王雅靜, 李郁婷, 劉 泉, 吳學(xué)宏

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院植物病理學(xué)系, 北京 100193)

棉花Gossypiumspp.為錦葵科Malvaceae棉屬Gossypium植物,原產(chǎn)于熱帶及亞熱帶地區(qū),是主要的天然纖維作物,也是第二大植物蛋白資源和重要的油料作物,廣泛應(yīng)用于輕工、飼料、醫(yī)藥及軍工等產(chǎn)業(yè)[1-2]。世界上種植棉花的國(guó)家主要有印度、中國(guó)、美國(guó)和烏茲別克斯坦等[2]。我國(guó)棉花主產(chǎn)區(qū)分布在20多個(gè)省、直轄市、自治區(qū),播種面積約為422.23萬(wàn) hm2[3]。棉花輪紋斑病,又稱黑斑病(Alternaria leaf spot, black leaf spot),作為一種常見(jiàn)的侵染性真菌病害,在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)生,對(duì)棉花生產(chǎn)危害嚴(yán)重[4]。本文圍繞棉花輪紋斑病的癥狀、發(fā)生與危害、病原菌種類、病害循環(huán)和發(fā)病條件以及綜合防控技術(shù)進(jìn)行綜述。

1 棉花輪紋斑病的癥狀、發(fā)生與危害

棉花輪紋斑病可以侵染棉花的子葉和真葉、莖稈、棉鈴和花芽,其中對(duì)葉部的危害最為嚴(yán)重[5-6],在棉花生長(zhǎng)的整個(gè)周期均可發(fā)生[7],大多發(fā)生于棉花幼苗期子葉和成株期葉片上[4]。在幼嫩的子葉上,病害的典型表現(xiàn)為棕色小圓形病斑,病斑邊緣紫色;在適宜條件下,病斑直徑可擴(kuò)展至10～15 mm;有時(shí)葉柄也會(huì)受害,出現(xiàn)黃褐色條斑,嚴(yán)重時(shí)子葉干枯、脫落[8-9]。成株期葉片上的病斑初為褐色圓點(diǎn)斑,伴有紫色暈圈,直徑約1～2 mm,嚴(yán)重時(shí)病斑直徑可達(dá)2～3 cm;隨著病害的發(fā)生,病斑擴(kuò)展為灰褐色近圓形,變干易碎,壞死斑可能會(huì)破裂并脫落,形成“洞眼”;病斑兩面均具有同心輪紋,葉片正面更為明顯;條件適宜時(shí)病斑表面出現(xiàn)黑色霉?fàn)钗?即為病原菌[5,10]。

輪紋斑病在田間的發(fā)生規(guī)律為:苗期和8月份之前發(fā)病極輕;成株期8月份后病情發(fā)展迅速;9月末病情指數(shù)和發(fā)病率都達(dá)到最高峰[11]。

棉花輪紋斑病在我國(guó)的主要棉區(qū)均有發(fā)生,特別是北方棉區(qū),在陰濕多雨的年份極易發(fā)生大流行,嚴(yán)重時(shí)棉葉脫落、棉株光稈、枯死[12]。在棉花葉部病害中,輪紋斑病分布最廣、流行頻率極高、 危害最嚴(yán)重[13];據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),發(fā)病較輕的地區(qū)產(chǎn)量損失約為15%,發(fā)病嚴(yán)重的可達(dá)20%～50%。病害還會(huì)降低棉纖維的品質(zhì),給棉農(nóng)帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失[14]。

此外,輪紋斑病還會(huì)啟動(dòng)葉片衰老過(guò)程,引起棉花早衰,導(dǎo)致棉葉失綠、變黃、變紅,進(jìn)而葉片焦枯、脫落,嚴(yán)重時(shí)整株枯死[15],是導(dǎo)致棉花早衰的主要原因。輪紋斑病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中乙烯的釋放量增加,乙烯是造成植物成熟衰老的重要原因之一,因而加速棉花的衰老[16];同時(shí),鏈格孢菌毒素也可能是輪紋斑病導(dǎo)致葉片衰老的原因之一。近年來(lái),低溫和鏈格孢菌共同導(dǎo)致的棉花早衰,已遍及我國(guó)各棉花主產(chǎn)區(qū),嚴(yán)重影響我國(guó)棉花生產(chǎn)[7,17],危害較輕的年份經(jīng)濟(jì)損失為92.5億～130億元,危害嚴(yán)重的年份甚至可超過(guò)200億元[18]。

2 棉花輪紋斑病的病原菌種類

引起棉花輪紋斑病的病原菌有多種,其中大孢鏈格孢菌Alternariamacrospora和交鏈格孢菌A.alternata為世界范圍內(nèi)棉花輪紋斑病的主要病原菌[8];A.macrospora主要在棉花生長(zhǎng)前期侵染葉片,而在棉花生長(zhǎng)后期葉片更易被A.alternata侵染[5]。此外,細(xì)極鏈格孢菌A.tenuissima、棉鏈格孢菌A.gossypina等也較為常見(jiàn)[19-20]。

2.1 國(guó)外關(guān)于棉花輪紋斑病病原菌的研究

1918年,Faulwetter 最早發(fā)現(xiàn)棉花輪紋斑病時(shí),無(wú)法準(zhǔn)確地鑒定出其病原菌,但是認(rèn)為其病原菌與A.tenuis相似[21]。1964年,Calvert等報(bào)道輪紋斑病的病原菌為A.tenuis[22],而之后A.tenuis被命名為A.alternata[23]。1991年,Hillock在津巴布韋調(diào)查時(shí)也發(fā)現(xiàn)A.alternata是輪紋斑病的病原菌[21]。2000年和2001年,Palmateer等對(duì)美國(guó)阿拉巴馬州陸地棉的真菌多樣性調(diào)查研究發(fā)現(xiàn),A.alternata是棉花上最主要的病原菌[24]。

1956年,Rane和Patel 首次在印度發(fā)現(xiàn)棉花輪紋斑病時(shí),認(rèn)為其病原菌為A.macrospora[25]。1981年,印度草棉上發(fā)生的輪紋斑病也是由A.macrospora引起的[26]。同年,Hillock報(bào)道在坦桑尼亞發(fā)生的棉花葉部斑點(diǎn)病害中,A.macrospora是最為普遍的病原菌[27]。2008年,Dighule等從印度發(fā)病的棉葉上分離病原菌,確認(rèn)A.macrospora是造成棉花輪紋斑病的主要病原菌[28]。

1979年,埃及報(bào)道表明棉花輪紋斑病的致病菌為A.tenuissima[26]。1988年,Rotem在以色列進(jìn)行引起兩個(gè)最主要棉花品種‘Pima’和‘Acala’ 發(fā)病的病原菌種類研究時(shí)發(fā)現(xiàn),田間種植‘Pima’棉花時(shí),A.macrospora是主要病原菌,其次為A.alternata,且A.macrospora和A.alternata的周期性平均分離比為1∶0.4;而田間種植‘Acala’棉花時(shí),葉部病斑主要由A.alternata引起,其次為A.macrospora,且A.macrospora和A.alternata的分離比為1∶19[29]。1991年,Bashan等研究認(rèn)為,棉花輪紋斑病由A.alternata或A.alternata和A.macrospora混合侵染所致,并且A.alternata產(chǎn)生的孢子量遠(yuǎn)大于A.macrospora[30]。2007年,Bhuiyan等對(duì)澳大利亞北部的棉花種植區(qū)研究發(fā)現(xiàn),A.alternata和A.macrospora是引起棉花輪紋斑病的病原菌,其中A.macrospora是棉花生長(zhǎng)早期的主要病原菌,而在棉花生長(zhǎng)后期,則以A.alternata為主;同時(shí)還發(fā)現(xiàn),16%～65%的發(fā)病植株存在A.alternata和A.macrospora混合侵染的現(xiàn)象[5]。2016年,Sangeetha 等對(duì)印度7個(gè)棉花種植區(qū)調(diào)查研究后認(rèn)為棉花輪紋斑病的病原菌為A.alternata和A.macrospora[31]。

2.2 國(guó)內(nèi)關(guān)于棉花輪紋斑病病原菌的研究

國(guó)內(nèi)關(guān)于棉花輪紋斑病病原菌的研究甚少。1988年,商鴻生對(duì)來(lái)自陜西關(guān)中地區(qū)190份棉花輪紋斑病樣品進(jìn)行鑒定,表明其病原菌為A.macrospora[32]。1999年,盧金寶等在南疆地區(qū)棉花輪紋斑病發(fā)病嚴(yán)重的海島棉田塊連續(xù)取樣進(jìn)行分離培養(yǎng)鑒定,證實(shí)其病原菌為A.macrospora[19]。2011年,陳凱等從河南省部分地區(qū)感染輪紋斑病的棉株上采集病葉并分離病原菌,根據(jù)棉花病株癥狀及病菌的形態(tài)特征,并結(jié)合rDNA-ITS序列分析鑒定出其病原菌為A.tenuissima[20]。李莎從北京、天津、新疆、山東、河北、河南、江蘇等地采集發(fā)病葉片,分離得到17株病原菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,其中16株為A.alternata,1株為A.macrospora[33]。但是國(guó)內(nèi)未見(jiàn)關(guān)于輪紋斑病病原菌種群結(jié)構(gòu)研究的系統(tǒng)報(bào)道,我國(guó)其他棉花種植省份的主要病原菌尚不清楚,且2014年后未見(jiàn)關(guān)于輪紋斑病病原菌的報(bào)道,已報(bào)道省份的優(yōu)勢(shì)病原種群也有可能已經(jīng)發(fā)生改變。

3 病害循環(huán)和發(fā)病條件

棉花輪紋斑病病原菌以分生孢子或菌絲體的形式在棉籽短絨、病殘?bào)w上越冬,第二年作為初侵染源侵染子葉[9,34],一般經(jīng)傷口侵入[35]。條件適宜時(shí)再產(chǎn)生分生孢子,經(jīng)風(fēng)、氣流傳播或雨水滴濺在田間造成再侵染[9,21]。此外,播種帶菌種子能使幼苗發(fā)病,進(jìn)一步擴(kuò)大侵染[21]。

當(dāng)溫度在20～30℃范圍內(nèi),相對(duì)濕度大于80%的情況下輪紋斑病極易發(fā)生,降雨頻繁時(shí)則更加有利于病原菌的侵染和病害的擴(kuò)展[36]。當(dāng)田間早晨相對(duì)濕度較高而夜間相對(duì)濕度較低時(shí)輪紋斑病的病情指數(shù)會(huì)增加[37]。病原菌生長(zhǎng)的最適溫度為25℃[38],但也有研究表明,低溫脅迫可能會(huì)抑制棉花對(duì)鏈格孢菌的防御應(yīng)答,棉株抗病力降低,因而短暫低溫能誘發(fā)輪紋斑病的發(fā)生[16]。因此,當(dāng)晝夜溫差較大時(shí),棉株在夜間遭受短暫的低溫脅迫,輪紋斑病菌易于侵染葉片,從而導(dǎo)致輪紋斑的形成。秋季低溫高濕易誘發(fā)輪紋斑病發(fā)生大流行,此時(shí)正處于棉花生長(zhǎng)的中后期,棉花根系活力降低,各器官功能衰退,棉株的抗性水平下降,適宜的氣候條件再加上寄主本身抵抗力降低,病害極易發(fā)生大流行[19]。病原菌對(duì)酸堿度的適應(yīng)能力強(qiáng)(在pH為2～10的范圍內(nèi)均可發(fā)育)[39]。當(dāng)田間排水不良、偏施氮肥、植株遭受風(fēng)害或營(yíng)養(yǎng)不良時(shí)易于發(fā)病[36,38]。此外,缺鉀時(shí)棉花更易受輪紋斑病菌的侵染[40]。

4 棉花輪紋斑病的防控策略

齊放軍等[12]曾針對(duì)棉花早衰制定出一套防控技術(shù)體系,即“選種、壯苗、補(bǔ)鉀、抗逆、防病”。選擇生長(zhǎng)后期長(zhǎng)勢(shì)好、抗病、抗逆性強(qiáng)的品種,保證營(yíng)養(yǎng)供給充足,保障棉苗根系健康生長(zhǎng),適時(shí)補(bǔ)鉀,提高棉株防病、抗逆能力。這一防控體系中的“防病”,最主要的是預(yù)防棉花輪紋斑病的發(fā)生。

棉花輪紋斑病的發(fā)生與氣候條件、棉株生長(zhǎng)狀況以及栽培管理措施密切相關(guān),進(jìn)行防治時(shí)要采取“預(yù)防為主,綜合防治”的策略,密切監(jiān)測(cè)棉花輪紋斑病病原菌致病力的變化及棉花主要栽培品種的抗病性變化[12],因地制宜,科學(xué)防治。生產(chǎn)中以農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治為主,同時(shí)要結(jié)合抗病品種的選育以及生防制劑的研究和開(kāi)發(fā)。

4.1 農(nóng)業(yè)防治

4.1.1 加強(qiáng)田間管理

首先,收獲后應(yīng)徹底清除田間病殘組織,將帶菌表土和殘枝敗葉深翻于土中,消除病源,減少其傳播和病原越冬基數(shù)。其次,適當(dāng)休耕或與禾本科作物或綠肥輪作2～3年,降低菌源量,例如可與小麥、大麥、玉米和苜蓿等輪作,尤其是與水稻輪作能有效減輕病害發(fā)生[19,38]。在津巴布韋,當(dāng)棉花輪紋斑病大流行后,若繼續(xù)播種棉花,則會(huì)發(fā)現(xiàn)在棉花生長(zhǎng)初期就有大量幼苗子葉受到侵染;若在棉花種植期間休耕一季,可大大降低幼苗侵染率[21]。最后,要合理密植,避免棉株過(guò)密,及時(shí)整枝,改善田間通風(fēng)透光條件,提高棉株的抗逆性[38]。

4.1.2 棉花生長(zhǎng)期優(yōu)化水肥管理

對(duì)于陸地棉來(lái)說(shuō),當(dāng)其受到鏈格孢菌的嚴(yán)重侵染時(shí),若在棉株開(kāi)第一朵花后確保植株能獲得充足的水分,并保持土壤養(yǎng)分均衡特別是可利用的鉀肥充足則可避免病害大流行[21],但要避免大水漫灌而導(dǎo)致田間濕度過(guò)高。在棉花生長(zhǎng)中后期噴施葉面肥,已被證實(shí)是防治棉花輪紋斑病的最有效措施之一,并且要結(jié)合N、P、K肥增施有機(jī)肥,增強(qiáng)土壤基礎(chǔ)肥力水平[19];具體做法為:在棉花打頂化控后(7月下旬到8月初)噴施1～2次尿素、磷酸二氫鉀和硫酸鋅的混合液肥,用量為尿素1 500 g/hm2+磷酸二氫鉀600 g/hm2+硫酸鋅150 g/hm2。

4.2 化學(xué)防治

化學(xué)防治仍然是防治棉花輪紋斑病最主要的措施,包括種子處理和生長(zhǎng)期噴霧兩種方式。在生產(chǎn)實(shí)踐中要根據(jù)當(dāng)?shù)氐姆N植品種和病原菌種類等因地制宜選擇最為合適的殺菌劑,并根據(jù)氣候條件、棉株生長(zhǎng)狀況等合理使用。

4.2.1 種子處理

在播種前對(duì)棉種進(jìn)行處理,預(yù)防棉花輪紋斑病的發(fā)生。Shtienbeg用戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑?qū)Α甈ima’棉種進(jìn)行處理,發(fā)現(xiàn)在溫室條件下,這兩種殺菌劑能抑制幼苗期子葉的脫落;在大田條件下,經(jīng)過(guò)處理的種子可以延緩病害進(jìn)程,且這兩種殺菌劑的效果相同[41]。在我國(guó),有研究者提出用32%乙蒜素·三唑酮乳油1 000倍液浸種6～8 h,之后將種子撈出稍稍晾干再進(jìn)行拌種,用量為1.5 kg棉種拌8%拌種靈·福美雙可濕性粉劑10 g[34]。

4.2.2 苗期防治

齊苗后每5～7 d用25%多菌靈可濕性粉劑或40%多硫膠懸劑500倍液噴霧1次,連續(xù)噴2～3次;移栽大田后,在莖稈發(fā)病初期每7 d用32%乙蒜素·三唑酮乳油1 500倍液或50%代森錳鋅可濕性粉劑500倍液噴霧1次,連續(xù)2～3次,同時(shí)在噴藥時(shí)可混用0.3%磷酸二氫鉀溶液以提高防治效果[34]。

4.2.3 生長(zhǎng)中后期防治

棉花輪紋斑病的高發(fā)期一般在棉花生長(zhǎng)中后期,此時(shí)要注意天氣變化,在降雨以及突發(fā)降溫前及時(shí)噴藥保護(hù),藥劑可選擇代森錳鋅等保護(hù)性殺菌劑。病害發(fā)生時(shí),可選用三唑類藥劑進(jìn)行防治。

Bhattiprolu研究發(fā)現(xiàn)醚菌酯和代森錳鋅能有效控制輪紋斑病,提高棉田產(chǎn)量[42]。Housadoudar等研究發(fā)現(xiàn),用3%萎銹靈進(jìn)行種子處理+0.1%丙環(huán)唑進(jìn)行葉面噴施能顯著降低棉花輪紋斑病的病情指數(shù);而用3%萎銹靈種子處理+0.1%己唑醇葉面噴施經(jīng)濟(jì)效益更高[43]。Meena 和Ratnoo分別采用轉(zhuǎn)Bt棉花和非轉(zhuǎn)Bt棉花測(cè)試了8種殺菌劑(王銅、代森錳鋅、敵菌丹、戊唑醇、多菌靈、己唑醇、丙環(huán)唑、多菌靈+代森錳鋅)在0.1%和0.2%的濃度下對(duì)A.macrospora、A.gossypina和A.alternata引起的病害防治效果,代森錳鋅和己唑醇最為有效,其次為王銅和丙環(huán)唑,同時(shí)0.2%的濃度比0.1%更為高效[8]。Kapadiya等通過(guò)3年的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)70%克菌丹和5%己唑醇混配能有效降低輪紋斑病的病情指數(shù),并能提高籽棉產(chǎn)量,改善棉纖維純度、均勻度以及強(qiáng)度[44]。

但近年來(lái),國(guó)內(nèi)關(guān)于對(duì)防治棉花輪紋斑病藥劑篩選的研究甚少,生產(chǎn)實(shí)踐中常使用保護(hù)性殺菌劑或苯并咪唑類內(nèi)吸性殺菌劑等單一藥劑進(jìn)行防治,易使病原菌產(chǎn)生抗藥性,防治效果降低[45]。因此,應(yīng)展開(kāi)有效抑制輪紋斑病菌殺菌劑的篩選以及對(duì)安全高效的新殺菌劑的研發(fā)工作。

4.3 選用抗病品種

根據(jù)棉花輪紋斑病的發(fā)展趨勢(shì)和病害的危害性,加強(qiáng)抗病品種的選育。尤其是針對(duì)棉花生長(zhǎng)中后期對(duì)輪紋斑病的抗性,應(yīng)列入育種目標(biāo)中。Meena發(fā)現(xiàn)與轉(zhuǎn)Bt棉相比,非轉(zhuǎn)Bt棉對(duì)輪紋斑病的病原菌及其產(chǎn)生的毒素更為敏感[46]。Cotty曾研究了美國(guó)亞利桑那州普遍種植的棉花品種對(duì)A.macrospora的感病性,發(fā)現(xiàn)陸地棉Gossypiumhirsutum比海島棉G.barbadense更抗病,而在陸地棉栽培品種中,‘Deltapine 61’,‘Acala SJ-5’和‘McNair 235’比‘Deltapine Acala-90’更為抗病[39]。Cia對(duì)18個(gè)棉花基因型在自然狀態(tài)下對(duì)輪紋斑病的發(fā)病狀況研究后發(fā)現(xiàn),TMG 81 WS、IMA 09-474、NUOPAL、IAC 08-2031和IAC 26 RMD等5種基因型具有穩(wěn)定的抗病性[47]。Bhattiprolu對(duì)376種棉花基因型進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)TCH1717,RAJHH783等2種基因型對(duì)輪紋斑病免疫,且有47種基因型表現(xiàn)抗病性[48]。

但國(guó)內(nèi)對(duì)抗棉花輪紋斑病品種方面的報(bào)道甚少[49],因此應(yīng)當(dāng)開(kāi)展抗病品種的篩選工作,并且隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的發(fā)展,可以篩選抗病基因,將基因工程手段與傳統(tǒng)育種方式結(jié)合來(lái)培育抗病品種。

4.4 生物防治

近年來(lái),化學(xué)農(nóng)藥的過(guò)量使用對(duì)環(huán)境的危害嚴(yán)重,人們?cè)絹?lái)越重視對(duì)生態(tài)環(huán)境的保護(hù),病害生物防治的研究也越來(lái)越重要。

Jabaji-Hare等研究了非致病性雙核絲核菌和苯并噻二唑?qū)γ藁ㄝ喖y斑病的防治效果,發(fā)現(xiàn)非致病性雙核絲核菌的防治效果要優(yōu)于苯并噻二唑,且兩者具有協(xié)同作用[50]。陳凱等研究了7個(gè)哈茨木霉菌株對(duì)棉花輪紋斑病病原菌的室內(nèi)抑菌效果,篩選出兩株較為理想的拮抗木霉菌株TH和TA[20]。Bhattiprolu等報(bào)道哈茨木霉Trichodermaharzianum和綠色木霉T.viride能有效防治棉花輪紋斑病[51]。Bhattiprolu 發(fā)現(xiàn)利用熒光假單孢菌Pseudomonasfluorescens進(jìn)行種子處理和葉面噴施能夠顯著控制棉花輪紋斑病,降低病害嚴(yán)重度[52]。Kapadiya等發(fā)現(xiàn)熒光假單胞菌還能有效地控制細(xì)菌性葉枯病和灰霉病的發(fā)生。李莎篩選出一株對(duì)棉花輪紋斑病病原菌有拮抗作用的枯草芽胞桿菌Bacillussubtilis,其抑菌率可達(dá)78.1%,抑菌效果穩(wěn)定,具有較廣的抑菌譜,對(duì)鏈格孢菌的分生孢子、菌絲均有抑制和破壞作用,并有一定的田間防效[33]。Laxman 和Venkat 等從土壤中篩選出18株能有效抑制輪紋斑病病原菌生長(zhǎng)的根際細(xì)菌,抑制率均大于50%[54]。

5 展望

棉花輪紋斑病是棉花上一種重要的葉部病害,危害嚴(yán)重時(shí)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì)這種病害的研究主要集中于病原菌的鑒定、發(fā)病條件及化學(xué)殺菌劑的篩選等方面,近年來(lái)一些學(xué)者也著手研究其生物防治。國(guó)內(nèi)對(duì)于棉花輪紋斑病的病原菌種群結(jié)構(gòu)研究甚少,國(guó)外報(bào)道的5種病原菌中,在國(guó)內(nèi)只發(fā)現(xiàn)A.alternata、A.macrospora和A.tenuissima3種,且僅見(jiàn)于北京、天津、新疆、山東、河北、河南、江蘇、陜西等8個(gè)省(直轄市、自治區(qū))。此外,關(guān)于病原菌的侵染方式、致病機(jī)理、病原菌與寄主的互作機(jī)制、抗病品種的鑒定以及病原菌對(duì)殺菌劑的抗性等方面的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,明確棉花輪紋斑病病原菌在全國(guó)各地的種群結(jié)構(gòu)及其分布、病原菌與寄主的互作機(jī)制以及病原菌對(duì)殺菌劑的抗性機(jī)制,篩選有效防治該病害的殺菌劑,對(duì)棉花輪紋斑病綜合防控策略的制定具有重要意義。