劉凱歌　陳培娟

摘 要：使用疫病檢測(cè)技術(shù)能夠促進(jìn)雞類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展?；诖?，本文闡述了雞的動(dòng)物疫病檢測(cè)方法，包括血清中和實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、熒光抗體等血清學(xué)檢測(cè)方法，同時(shí)，提出了核酸探針?lè)椒?、熒光?shí)時(shí)定量檢測(cè)方法、寡核苷酸指紋圖譜方法等分子生物學(xué)診斷方法，通過(guò)論述以上方法，為檢測(cè)人員提供一些參考。

關(guān)鍵詞：雞新城疫??；血清學(xué)檢測(cè)方法；分子生物學(xué)檢測(cè)方法

新城疫等疫病能夠威脅雞的生存，具有發(fā)病速度快、死亡率高、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)，是阻礙雞類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展的主要原因。通過(guò)對(duì)新城疫等疫病進(jìn)行正確的診斷是控制疾病發(fā)展、蔓延的重要前提?，F(xiàn)如今，雞的疫病檢測(cè)方法主要包括血清學(xué)檢測(cè)方法及分子生物學(xué)檢測(cè)方法，通過(guò)研究這兩種檢測(cè)方法，對(duì)于防治雞疫病具有重要意義。

一、血清學(xué)檢測(cè)方法

1.酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是現(xiàn)如今較為廣泛的檢測(cè)方法，是通過(guò)物理原理將血清中的抗體吸附在載體上，來(lái)實(shí)現(xiàn)免疫檢測(cè)。它具有靈敏、快速、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，將其應(yīng)用在新城疫病檢測(cè)中，能夠有效的檢測(cè)出疫病病毒。

2.熒光抗體方法

熒光抗體方法是將熒光性的染料結(jié)合抗體免疫球蛋白，成為標(biāo)記抗體，將此類(lèi)抗體和相抗源結(jié)合，能夠發(fā)生特異性變化。此時(shí)用紫外線(xiàn)進(jìn)行照射，可以在顯微鏡下看到由抗原激發(fā)出來(lái)紅色或是藍(lán)色的光纖，確定感染源。熒光抗體方法具有簡(jiǎn)單、便捷、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可以用在快速檢測(cè)中。

二、分子生物學(xué)診斷方法

1.核酸探針?lè)椒?/p>

核酸探針?lè)椒ㄊ窃讷@得特異病毒片段基礎(chǔ)上，增加生物素，來(lái)作為一種分子雜交的檢測(cè)方法。其可以應(yīng)用在病毒原位雜交，來(lái)確定病毒的分布順序，同時(shí)，使用探針還能夠區(qū)分病毒的強(qiáng)弱，具有極高的應(yīng)用價(jià)值。

2.熒光實(shí)時(shí)定量檢測(cè)方法

熒光實(shí)時(shí)定量檢測(cè)方法是在PCR反應(yīng)系統(tǒng)中增加熒光，使用信號(hào)來(lái)檢測(cè)整個(gè)PCR流程，最后通過(guò)曲線(xiàn)來(lái)描繪整個(gè)定量分析的方法。熒光實(shí)時(shí)定量檢測(cè)方法主要分為兩種：一是Taq Man；二是Green 1熒光染料?？梢哉f(shuō)，熒光實(shí)施定量檢測(cè)方法是基因檢測(cè)方法的飛躍。

3.寡核苷酸指紋圖譜方法

寡核苷酸指紋圖譜方法是將提純的RNA病毒進(jìn)行酶切，形成大小不一的片段，然后采用放射型光線(xiàn)定位，進(jìn)行雙向電泳，再通過(guò)顯影功能，得到光照?qǐng)D譜。指紋圖譜可以顯示出病毒不同株的變異效果，因此，在防治雞疾病中具有非常突出的作用。

三、雞的動(dòng)物疫病檢測(cè)方法具體應(yīng)用

1.將檢測(cè)方法用在雞的疾病檢測(cè)中

血清學(xué)檢測(cè)方法及分子生物學(xué)診斷方法是我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)，如今已經(jīng)成為雞疾病診斷和控制必不可少的手段，將它們應(yīng)用在大型雞類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)中，能夠有效防治雞疫病，提高養(yǎng)殖效益。

（1）雞類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)需要主動(dòng)配合血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)，來(lái)對(duì)雞群進(jìn)行免疫檢測(cè)。通過(guò)定期開(kāi)展血清學(xué)及生物分子檢測(cè)方法，分階段、分群監(jiān)控雞群的健康，來(lái)提高免疫效果。比如面對(duì)新城疫病，很多成年的雞或者攜帶抗體的雞，總是最后感染，而生長(zhǎng)期的雞卻最先發(fā)?。?/p>

（2）要開(kāi)展雞疫病的病原監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查，掌握疫病產(chǎn)生的規(guī)律及多發(fā)季節(jié)，來(lái)把握疫情。如果雞類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)受到了病原攻擊，要使用血清學(xué)檢測(cè)方法及分子生物學(xué)檢測(cè)方法進(jìn)行免疫檢測(cè)，并將結(jié)果和養(yǎng)殖場(chǎng)的雞群發(fā)病、用藥等方面進(jìn)行結(jié)合，做出最科學(xué)的檢測(cè)報(bào)告及分析，從控制疫病的發(fā)展，確保雞群的存活率。

2.將檢測(cè)方法用在雞疾病預(yù)警中

（1）各級(jí)疾病監(jiān)控站需要對(duì)本地區(qū)的雞養(yǎng)殖場(chǎng)逐一進(jìn)行免疫監(jiān)督，確保防疫落實(shí)到位，發(fā)現(xiàn)疫情要趁早；雞疫病種類(lèi)很多，在進(jìn)行接種時(shí)，需使用血清學(xué)檢測(cè)，來(lái)確定疫病的種類(lèi)及程度；在檢測(cè)過(guò)程中，要建立免疫檢測(cè)制度，切實(shí)做好雞疾病的防疫檢測(cè)工作。

（2）在采血清時(shí)，要保證標(biāo)本采取的準(zhǔn)確性及全面性；在相關(guān)部門(mén)發(fā)布疫情信息后，要及時(shí)檢測(cè)雞群是否發(fā)生疫情現(xiàn)象，做好防疫準(zhǔn)備，購(gòu)買(mǎi)藥品及藥具設(shè)備，來(lái)做到早診斷、早治療；在開(kāi)展預(yù)警工作中時(shí)，疫病防控中心也要使用血清學(xué)等科學(xué)的檢測(cè)方法，來(lái)確定地區(qū)疫病情況，交代流行病特點(diǎn)及疫病防控方法，進(jìn)而將雞疫病控制在一定范圍內(nèi)，來(lái)開(kāi)展針對(duì)化的檢測(cè)工作。

（3）很多雞類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)都配備了血清學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，來(lái)開(kāi)展抗體檢測(cè)工作。實(shí)驗(yàn)室主要采用血凝實(shí)驗(yàn)及ELISA實(shí)驗(yàn)，血凝實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便，比如試管凝聚試驗(yàn)、禽流感及新城疫病等；ELISA實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)雞瘟、禽流感等檢測(cè)中。ELISA檢測(cè)具有敏感、重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。因此，雞類(lèi)養(yǎng)殖場(chǎng)可以使用凝血試驗(yàn)及免疫技術(shù)來(lái)檢測(cè)雞的抗體滴度，進(jìn)而真正推動(dòng)血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)進(jìn)步。

3.將檢測(cè)方法用在雞的免疫評(píng)估中

（1）監(jiān)測(cè)免疫效果。使用血清學(xué)檢測(cè)方法來(lái)監(jiān)測(cè)雞群的免疫抗體，可以得知雞的抗體水平及疫情來(lái)確定疫苗。分析雞群的疫情，能夠?yàn)閺V大養(yǎng)殖人員提供一些針對(duì)性的方法，及時(shí)關(guān)注疫病隱患，進(jìn)而采取有效措施。

（2）修訂免疫程序?，F(xiàn)如今，很多雞類(lèi)養(yǎng)殖人員的檢測(cè)方法都是借鑒他人的，由于地區(qū)不同，并非適合所有養(yǎng)殖戶(hù)。而使用血清學(xué)檢測(cè)方法及分子生物學(xué)檢測(cè)方法，定期開(kāi)展檢測(cè)，能夠確定雞群的免疫接種時(shí)間。在使用疫苗時(shí)，充分考慮MDA的影響，測(cè)定出母源抗體的消長(zhǎng)水平，來(lái)確定首次免疫時(shí)機(jī)。檢測(cè)標(biāo)本中的母源抗體在一定時(shí)間內(nèi)，會(huì)產(chǎn)生變化，抗體水平過(guò)高會(huì)導(dǎo)致免疫失敗；抗體水平過(guò)低，會(huì)導(dǎo)致免疫空白期，給雞群帶來(lái)潛在威脅，因此，通過(guò)定期開(kāi)展雞群血清學(xué)檢測(cè)及分支生物學(xué)檢測(cè)，能夠制定合理的免疫程序。

四、結(jié)語(yǔ)

綜上所述，通過(guò)血清學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)方法，能夠有效預(yù)防雞疫病，在此基礎(chǔ)上，雞在接種時(shí)，使用血清學(xué)檢測(cè)方法，能夠確定疫病的種類(lèi)及程度，選取正確的疫苗；同時(shí)，通過(guò)定期使用血清學(xué)生物分子檢測(cè)方法，分階段監(jiān)控雞群健康，能夠提高免疫效果。因此，合理使用血清學(xué)及分子生物檢測(cè)方法能夠提高雞的存活率。

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