為臨床疾病預(yù)后的參考指標(biāo)。endprint

綜上，NMO患者會(huì)伴隨明顯星形膠質(zhì)細(xì)胞損害，其損害程度與患者神經(jīng)功能缺損有關(guān)，且AQP4-Ab、ApoE、IL-6水平在NMO疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有重要作用。

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（收稿日期：2017-08-30） （本文編輯：程旭然）endprint